Штамм гриба @ @ 8256, используемый в качестве тест-культуры для определения микробиологической стойкости неметаллических материалов Советский патент 1984 года по МПК C12N15/00 C12Q1/18 C12R1/66 

;о

00 СГ) QD СО Изобретение относится к микроьиол гической промьпиленности и касается нового штамма гриба, предназначенного дпя определения микробиологическо стойкости неметаллических материалов таких как пластмасс, компаундов, резин, лакокрасочных покрытий, тканей и т.д. Известны штаммы мицелиальных грибон, например Torula convoluta, Cladospcrium gossipicola 1902, Cepha losporium acremonium - 2033, используемые для испытания и оценки различ ных органических материалов на микро биологическую стойкость lj - L3J . Недостатком этих грибов является то, что они растут при сравнительно низких температурах и не могут приме няться при испытании материалов, пре назначенных для эксплуатации в уелоВИЯХ теплого и влажного климата, например при режимах, установленных ГОСТ 9.048-75 и ГОСТ 9.049-75, Известны также активные разрушите ли материалов - штаммы грибов Asper gillus niger 2442 и A.terreus 1860, которые развиваются при повышенньк температурах и используются при стан дартных испытаниях на воздействие плесневых грибов L4j, . Однако эти виды являются менее эффек тивными при оценке микробиологической стойкости неметаллических материалов, Известно, что при оценке микробилогической стойкости технических изделий и используемых при их изготовлении неметаллических материалов, ис пользуют набор тест-культур по ГОСТ 9.048-75 5 . Недостатком известных штаммов является их избирательная активность по отношению к определенным группам материалов, например Aureobasidium pullulans развивается на лакокрасочных покрытиях, Aspergillus terreus-: на пластмассах, Frichoderma viride на целлюлозосодержащих материалах. Многие кислотоустойчивые материалы и покрытия являются стойкими к гри- бу Aspergillus niger, являющемуся активным биоразрушителем за счет интенсивного продуцирования органических кислот. Целью изобретения является получение штамма Aspergillus piniceus 8256 с более высокой биологической активностью и повышение достоверности испытаний неметаллических материалов на микробиологическую стойкость. Штамм Aspergillus piniceus 8236 вьщелен с образцов полисульфамидной термостойкости ленты, хранится в коллекции института микробиологии АН Армянской ССР и депонирован во ВНИИгенетика, регистрационный номер ВМПМ. Штамм имеет следующую характеристику. . Морфологические признаки. Конидиальные головки радиальные серовато-зеленых тонов, 40-90 мк в диаметре. Конидиеносцы образуются из погруженных гифмицелия, светлокоричневые с толстыми гладкими стенк-ами 150-200-5 мк. Конидиеносец заканчивается почти шаровидным вздутием 10-13 мк в диаметре, стеригмы двурядные. Стеригмы первого ряда 4-6 2-3, стеригмы второго ряда 5-2. Конидии шаровидные, слегка шероховатые в массе светло-зеленые 2,5 3 мк.. Культуральные признаки. На среде Чапека с сахарозой при 28+2°С колония пушистая достигает 5 см в диаметре за 7 дн. Вначале белая, затем желтовато-кремовая, центральная часть слегка приподнята. Обратная сторона и окружающий агар окрашены в ярко-желтый цвет. Эксудат, если присутствует, красноватого цвета. Запах слабый, плесненый. Конидиальные головки образуются в 4-е сутки, спороношение умеренное. С , возрастом образуются многочисленные Hiille-клетки. На картофельно-морковной среде при 28± колония пушистая, ровная, достигает 4 см в диаметре за 7 дн. Вначале слегка розоватая, затем серовато-кремового цвета. Растущий край белый. Запах слабый плесневый. Эксудат в мелких каплях светло-розового цвета. Спороношение умеренное, начинается на 4-е сутки, Hiille-клетки не обнаружены. Физиологические признаки. Оптимальная температура роста , рост приостанавливается ниже 10 и Bbmie . Из Сахаров хорошо усваивает сахарозу, глюкозу, фруктозу, ксилозу, мальтозу, хуже лактозу. Хорошо развивается на средах с целлюлозой, хуже на среде с крахмалом и белком. Устойчив к материалам, защи310щенным фунгицидами. На среде с сахар ми подщелачивают среду. Интенсивно развивается на пластмассах, компаундах, герметиках, резинах, лакокрасоч ных покрытиях, стекле, керамике, бумаге, тканях и пленках. Антагонистические свойства. Антибиологическая активность на средах с сахарами не обнаружена. Подавляет Aur.pullulans, Cladosporiura herbarum, Penicillium Heniculosum, Scopularibpsis brevicaulis за счет быстрого распространения по субстрату. Не подавляется другими видами. Развивается совместно с видами A.niger, A.ustus, А.terrens. Пример 1. (Использования штамма). Сравнивают активность двух наборов грибов: набор тест-культур по ГОСТ 9.048-75 с добавлением штамма Aspergillus puniceus 8256 и набор тест-культур по ГОСТ 9.048-75. Испытание проводят на 50 марках не-металлических материалов - пластмассах, компаундах, резинах, тканях, а такжелакокрасочных покрытиях при 28+2°С, относительной влажности 90% в течение 28 сут. Образцы всех марок материалов поделены на две партии. Каждая партия заражена одним из укаэанных наборов грибов. В каждой партии испытывают по 10 образцов каждой марки материалов, т.