Штамм гриба РеNIсILLIUм снRYSоGеNUм Тном как тест-культура для оценки микробиологической стойкости смазочных материалов Советский патент 1989 года по МПК C12N1/14 C12Q1/18 C12N1/14 C12R1/82 

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой новый штамм гриба, который может быть использован в качестве тест-организма при проверке лабораторных методов испытаний на устойчивость масел и смазок к воздействию микроскопических грибов.

Целью изобретения является получение более активного штамма гриба - биодеструктора различных марок технических смазочных материалов, использование которого в качестве тест- культуры повысит достоверность оценки при определении грибоустойчивос- ти технических масел и смазок.

Штамм Penicillium chrysogenum Thorn ВКМ F 3067D (бК-14) выделен из масла МН-7,5У, которое находилось на хранении в течение полугода на складе нефтепродуктов в умеренно теплом климатическом районе. Штамм депонирован во Всесоюзной коллекции микроорганизмов ИБФМ АН СССР под номером BKMF-3067D и обладает следующими свойствами.

Культурапьно-морфологические

свойства.

3

На агаризованной среде Чапека через 7 дней роста при 25 С колонии гриба имеют диаметр 30 мм. Колонии бархатистые, интенсивного голубовато зеленого цвета с растущим белым краем шириной 1 мм. У некоторых колоний окраска в центре светло-бежевая. Окраска обратной стороны колоний от светло-желтой до желто-коричневой. Желтый пигмент диффундирует в агар. КЬлонии радиально-складчатые, в центральной части выпуклые, с многочисленными каплями желтого эксудата.

При рассматривании колоний на месте роста (х80) видны асимметричные кисточки с цепочками конидий, соединенных в довольно длинные колонки на каждой метуле.

Конидиеносцы отходят от субстратных гиф, длинные (120-350 мкм, диаметр 3-3,5 мкм), гладкие, несущие большей частью одну веточку (реже 2-3) 15-25 X 2-3 мкм. Метул в мутовке 2-5, размером большей частью 2-3-10 мкм. Фиалид на каждой метуле 3-5, размер их 8-10 х 2-2,5 мкм.

На среде сусло- агар через 7 дней роста при 25°С колонии гриба имеют диаметр 35-40 мм. Колонии гладкие, бархатистые, в центре приподнятые, шерстистые голубовато-зеленого цвета с растущим белым краем шириной 1 мм. Окраска обратной стороны колоний желтая с оранжевым оттенком. Эксудата и складчатости нет. Цепочки конидий расходящиеся. Конидии шаровидные и широко-эллипсоидальные,гладкие, диаметром 3,5-4 мкм. Конидиеносцы гладкие, гранулированные, отходят от субстратного мицелия, длинные (500 мкм), шириной до 10 мкм, кисточки асимметричные. Веточки длиной 30 мкм, шириной 5-7 мкм. Метулы разные, их размер 15-20 х 4 мкм. 5 фиа- лид на каждой метуле, размер фиалид 8-10 X 2-2,5 мкм.

На масляно-минеральной среде в соотношении маслогсреда 1:3 и инкубировании в пробирках в термостате при 25-28°С на 5-8-е сутки появляется видимый рост на границе раздела водно-масляного слоя, который со временем становится более обиль - ным. Состав минеральной среды, %: NaNO,-0,2-0,35; ,35-0,6; ,07-0,15; KCl 0,15-0,25; вода водопроводная - остальное.

10

252074

Температурный минимум роста составляет 5°С, оптимум 25-30 С, максимум - 45°С. В оптимальных условиях растет намного быстрее, чем штамм 5 Р. chrysogenum BKMF-245.

Физиолого-биохимические свойства.

Штамм способен активно расти на авиационных, судовых, автотракторных смазочных материалах.

Отношение к источникам углерода: хорошо усваивает глюкозу, сахарозу, маннит, сорбит, крахмал, глицерин; глюкозу усваивает лучше, чем сахарозу, маннит лучше, чем сорбит. На целлюлозе не растет.

