Способ получения белкового гидролизата Советский патент 1984 года по МПК A23J3/00 

а

4

О)

:о Изобретение относится к медицине в частности к способу получения бел кового гидролизата для парентерального азотистого питания организма. Известен способ гидролиза соединений типа эфиров с помощью протео литического комплекса - трихолизина вьщеленного из гриба Trichouhecium roseum, при рН 8 . Данньй способ не пригоден для получения белкового гидролизата из эритроцитарной массы. Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому эффекту является способ получения белкового гидролизата, предусматривающий ферментативный гидролиз эритроцитарного белка ферментом, выделенным из биомассы грибов, который заключается в получении белкового гидролизата, где в качестве бел кового, сырья используют эритроцитарнуто массу и гидролизуют ее грибковьм ферментом Actinomyces Fradie 110 при и рН 8,0 до свободных аминокислот 2. Однако в гидролизате остается еще значительное количество пептидов, т.е. происходит неполный гидролиз белка, в результате чего количество свободных аминокислот сравнительно .низкое (79,18 г/л). Цель изобретения - улучшение качества гидролизата путем повышения в нем содержания аминокислот. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения белкового гидролизата, предусматривающему ферментативный гидролиз эритроцитарного белка ферментом, выделенным из биомассы грибов, осуществляют гидролиз ферментативным Комплексом, выделенным из гриба Trtchothecium roseum, при 40-60 0 и рН 10,0. Сутцность способа заключается в следующем. Ферментативный .комплекс - трихолизин обладает протеолитическими свойствами..Выбор значений рН и температуры гидролиза обусловлен тем, что рН оптимумы у одного и того же фермента, определенные в присутст вии различных субстратов, неодинаков что объясняется тем, что для возникновения связи знзим-субстрат, не только энзим, но и субстрат должны быть в диссоцированном виде. Так при рН 6-9 глубина гидролиза достигает 30-70%, при рН 10 90% и при рН 11-14 15-70%. При температуре ниже 40-с общий выход аминокислот составляет 72,3%, при температуре выше 68,6%. При интервале температур ДО-бО С глубина гидролиза достигает 90%. Содержание незаменимых и заменимьтх аминокислот в белковом гидролизате представлено в таблице. Незаменимые Изолейцин Лейцин Фенилаланин Метиойин Треонин Триптофан Заменимые Алании Аргинин АспарагикислотаГлютаминовая кисотаГлицин ГистидиН ролин ерин истин ирозин Пример 1. йерут 1 л эритроцитарной массы,.гемолйзируют 1 л воды, заливают в стеклянный резерву с автоматической мешалкой 8 л ацето на и 80 мл концентрированно соляно кислоты, маленькими порциями добавляют в ацетон эритроцитарную массу и вкУпочают мешалку на 2 мин. Вьщелившийся при этом белыми хлопьями белок вместе с окрашенным ацетоном сливают в приемник, который оснащен фильтром, промывают массу чистым ацетоном до полного обесцвечивания, а затем сушат в термостате и просеи ют через металлические сита. Из полученного белка готовят 2%-ный раствор и проводят ферментный гидролиз с помощью микробного фермента TrichothecLum roseum следующим образом: белок заливают дистиллированной водой и кипятят до полного растворения (15 мин), охлаждают, доводят рН до 10,0, а затем перелив ют в специальный реактор. Добавляю фермент по весу в соотношении 1:20 Ф:С. Гидролиз проводят при и рН 10,2 в течение 72 ч. К реактору присоединена система фильтров, которая обеспечивает удаление всех нежелательных примесей из гидролизата. .Автоматическое регу лирование рН, температуры, а также Герметическая фильтровальная систем позволяют проводить гидролиз в степильных условиях. Глубину гидролиза определяют соот ношением аминного азота к общему, а на аминоанализаторе Jeol I LC-6AH определяют качественное и количественное содержание свободных аминокислот. В примере 1 глубина гидролиза доходит до 90% с сохранением всех незаменимых аминокислот, всего 97,44 г/л аминокислот. Пример 2. Способ осуществляют аналогично примеру 1, но при рН 9,0 и 40°С. Общий выход аминокислот составляет 80 г/л. П р и м е р 3. Способ осзтцествляют аналогично примеру 1, но при рН 11,0 и 60°С. Общий выход свободных аминокислот составляет 79,64 г/л, что не превышает показателя известного способа. Таким образом, предлагаемый способ, позволяет вести гидролиз белка до 90%, в то время как в известном способе глубина гидролиза доходит до 80%. Достигнутая глубина гидролиза белка дает основание предполагать повышение лечебной эффективности при использовании белкового гидролизата при некоторых патологических состояниях (белковое голодание организма, гипопротеинемия различного происхождения, ожоговая болезнь, гнойно-хирургические заболевания и др.).

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БЕЛКОВОГО ГИДРОЛИЗАТА, предусматривающий ферментативный гидролиз эритроцитарного белка ферментом, выделенным из биомассы грибов, отличающи и с я тем, что, с целью улучшения качества гидроЛизата путем повы«шения в нем содержания аминокислот, гидролиз осуществляют ферментативным комплексом, вьщеггенным из гриба Trichothecium roseum, при 40-60 С и рН 10,0.