Штамм микромицета ASpeRGILLUS RUвеR KoNIG, SрIескеRм, aND ВRемеR Тном aND СнURсн, используемый для оценки микробиологической стойкости полимерных материалов и покрытий Советский патент 1990 года по МПК C12N1/14 C12Q1/18 C12N1/14 C12R1/66 

Изобретение относится к биотехнологии и касается нового штамма гриРа, который может быть использован в качестве тест - организма для оценки грибостойкости полимерных материалов и покрытий.

Цель изобретения - получение нового штамма гриба, обладающего высокой деструктивной активностью и пигментацией, для повышения достоверности испытаний полимерных материалов и покрытий на грибостойкость.

Штамм гриба Aspergillus ruber (Konig, Ryieckprm , and Premer) Thorn and Church BKM F-2906D выделен ме-

тодом прямого отсева с пленки клееной многослойной марки ЗЛАРЛ, экспонированной на открытой климатомика- логической площадке.

Штамм хранится во Всесоюзной коллекции культур микроорганизмов при институте биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, коллекционный номер BKM F-2906D и имеет сле-- дутощую характеристику.

Морфологические признаки.

Конидиальные головки радиальные эеленовато-серых тонов, 150-250 мкм в диаметре. Конидиеносцы образуются из воздушного мицелия, светлые кори«СП

СО

4ь О СП

нево-оранжевые, с гладкими стенками 500-700 14-15 мкм. Конидиеносец заканчивается почти таровидным вздутием диаметром 25-30 мкм, стеригмы однорядные мкм. Конидии эллиптические или почти шаровидные диаметром 5-7,5 мкм. Клейстокарпии желтые, затем ржаво-коричневые диаметром 80-120 мкм. Аскоспоры чечевице образные, гладкие.

Культуральные признаки. На среде Чапека с сахарозой при 26±2°С диаметр колонии пушистой достигает 6-7 см за 14 дн. Вначале бе- лая, затем желтовато-оранжевая, центральная часть слегка приподнята. Обратная сторона и агар окрашены в красный цвет. Запах слабый, плесневый. Конидиальные головки образуются на 4-е сут., спороношение умеренное или обильное.

На среде Чапека без сахарозы при 260+2°диаметр колонии компактной с кольцом чистого белого мицелия во- круг достигает 1-2 см за 14 дн. Колония желтого цвета. Обратная сторона и агар окрашены в ярко-красный цвет. Запах слабый, плесневый. Конидиальные головки образуются на 3-й сут. Спороношение слабое до умеренного.

На сусло-агаре колония растет очень быстро и при 26±2°С диаметр ее достигает 7-8 см за 7 дн. Колония вначале желтая, затем зеленовато-

желтая с переходом в зеленый цвет в центре колонии. Обратная сторона и агар окрашены в яркий оранжево-красный цвет. Запах плесневый. Кбнидиапь- ные головки образуются уже на 1-е сут

Рост колонии на картофельно-са- харной среде совпадает с ростом ее на сусло-агаре.

На мясо-пептонном агаре колония умеренно пушистая, ее диаметр дости- гает 4-5 см за 14 дн. Колония вначале белая, затем голубовато-зеленая, потом желто-зеленая. Обратная сторона окрашена в темно-оранжевый цвет. Конидиальные головки образуются на 4-е сут.

На агаризованном кукурузном экстракте колония быстро растет, диаметр ее достигает 5-6 см через 7 дн. Колр ния пушистая, буровато-желтого цвета. Обратная сторона и агар окрашены в интенсивный желтый цвет.

Физиолого-биохимические свойства.

Оптимальная температура развития 26t2°C. Слабое развитие наблюдается при +7 и .

Отношение к углеводам: хорошо усваивает сахарозу, глюкозу, фруктозу. Устойчив к материалам, защищенным фунгицидами. Интенсивно развивается на пластмассах, на поливинилхлориде, искусственной коже, капроне, фольги- рованном стеклотекстолите, компаунде. Антагонистические свойства. Антибиологическая активность на средах ссахлрами не обнаружена. Штамм проявляет высокую антибиотическую активность к Trichoderraa barzianuro,подавляет Beltrania sp., Penicillium, Aspergillus fumigatus, F. verzicolor, cladosporium herbarum. Нейтральные взаимоотношения с видами Aspergillus niger, Penicillium decurobens, P.paxi- lli, P. terlikowskii. Культура гриба хранится в пробирках со скошенной поверхностью минеральной среды, в которую равномерно распределяют порошок различных пластиков или измельченного материала в зависимости от дальнейшего назначения штамма. Пробирки с чистыми культурами гриба хранят в холодильнике при температуре . В состав минеральной среды входят следущие реактивы, г:

Калий фосфорнокислый однозамещенный0,7

Калий фосфорнокислый двухзамещенный0,7

Магний сернокислый0,7

NH4N031,0

Натрий хлористый0,005

Железо сернокислое эакисное0,002

ZnS04 7H200,002

MnS04.7H,00,001

Агар15

Вода дистиллированнаяДо

1000,0 м

Чистую культуру гриба для проведения испытаний выращивают в пробирках со скошенной поверхностью питательной среды Чапека-Докса, в состав которой входят следующие ингредиенты, г: Калий фосфорнокислый однозамещенный0,7

Калий фосфорнокислый двухз амещенный0,3

Магний сернокислый 0,5 Натрий азотнокислый 2,0 Калий хлористый0,5

Железо сернокислое

До 1000,0 мл

закисное0,01

Сахароза30,0

Агар 20,0

Вода дистиллированная

Культуру гриба выращивают 2 недели при 29±1°С.

