Способ определения внутренней вязкости эритроцитов Советский патент 1984 года по МПК G01N33/48 G01N29/00 

00 00

сл

со Изобретение относится к медицине в частности к изучению состояния эритроцитов при ишемической болезни сердца, атеросклерозе, гипертонической болезни, острых патологи ческих состояниях и т.д., при которых имеется повьшение внутренней вязкости эритроцитов. Известен способ определения внутренней вязкости эритроцитов, основанный на измерении величины вязкости крови при различных скоростях сдвига 1 . Недостатком известного способа является неточное исследование собственно внутренней вязкости эрит роцитов за счет наличия у ник клеточных оболочек, которые в основном определяют деформируемость эритроцитов на различных скоростях сдвига. Цель изобретения - повьшение точ ности способа. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения внутренней вязкости эритроцитов через эритроцитарную массу пропус-. кают ультразвук с частотой 5-10 МГц мощностью 40-60 Вт с последующим измерением интенсивности ультразвука на двух глубинах, и внутреннюю вязкость эритроцитов |vtl -определяют по формуле Ч 34,57( ehA2), где А и А - интенсивность ультразвука на двух глубинах от источника. Данный способ осуществляют следующим образом. Внутреннюю вязкость эритроцитов изучают при помощи ультразвукового эхоофтальмографа. В качестве источн ка ультразвуковых колебаний используют датчики с частотами от 3-5 до 5-10 МГц. Датчики работают в импуль ном режиме и воспринимают амплитуду отраженной волны. Величина амплитуд отраженного сигнала и расположение датчика относительно дна камеры регистрируется на экране осциллографа Внутреннюю вязкость эритроцитов измеряют относительно дистиллированно воды. Для этого измерительную камер с дистиллированной водой, представляющую собой цилиндр с прозрачными стенками и полированным днсж из пле сигласа, помещают на площадку столи 92 . ка, укрепленного на штативе микроскопа . При помощи винтов площадка может перемещаться в трех плоскостях относительно столика..Ультразвуковой датчик, укрепленный в тубусе микроскопа при помощи микровинта, строго вертикально опускают в стоящую на столике камеру. Параллельность излучающей поверхности датчика и отражающего дна камеры достигается регулировкой площадки при помощи винтов. Контроль параллельности производят по наибольшей амплитуде отраженного сигнала в дистиллированной воде. При отсутствии параллельности происходит рассеивание ультразвуковых колебаний и значительное падение амплитуды отраженного сигнала. Дальнейшее исследование производят в той же камере, не меняя положения площадки. Неизменного положения датчика в момент исследования достигают установкой его в подвижном -тубусе микроскопа. Горизонтальное положение дна камеры, параллельность его излучающей поверхности датчика обеспечивает ПОСТОЯНСТВО- отраженного сигнала при горизонтальном перемещении камеры с опущенным в нее датчиком. Указанный метод дает возможность сравнивать внутреннюю вязкость эритроцитов с дистиллированной водой и друг с другом. Ультразвуковое поглощение измеряют на глубинах от 0,6 до 4,0 см, положение датчика относительно дна камеры определяют по миллиметровой шкале экрана осциллографа. Величина поглощения определяется по амплитуде отраженного сигнала, регистрируемого на экране осциллографа , и измеряется при помощи миллиметровой сетки, нанесенной на его экран. Для исследования эритроцитов пробу крови помещают в камеру из плексигласа, в которой предварительно исследовалась дистиллированная вода. Камеру вставляют в гнездо угловой ультрацентрифуги, где кровь центрифугируется со скоростью от 6 до 8 тыс.об. в минуту, время центрифугирования- от 5 до 30 мин 100%-ный гематокрит получают во всех случаях центоиАугирования со ско- . ростью вращения ротора 8 тыс.об. в минуту и времени центрифугирования 15 мин.При этом гемолиза эритроцитов не наступает.Слой плазмы над отделенными при центрифугировании эритроцитами удаляют. Гематокрит центрифугата до и после исследования остается постоянным. Используемая камера 11озволяет исследовать кровь не переливая из пробирки для центри фугирования в измерительную камеру, что сохраняет 100%-ный гематокрит ис следуемых эритроцитов и предупрежда ет излишнюю травматизацию клеток. После центрифугирования камеру помещают на площадку столика. При помощи микрометрического винта ультразвуковой датчик опускают в камеру. Ультразвуковое поглощение иссле дуется на разных глубинах. Измеряют величину интенсивности ультразвука на 1 и 2 глубинах. По формуле Х 34,57() определяют внутреннюю вязкость эрит роцитов. Пример. Предложенным методо исследованы, эритроциты Л. 40 лет. При осмотре жалоб не предьявляет, состояние удовлетворительное, в лег ких дыхание везикулярное, хрипов не границы сердца в пределах нормы, тоны сердца ясные, ритм правильный 594 чес 72 в 1 мин. Живот мягкий, при пальпации безболезненный. Диагноз: здорова. Кровь взята утром натощак, помещена в камеру и подвергнута центрифугированию в угловой ультрацентрифуге со скоростью 8 тыс.об. в минуту в течение 15 мин. Удален слой плазмы. Определен 100%-ный гематокрит центрифугата. Камера установлена на площадке столика, зонд опущен в эритроцитарную массу на глубину 0,6 и 1,0 см от дна камеры. Зафиксированы амплитуды отраженных сигналов на указанных глубинах, равные 37 и 28 мм соответственно, при-расчете по формуле1 34,57(епД|-еп А) внутренняя вязкость эритроцитов Л. оказалась равной 19,44 П, что имеет место у здоровых лиц. Таким образом, предложенный способ позволяет точно определить собственно внутреннюю вязкость эритроцитов, из-за своей простоты и доступности он может применяться в любой лаборатории, дает возможность полнее изучить патогенез атеросклероза и ишемической болезни сердца.

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВНУТРЕННЕЙ ВЯЗКОСТИ ЭРИТР01МТОВ, о тличающийся тем, что, с целью повьппения точности способа, через эритроцитарную массу пропускают ультразвук с частотой 510 МГц, мощностью 40/60 Вт с последующим измерением интенсивности ультразвука на двух глубинах, и внутреннюю вязкость эритроцитов I г I определяют по формуле Ч 34,57( ), где А и А2 интенсипность ультI развука на двух глу(Л бинах от его источника .