Способ получения биомассы кормовых дрожжей Советский патент 1984 года по МПК C12N1/38 C12N1/22 C12R1/72 

ас ю

) 00 Изобретение относится к микробиологической промьшленности, а именно к производству кормовых дрожжей. Известен способ получения кормовых дрожжей путем культивирования их на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, минеральные соли в присутствии целлюло- эолитических ферментов {/11 « Недостатками данного способа являются низкий выход дрожжей., невоз можность отделения дрожжей от негидролизованных остатков растительного сырья, низкое содержание белка в полученном корме. Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту к предлагаемому является способ получения биомассы кормовых дрожжей, предусматривающий выращивание их на питательной среде, содержащей гидролизат целлюлозосодержащего растительного сырья в качестве источника углерода, источника азота и фосфора и стимулятор роста, в условиях аэрации среды. Согласно этому способу в качестве стимулятора роста использх ют аммонийные соли хинонполикарбоно вых. кислот . . „ Недостатком способа является низ кий выход биомассы. Цель изобретения - повьшение выхода биомассы дрожжей. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения биомассы кормовых дрожжей, предусматривающему выращивание их на пит тельной среде, содержащей гидролиза целлюлозосодержащего растительного сырья в качестве источника углерода источники азота и фосфора и стимуля тор роста, в условиях, аэрации среды в качестве стимулято а роста исполь зуют дезоксирибонуклеазу в количеств 0,1 мг/л среды. Сущность способа заключается в следующем, Дезоксирибонуклеазы представляют собой группу ферментов, способных деполимеризовать двзоксирибонуклеино вую кислоту. При действии дезоксирибонуклеазы на живые клетки наблюдаетсяувеличение в них синтеза дезоксирибонуклеиновой кислоты. Низкие концентрации дезоксирибонуклеаз, близкие к концентрации ферментов, находящихся в живой клетке, оказьшают стимулирующее влияние на синтез дезоксирибонуклеиновой кислоты, а следовательно, и на рост и размножение клеток. Пример 1.К питательной среде (гидролизат древесины с количеством РВ 0,98-1,0%, содержащий необходимые для роста дрожжей минеральные соли в пересчете на Pj0 250260 мг/л №j 480-490 мг/л,рН 4,2-4,4) добавляют коммерческий препарат гидролитического фермента панкреатической Дезоксирибонуклеазы.. Вносят дрожжи Candiada scottii КС-2 в количестве 25.г/л среды. Выращивание дрожжей проводят в лабораторном инокуляторе емкостью Зле рабочим объемом 1 л среды при 37-38° в условиях аэрации в течение 3,5 ч. Полученные данные приводятся в табл. 1. Таким образом, как видно из данных табл. 1, максимальный прирост биомаС1 сы дрожжей наблюдается при добавлении фермента в концентрации 0,1 мг/л.среДЫ. Пример 2. Фермент добавляют в питательную среду в количестве 0,1 мг/л среды (что соответствует активности 1500 единиц). Используют коммерческий кристаллический препарат, а также технический препарат фермента (сульфат-аммонийную .фрак-. цию). Далее процесс ведут аналогично примеру 1. Полученные данные приведены в табл. 2. Как видно из данных табл .2 в присут- : ствии фермента выход биомассы дрожжей увеличивается на 16,5-18% по сьфому весу, на 17,8-18,5% по абсолютно сухому весу. Ускорение потребления субстрата в опытном Варианте, по сравнению с контрольным (по остаточному РВ), свидетельствует об интенсификации процесса выращивания дрожжей под действием фермента (15-16,7%). Применение коммерческого препарата и технического препарата Дезоксирибонуклеазы дает сравнимые результаты. Это позволяет рекомендовать применение технического препарата, как более дешевого. П р м е р 3. В целях изучения влияния Дезоксирибонуклеазы на выход рожжей в условиях, максимально прибиженных к производственным, провоят непрерьшно.е культивирование дрожжей в присутствии технического препарата фермента в концентрации 0,1 мг/л среды. Процесс ведут аналогично примеру 1. Через 2 ч после засева переходят на отъемно-доливной способ культивирования при скорости протока среды 130-320 мл/ч, проводя отбор дрожжевой суспензии ежечасно. Время выращивания 70 ч.

В процессе непрерывного культивирования дезоксирибонуклеазу вносят вместе со свежей питательной средой из расчета 0,1 мг/л среды. Полученные данные представлены в табл. 3.

К - контрольный вариант - дрожжи культивировали без фермента.

0ц- опытньй вариант - дрожжи

культивировали в присутствии , фермента.

Содержание в полученных дрожжах общего белка 50-52%,истинного белка 44-4 Влияние концентраций фермента на выход

Концентрация

Сырой вес, г/л фермента, мг/л, среды

10

1,0

0,1

0,01

О

Как видно из табл. 3 в присутстви фермента выход биомассы дрожжей увеличивается на 41,4% по сырому весу, на 59,2% по абсолютно сухому весу. Разница в объемах среды, прошедшей через контрольный и опытный инокулятор за-70 ч культивирования при близких средних значениях остаточного РВ среды в контрольном и опытном варианте свидетельствует об интенсификации процесса выращивания дрожжей (на 20,5%).

Таким образом, предлагаемый способ выращивания кормовых дрожжей по сравнению с известным увеличивает выход биомассы на 4,4% при , использовании концентрации ферч мента в 10000 раз меньшей.

Абсолютно сухой вес, г/л

9,16 9,27 10,82 9,15 9,18 Таблица1 биомассы $1.084298 ,Влияние препарата дезоксирибонуклеазы на « Т а б л и ц а 2 выход биомассы

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ КОРМОВЫХ ДРОЖЖЕЙ, предусматривающий . выращивание их на питательной среде, содержащий гидролизат целлюлозосодержащего растительного сырья в качестве источника углерода, источники азота и фосфора: и стимулятор роста, в условиях аэрации среды, о т л ичающийся тем, что, с целью повьшения выхода биомассы, в качестве стимулятора роста используют дезоксирибонуклеазу в количестве 0,1 мг/л среды.

Коммерчес15%кий препа- 0,20 0,17 рат Технический препарат (сульфат- аммонийная фракция) 0,18 0,15 16,7% 32,70

К - контрольный вариант - дрожжи культивировали бнх фермента.

Ofj- опытный вариант - дрожжи культивировали в присутствии фермента.

Содержание в полученных дрожжах общего белка 50-52%, истинного

белка 44-46%.

Осуществление способа в условиях непрерывного культивирования

18,5%

Т а б л и ц а 3 36,36 43,10 16,6% 9,18 10,32 17, 38,63 18,1% 8,07 9,66