е. с каждым набором грибов испытано по 500 образцов всех марок материалов. Степень поражения материалов грибами (в баллах по ГОСТ 9.048-75) представлена в табл. 1 (+ - 8256 развивается на материалах, - - 8256 не развивает.ся на материалах 2-й партии). В табл. 2 представлены сравнитель ные обобщенные данные по интенсивнос ти поражения всех испытанных материа лов .каждой партии из. 500 образцов. Испытания показали, что в 1-й пар тии образцов, зараженных набором гри бов, содержащих штамм А.puniceus 8256 не вьщерживают испытания 53% всех испы танных образцов, а во 2-й партии - 4 Следовательно, увеличение отрицатель ных результатов при испытании материалов 1-й партии происходит за счет присутствия в наборе тест-культур гр бов по ГОСТ 9.048-75 штамма гриба А.puniceus 8256. Таким образом, применение штамма А.puniceus 8256 в качестве тесткультуры для определения микробиолоческой стойкости нeмeтaJmичecкиx териалов повьш1ает достоверность пытаний. Пример 2.С целью повышения стоверности испытаний на воздейсте плесневых грибов вьивляют наибое активные виды и штаммы грибов, еляемых с различных материалов, также установленные действующие андартами: ГОСТ 9.048-75,ГОСТ 9.048, ГОСТ 9.050-75. Исследовано 16 штаммов грибов, наилее часто развивающихся на неметалческих материалах. Исследуемые штам выделены в чистую культуру после бораторных и натурных испытаний анятся в музее лаборатории. Штаммы, одящие в набор тест-культур по СТ 9.048-75, получены из института кробиологии АН СССР. Из 16 штаммов грибов составляют тыре набора в различных сочетаниях: I набор. 1.Alternaria alternata 15 АЭ . 2.Aspergillus ustus 21 СЭ 3.Scopulariopsis buvicaulis 19 U3 4.Frichoderma viride 27 U3 5.Aspergillus niger 31 - СЭ 6.Aspergillus terreus 8254 7.Aspergillus puniceus 8256 8.Aspergillus Havus 10-T 9.Penicillium Heniculosum 61-ТЭ 10. P.chrysogenum 1-ОЭ n набор 1.Alternaria alternata 15 АЭ 2.Scopulariopsis buvicaulis 19-U3 3.Aspergillus niger 31-СЭ 4.A.ustus 21-СЭ 5.A.penicilloides 13-X 6.Cladosporium herbarum 11-Л 7.. Penicillium chrysogenum.2Z-JJ3 8. Frichoderma viride 27-U3 IIIнабор 1.Aspergillus terreus 8254 2.A.punictus 8256 3.A.havus 10-T 4.A.niger 31-C3 5.A.penicilloides 13-X 6.Fusarium moniliforme 34-ГЗ 7.Cladosporium herbarum 11-Л 8.Penicillium Heniculosum IVнабор тест-культур по ГОСТ 9.048. 1.Aspergillus niger 31-СЭ 2.A.terreus 8254 3.Aureobasidium pullulans 1116 4.Paecilomyces variotii 1749 5.Penicillium Heniculosum 61-ГЭ 6.P.ochro-chloron 1702 7.Scopulariopsis brevicaulis 19 8.Frichpderma viride 27-U3 . Испытания проводят по методике ГОСТ 9.048.75. Каждый набор грибов йспольэуют для заражения 50 марок материалов. В зависимости от того, в какое количество наборов грибов (из 4-х предлагаемых наборов) входи каждый вид гриба, и столько раз в ра личныхсоч«та«иях он высевался. Штамм A.puniceus 8256 использов в двух на€)ораэс, следовательно, в дву сочетаниях он был высеян 100 раз (на 50 марок материалов с одним набором и на эти же 50 марок с другим Количество исследуемых вариантов развития каждого исследуемого гриба в сочетании с другими видами грибов на 50 марках материалов указано в табл. 2f название которой в данном ответе получило уточнение. В Табл. перечислены 8 штаммов грибов из 16 исследуемых, наиболее часто развивающиеся на 50 марках ма териалов. Таким образом, предлагаемый штамм A.puniceus 8256 наиболее часто и интенсивно развивается на неметаллических материалах по сравнению с видами, установленными в ГОСТ 9.04875. Полученный штамм можно использовать при оценке микробиологической стойкости материалов, предназначенных для изготовления технических изделий, в т.ч. изделий злектронной техники, электротехники и других; Использование материалов, стойких к микробиологическим повреждениям, позволит повысить надежность изделий при их эксплуатации и хранении. Штамм обладает высокой физиологической активностью и может быть использован для деструкции отходов химической промышленности и неметаллических материалов кратковременно используемых в народном хозяйстве. Предлагаемый штамм не является патогенным и упрощает стандартный метод испытаний неметаллических материалов и изделий на микробиологическую стойкость, при замене малоактивных штаммов на штамм A.puniceus 8256. Т а б л и ц а 1