Суспензию спор с концентрацией 1-2 млн/мл готовят в дистиллированной воде.

Пример. Сравнивают активность предлагаемого штамма и двух наборов грибов: набор тест-культур по ГОСТ 9.048-81 и набор тест-культур по ГОСТ 9.049-81 с добавлением штамма Aspergillus ruber (Konig, Spieckerm, and Bremer) Thorn and Church BKM F-2906D. Испытания проведены на 12 неметаллических материалах в течение 56 сут при 26+. t2°C, относительной влажности 90%, Образцы всех материалов поделены на две партии. Каждая партия заражена одним из указанных наборов грибов. В каждой партии испытывают по 5 образцов каждой марки материалов, т.е. с каждым набором грибов испытано по 60 образцов всех марок материалов. Кусочки материалов стерилизую1 -в термостате при 60-80°С в течение 4 ч, затем протирают их марлевым тампоном, смоченным этиловым спиртом. Для этой цели применяют также облучение ультрафиолетом в течение 1 ч и более. Образцы материалов ( см) устанавливают на не- ктором расстоянии друг от друга (3- 5 см) и опыляют суспензией спор грибов из пульверизатора с диаметром выходного отверстия 1 мм. Суспензию распределяют равномерно по всему эксикатору из расчета 50 см на 1 м в независимости от количества

испытуемых образцов. Суспензия спор с концентрацией 1-2 млн/мл готовится как в монокультуре, так и в ассоциации грибов.

Степень поражения материалов грибами (в баллах по ГОСТ 9.048-81) представлена в табл.I.

Испытания показали, что представQ ленный штамм поражал на 1-2 балла сильнее некоторые материалы (поли- винилхлоридной, кремнеземной основы) по сравнению с пораженным набором грибов по ГОСТ 9.048-81.

5 Пример 2. Сравнивают активность нового штамма с набором грибов по ГОСТ 9.049-81. Условия1 испытания такие же, как в примере 3. Результаты представлены в табл.2. По0 лучеиные данные показывают, что штамм Aspergillus ruber BKM F-2906I обладает высокой деструктивной активностью .

В процессе эксперимента на актив5 ность штамма регистрировали время окрашивания субстратов пигментом после 7, 14, 28 и 56 сут (табл.3 и 4). Полученные результаты показывают, что штамм Aspergillus ruber BKM F-2906D

0 один и в наборах с грибами стандартов ГОСТ 9.048-81 и ГОСТ 9.049-81 обладает интенсивной пигментацией. Это позволяет сократить время оценки грибостойкости полимерных материалов

, и покрытий.

Формула изобретения

Штамм микромицета Aspergillus ru- 0 Ъег (Konig, Spieckerm, and Bremer) Thorn and Church BKM F- 2906D, используемый для оценки микробиологической стойкости полимерных материалов и покрытий.

Изобретение относится к биотехнологии и касается нового штамма гриба, который может быть использован в качестве тест-организма для оценки грибостойкости полимерных материалов и покрытий. Целью изобретения является получение нового штамма гриба, обладающего более высокой деструктивной активностью и пигментацией для повышения достоверности испытаний полимерных материалов и покрытий на грибостойкость. Штамм выделен методом прямого отсева с пленки клееной многослойной марки ЗЛАРК. Штамм обладает способностью расти при широком интервале температур (+7-+40°С), отличается высокой деструктивной активностью и пигментацией. Хранится во Всесоюзной коллекции культур микроорганизмов при Институте биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, коллекционный номер BKMF - 2906D. 4 табл.

Таблица

Aspergillus ruber BKM F - 2906 D Aspergillus ruber BKM F - 2906 D и тест-культуры

по ГОСТ 9.048-81. Тест-культуры по ГОСТ 9.048-81.

Продолжение табл.1

Таблица2

Asp erg illu s гиЪег ВКМ F - 2906 D Aspergillus ruber BKM F - 2906 D и набор тест- культур по ГОСТ 9.049т81

Тест-культуры по ГОСТ 9.049-81.

фторопласта-

фтороплас

фтороплас-

Продолжение табл.2

40

ТаблицаЗ

+

11

1534051

Кожа искусственная декоративная отделочная Старт Пленка Ф-26 марки А Трубки из поЛивинилхлоридного пластиката

неокрашенные

черные

Пленка ПЭТФ электроизоляционнаяПленка поливинилхло- ридная пластифицированная марки В Пленка из фтороплас- татАК конденсаторная Пенополивинилфор- маль марки ТПВФ-1 Пленка клеевая многослойная марки ЗЛАРЛ

Ткань прорезиненная 918-9

Пленка Ф-26 марки А Ткань СТБО-98 Ткань полифеновая отделочная Ткань петельная П-56-П

Ткань ВЫСОКА объемная с антистатической пропиткой .

12Продолжение табл.3

-j 4

4 + ч- + +

Таблица

+ + +

4 + 413

Материал АЗТ-С Искусственная кожа ТР Тапка-1 Пленка из фторо- пласта-4,МБ марки А Лента техническая иэ нитей Аримид-Т Ткань стеклянная оптического значения

Шнур технический полифеновый Резина ИРМ-2073 Материал облицовочная ткань с антистатическойпропиткой Ткань капроновая петельная М-56-П Полимерно-тканевый материал Лента эластичная термостатная СТЭЛА 20-200

Лента СТЛФ-20 Триацетат с антимиробной обработкой

1534051

J4 Продолжение табл.4

- +

+

+

+ +

+ + +

+

+ +

4- +

+ +

4- +

+ -f Ч