Способ дифференциальной диагностики тиреотоксикоза Советский патент 1984 года по МПК A61B10/00 

О

vl

N9

С N9 Изобретение относится к медицине, преимущественно для совершенствования метода диагностики нарушений функции щитовидной железы. Известен способ диагностики тирео токсикоза путем биохимического иссле дования крови, в частности изучения гликопротеидного обмена С О. Известен также способ диагностики нарушений функции щитовидной железы на основе определения активности сывороточных глютамикоаланиновоя и глютамикоаспарагиновой трансаминаз Г21 Недостатком известных способов является отсутствие специфичности и невозможность выявления начальных стадий тиреотоксикоза. Цель изобретения - повышение чувствительности и ускорение способа диагностики тиреотоксикоза. Указанная цель достигается тем, что согласно способу дифференциально диагностики тиреотоксикоза путем биохимического исследования в крови ферментов в лейкоцитах и эритроцитах .определяют активность пируватдегидро геназы (ПДГ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и при снижении активности ПДГ .в лейкоцитах на 35-37% и в эритроцитах на 13-14%, ЛДГ в лейкоцитах на 26-30% и повышении активности ЛДГ в эритроцитах на 36-92% по сравнению с нормой диагностируют тиреотоксикоз 1 степени, а при снижении в лейкоцитах активности ПДГ на 56-58%, ЛДГ на 57-60%, в эритроцитах ПДГ на 33-35%, ЛДГ на 40-46% - тиреотоксикоз II-II1 степени. Способ осуществляется следующим образом. У больного забирают из вены 5 мл крови в пробирку, содержащую 0,04 мл гепарина и 1,5 мл физиологического раствора. Путем центрифугирования ил отстаивания при комнатной температуре в течение 10-20 мин отделяют плаз му, из которой центрифугированием при 1000 об/мкн в течение 10-12 мин выделяют фракцию лейкоцитов. Лейкоциты освобождают от примеси эритроцитов с добавлением хлористого аммония и последующим центрифугированием Лейкоциты промывают физиологическим раствором и осаждают центрифугированием при указанных выше параметрах. Эритроциты очищают от примеси дру гих форменных элементов путем 2-3кратного отмывания физиологическим раствором с последующим центрифугированием. После последнего центрифугирования приготавливают лизат лейкоцитов в 1,5 мл дистиллированной воды и гемолизат эритроцитов в разведении 1:20. Активность ПДГ и ЛДГ определяют с помощью тетразолиевого метода. Для этого 0,4 мл лизата или гемолизата инкубируют в.среде, содержащей пируват (для определения ПДГ) или лактат (для ЛДГ) и активаторы: магний, АТФ, фосфатный буфер с рН 7,4 и 1 мл 0,1%-ного тетразолиевого синего, Спектрофотометрически при длине волны 570 нм смотрят изменение плотности против воды. Результаты выражают в ед./мл. Для определения ЛДГ в инкубационную среду помимо активаторов добавляют 0,02М НАД. Установлено, что у больных с первой степенью тяжести тиреотоксикоза активность ЛДГ в лейкоцитах выявляется в пределах 108-116 ед/мл, а в эритроцитах 566-630 ед./мл, в то время как у практически здоровых людей эти предельные границы ,активности фермента в лейкоцитах и эритроцитах 155-158 и 416-482 ед./мл соответственно. Активность ПДГ в лейкоцитах у больных с первой степенью тиреотоксикоза выявляется в пределах 2733 ед. /мл и в эритроцитах 232-245 ед./мл, в то время как для практически здоро.вых людей эти предельные границы актив нести фермента в лейкоцитах и эритроцитах 43-51 и 269-285 ед./мл. соответственно. Таким образом, при снижении активности ПДГ в лейкоцитах на 35-37% и в эритроцитах на 13-14%0 ЛДГ в лейкоцитах на 26-30% и повьш1ение ЛДГ в эритроцитах на 36-92% по сравнению с нормой ставят диагноз: тиреотоксикоз I степени, а при снижении в лейкоцитах активности ПДГ на 56-58%, ЛДГ - на 57-60%, в эритроцитах ПДГ на 33-3-5%, ЛДГ на 40-46% ставят диагноз: тиреотоксикоз II-III степени. Пример 1. Больная Г. 36 лет, поступила в эндокринологическое отделение с жалобами на общую слабость, сердцебиение, раздражительность, потливость, бессоницу. Боли ноющего характера в области сердца. В течение последнего года стали появляться несколько раз в неделю приступы учащенного сердцебиения.

Объективно: кожа влажная, щитовидная железа внешне не изменена, незначительный блеск глаз, пульс 96 уд./мин АД 110/60 мм рт. ст. В связи с подозрением на тиреотоксикоз из локтевой вены взято 5 мл крови для определения в лейкоцитах и эритроцитах активности ПДГ и ЛДГ. Результаты исследований: активность ПДГ в лейкоцитах 28,2 ед./мл, т.е. на 35% ниже, чем у здоровых людей, в эритроцитах 232,4 ед./мл, что на 13% ниже; активность ДЦГ в лейкоцитах 110,3 ед./мл, что на 26% ниже, чем у здоровых людей тогда как в эритроцитах активйость ЛДГ повьпиена до 566,2 ед,/мл, что на. 36% превышает данные, характерные для группы здоровых людей. Выявленный характер изменения активности ферментов в клетках крови в сочетании с данными клинического обследования позволил поставить диагноз нарушения функции щитовидной железы с тиреотоксикозом I степени.

Пример 2. Больная И. 36 лет. Поступила в эндокринологическое отделение с жалобами на раздражительность, потливость, утомляемость, головные боли, сердцебиение. Похудела за последний год на 10 кг. Считает себя больной 3 года.

Данные обследования: на ЭКГ диффузные изменения в миокарде, пульс 100 уд./мин. ДД 140/80 мм рт. ст. Лабораторное обследование: активность 1ЩГ и ДЦГ в лейкоцитах соответственно 19 и 65 ед./мл, что на 59,6% и 58,4% ниже,.чем у здоровых людей, в эритроцитах эти величины соответствуют 187 ед./мл и 250 ед./мл, что ниже на 33 и 40%, чем у здоровых людей. На основании лабораторных данных поставлен диагноз: тиреотоксикоз II-1II степени.

Предлагаемый способ диагностики тиреотоксикоза в 7 раз более чувствителен, чем известный, и позволяет выявлять нарушения функции щитовидной железы на несколько месяцев ранее в зависимости от индивидуального течения и тяжести развития заболевания у каждого больного (в среднем от 5 до 12 мес). Это дает возможность своевременного начала правильного лечения и предупреждения перехода заболевания во II и III стадии.

СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТИРЕОТОКСИКОЗА путем биохимического исследования в крови ферментов, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и ускорения способа, в лейкоцитах и эритроцитах определяют активность пируватдегидрогеназы (ПДГ) и лактатдегидрогеназы (ДЦГ) и при снижении активности ПДГ в лейкоцитах на 35-37% и в эритроцитах на 13-14%, ЛДГ в лейкоцитах на 2630% и повьшении активности ЛДГ в эритроцитах на 36-92% по сравнению с нормой диагностируют тиреотоксикоз 1 степени, а при снижении в лейкоцитах активности ПДГ «а 56-58%, ЛДГ на 57-60%, в эритроцитах ПДГ на 33-35%, ЛДГ на 40-46% - тиреотоксикоз II-III степени.