Отношение к источникам азота: хорошо растет на о -глутаминовой кислоте, L-глутамине, об-аспарагине, - DL-аспарагиновой кислоте, азотнокислом аммонии, хуже усваивает аланин, DL-oi-лейцин, мочевину и азотнокислый натрий. Органический азот усваивает лучше, чем неорганичес15

кий.

Штамм хорошо растет на сусло-агаре, масляно-минеральной среде с рН среды 6,8-7,2 при 25-30°С.

Антибиотическая активность на среде Чапека у Р.chrysogenum Thorn F-3067D выражена слабее, чем у Р.chrysogenum Thorn BKMF-245, который используется в составе тест-организмов при оценке грибостойкости масел и смазок. При испытании методом перпендикулярных штрихов подавляет рост Chaetomium globosum Kunze, Tricho- derma viride Pers. ex Fr., S.F.Gray.

Его развитие не подавляется другими видами грибов.

На образцах различных марок смазочных материалов Р.chrysogenum Thom BKMF-3067D чаще всего развивается совместно с Aspergillus niger van Tiegh, Phialophora fastigiata (La- gerb. et Mel in) Conant, Scopula- riop.sis brevicaulis (Sacc.) Bain и бактериями рода Bacillus.

При лабораторных испытаниях гри - бостойкости различных технических смазочных материлов проведены сравнения штамма Р.chrysogenum Thom BKMF-245 со штаммом Р.chrysogenum Thom BKMF-3067D. Из 100 исследуемых смазочных материалов рост штамма Р.chrysogenum Thom BKMF-3067D от 1 до 3 баллов отмечен на 90 из них. На 70 смазочных материалах этот

штамм развивается более активно, чем на 20 остальных.

Данные о более высокой агрессивности штамма Р. chrysogenum Thorn BKMF-3067D по сравнению со штаммом Р. chrysogenum Thorn BKMF-245 приве- дены в табл. 1 и 2.

Из табл. 1 следует, что штамм Р. chrysogenum Thom BKMF-3067D активнее штамма Р. chrysogenum Thom BK IF-245.

Результаты, приведенные в табл.2 показывают, что развитие штамма гриба Р.chrysogenum Thom BKMF-3067D, выделенного из масла МН-7,5У, приводит к значительному изменению физико-химических показателей масел (к изменению вязкости и кислотного числа) по сравнению со штаммом Р. chrysogenum Thom BKMF-245. Это свидетельствует о том, что штамм BKMF-3067D.более активно использует (повреждает) масла, чем штамм BKMF-245.

Таким образом, штамм гриба наиболее часто и интенсивно развивается на испытанных смазочных материалах и значительнее изменяет физико-химические показатели масел.

Формула изобретени

Штамм гриба Penicillium chrysogenum Thom BKMF-3067D как тест-культура для. оценки микробиологической стойкости смазочных материалов.

Таблица

10

20

25

30

35

Примечание. Испытания проводят по ГОСТ 9.052-75 на минеральном агаре в чашках Петри в течение 28 сут. Балл - среднее значение из 5 повторностей.

Таблица 2

Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой новый штамм гриба, который может быть использован в качестве тест-культуры при проверке на грибостойкость масел и смазок. Цель изобретения - получение более активного штамма грибабиодеструктора для определения грибостойкости различных марок масел и смазок, используемых в конструкционных изделиях техники. Штамм микроскопического гриба PENICILLIUM CHRYSOGENUM FHOM ВМК F-3067D(6К-14) выделен из авиационного масла МН-7,5У, находящегося на хранении в умеренно теплом климатическом районе в течение полугода. Новый штамм отличается более высокой агрессивностью по отношению к горючесмазочным материалам различной номенклатуры, используется в качестве микроорганизма биодеструктора, повреждающего широкий спектр углеводородного состава смазочных материалов. Изобретение позволяет повысить достоверность оценки устойчивости смазочных материалов к воздействию микроскопических грибов. 2 табл.