Способ определения потенциальной продуктивности сортов озимой пшеницы Советский патент 1984 года по МПК A01H1/04 A01G7/00 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к селекции озимой пшеницы. Известен способ оценки высоко- и низкопродуктивных генотипов растений, включающий использование биохимических показателей tOСпособ включает определение активности рибулезодифосфаткарбоксилазы - ключевого фермента, осуществляющего фотосинтетическую фиксацию и восстановление COj, при этом высокопродуктивные генотипы озимой пшеницы отличаются от низкопродуктивных более высокой активностью данного фермента. Однако способ не нашел широкого применения ввиду сложности и незначительной ВОСПРОИЗВОДЮ4ОСТИ. Известен также способ определени потенциальной продуктивности сортов озимой пшеницы путем выращивания растений в регулируемых условиях, последующего вьщеления иЭ них митохондрий, определения в митохондриях коэффициента окислительного / фосфори лирования и анализа полученных данных по изучаемым сортам 2). По данному способу митохондрии корней среднепродуктивного сорта обладают большей окислительной и фосфорилирующей способностью при окислении никотинамидадениннуклеоти восстановительного (НЛЦН), тогда как митохондрии корней двух высокопродуктивных сортов имеют более высокие показатели при окислении (сукцината,. Активность митохондрий этиолирова ных листьев на сукцинате по сортам подачи не различаются. При окислени НАДН митохондрий этиолированных листьев среднепродуктивного сорта Имеют самые низкие показатели. Недостатком известного способа является то, что он не обладает дос таточной точностью, так как в некоторых случаях получаются разноречивые результаты. , Цель изобретения - повьшение точности способа и возможность его использования на всем протяжении ве гетации растений. Поставленная цель -достигается тем, что согласно, способу определения потенциальной продуктивности сортов озимой пшеницы выделение мит хондрий осуществляют из трех-шести- дневньгх проростков, выращенных на 4202 воде, или из десятидневных; проростков, выращенных на водном растворе пировиноградной кислоты, или из за- |i чаточных колосьев растений, находящихся на VI-VII этапах генеративного органогенеза. При этом проростки выращивают на 0,05 М водном растворе пировиноградной кислоты. Определение этапов генеративного органогенеза проводили по методике Куперман Ф.М. з). Способ осуществляют следующим образом. Для проращивания на воде и 0,05 М растворе пировиноградной кислоты использовали откалиброванные семена высокопродуктивных сортов Одесская-51, степняк. Одесская полукарликовая. Бригантина, Мироновская 808 и низкопродуктивных сортов старой селекции Украинка, крымская местная, Кооператорка. Семена высевали в фарфоровые растильни на фильтровальную бумагу, смоченную в первом случае водопроводной водой, во втором 0,05 М водным раствором пировиноградной кислоты. Растильни помещали в термостат и проращи1вали при+22°С в условиях непрерывной темноты. В анализ брали 3-6-суточные проростки, выращенные на водопроводной воде, или 10-суточные, выращенные на пировиноградной кислоте. Выделение метохондрий проводили при +2 . Среда гомогенизации содержала 0,45 М сахарозы, 2/13 М калийфосфатного буфера, рН 7,7,4 мМ цистеина, 2 мМ ЭДТА (этилендиаминотетраацетат натрия). Среда промывания содержала те же компоненты, кроме цистеина. Для осаждения митохондрий применяли метод дифференциального центрифугирования в центрифуге К-24. Полученный осадок ресуспендировали в 0,45 М сахарозе, содержащей 1 мг/мл бычьего сьгеороточного альбумина (БСА) и 0,027 мМ ЭДТА, рН среды 7,4. Среда инкубации состояла из сахарозы 0,45 М, ВСА 1 мг/мл и ЭДТА . 0,054 мМ. Сукцинат применяли в концентрации 7,2 мМ. Конечная концентрация вносимого в ячейку АДФ составляла 200 мкМ. Скорость поглощения кислорода суспензией митохондрий определяли с I помощью закрытого совмещенного элек трода Кларка. Запись сигналов регистрировали на полярографе (производство ВНР) . Температуру в инкубационной ячей ке объемом 1,6 мл поддерживали с по мощью ультратермостата в пределах --26 -Ю.. В таблице представлены значения АДФ/0 у митохондрий этиолированных проростков, выращенных на воде и .пировиногрйдной кислоте. Проведенными экспериментами урта новлено, что значение коэффициента А,1Ф/0 у митохондрий проростков, выращенных на воде и пировиноградной 204 кислоте, четко коррелируют с характеристикой сортов с заранее известной продуктивностью. Полученные результаты подтверждены фактической урожайностью этих сортов в опыте. Это дает возможность использовать разработанный способ для оценки уровня потенциальной продуктивности новых перспективных селекционных форм, не имеющих еще статуса сорта. Предлагаемый способ может найти применение в научно-исследовательских институтах селекционного профиля для создания селекционных программ.

1. СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОТЕНЦИАЛЬНОЙ ПРОДУКТИВНОСТИ СОРТОВ ОЗИМОЙ ПШЕНИЦЫ путем выращивания растений в регулируемьк условиях, последующего вьщеления из них митохондрий, определения в митохондриях коэффициента окислительного фосфорилирования и анализа полученных данных по изучаемым сортам, о т л и чаюшийся тем, что, с целью повьпиения точности способа и возможности его использования на всем протяжении вегетации растений, выделение митохондрий осуществляют из трех-шёстидневных проростков, выращенных на воде, или из десятидневных проростков, выращенных на вод(Л ном растворе пировиноградной кислоты, или из-зачаточных колосьев растений, находящихся на VI-VII этапах генеративного органогенеза. 2. Способ по п. 1, отличающий с я тем, что проростки выращивают на 0,05 М водном растворе пировиноградной кислоты. 4 to