Штамм гриба Aspergillus puniceus 8256 (Центральный музей промышленных микроорганизмов Института ВНИИгенетика, коллекционный номер ЦИПМ F 215), используемый в качестве, тест-культуры для определения микробиологической стойкости неметаллических материалов. 5

К-2-43Т К 21-22 К 214-43Т ДИАФ ДСВ-2Р-2М

Поликарбонат

АГ-4В Аг-4

3 3 3 1 3

+ + «

2 3

f +

10936998

Продолжение табл. 1

УР-231 по стеклотесто лигу СТ

ХС-9105 по эмали ЭП-255

ЭП-790 по прессматериалу К81-39С

ЭП-96 по компаунду Ф-47

ЭП-9114 по металлокерамике ЖГР-1

АК-113 по латуни Л-63

Э-4100 по компаунду Ф-47

ИРП-1036 МРП-1207

109369910

j Продолжение табл. 1

3 1

3 1

n

Оценка дана для всех 10 образцов каждой марки материала.

Степень поражения образцов материалов по ГОСТ 9.048-75, бал

109369912

Продолжение табл. 1

I Таблица 2

Количество образцов, пораженных при испытании разнюш наборами грибов, %

A.niger 31-СЭ

P.Heniculosiim 61-ГЭ

Таблица 3

26

52