Способ определения и отбора морозоустойчивых сортов и селекционного материала озимых зерновых культур Советский патент 1988 года по МПК A01G7/00 

со

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к способам выявления и отбора морозоустойчивых сортов и селекционного материала.

Цель изобретения - повышение достоверности при упрощении.

Пример 1. Исследованию подвергают разные генотипы озимой пшеницы: высокоморозоустойчивый сорт Одес- , екая 16 и слабоморозоустойчивый сорт Безостая 1.

Семена тщательно калибруют и высевают в сосуды с почвой. Предварительное проращивание в течение 10 сут осуществляют при + 20 - 22°С и непрерывном освещении. Для дальнейшего прохождения первой фазы закаливания растения подвергают воздействию температуры + 1 - 2°С при непрерывном освещении в течение 10 сут. Вторую фазу закаливания продолжительностью в 5 сут растения проходят в темноте при - 3 - .

Для вьщеления митохондрий исполь- зуют нижнюю этиолированную-часть растений.

Функциональную активность митохондрий определяют полярографически (определяют скорость поглощения мито хондриями кислорода в полярографической ячейке объемом 1,6 мл с помощью совмещенного закрытого электрода Кларка) , В качестве полупроницаемой мем- браны используют полиэтиленовую пленку толщиной 10 мкм. Температуру 26 С поддерживают с помощью водяного ультратермостата. Экзогенный субстрат фосфорилирования - аденозиндифосфат (АДФ) - вносят в отдельные пробы суспензии митохондрий в количестве 80, 150, 250, 300 . В препарате АДФ предварительно определяют количество действующего вещества. Для оценки сортов известным способом определяют соотношение внесенного в полярографическую ячейку экзогенного АДФ и количество поглощенного кислорода, т.е. определяют коэффициент АДФ/0, характеризующий меру окислительного фосфорилирования. Иитохонд- риальньй белок определяют по Лоури. Интенсивность поглощения кислорода вьфажается в наноатомах кислорода в минуту на 1 мг белка о Для оценки сортов новым способом измеряют продолжительность периода потребления АДФ (h) в секундах.

с

O

5 0

5

0 -Q

0

Влияние концентрации экзогенного АДФ на скорость окислительной и фосфо- рилирующей функций митохондрий при закаливании сортов озимой пшеницы, различающихся по морозоустойчивости, показано в табл. 1.

Представленные в табл. 1 данные свидетельствуют о том, что в присутствии 150-250 мкМ экзогенного АДФ скорость его потребления митохондриями достоверно коррелирует с морозоустойчивостью изучаемых сортов озимой пшеницы: во всех вариантах опыта продолжительность потребления АДФ митохондриями сорта Одесская 16 значительно меньше, чем у митохондрий сорта Безостая 1.

Пример 2. Проводят опыты, аналогичные примеру 1.

Сопоставительные данные нового и известного способов оценки морозоустойчивости сортов озимой пшеницы представлены в табл. 2.

Из приведенных данных табл.2 видно, что изменение величины АДФ/0 непропорционально изменению времени фосфорилирования. Например, у сорта Сан-Пасторе величина АДФ/0 1,27 в одном случае соответствует времени фосфорилирования 181 с, в другом случае такая же величина АДФ/0 соответствует 281 с. Аналогичная картина наблюдается и у сорта Одесская 16.

П р и м е р 3. Проводят сравнительное изучение новым способом сортов озимой пшеницы с известной морозоустойчивостью.

Результаты оценки морозоустойчивости сортов озимой пшеницы новым способом представлены н табл 3.

Из приведенных данных табл. 3 видно, что наиболее морозоустойчивый ;орт Одесская 16 утилизирует субстрат фосфорилирования в течение 1 А2 с, в то время как слабоморозоустойчивый сорт Русалка - в течение 215 с. Временная характеристика является надежным критерием отбора генотипов на морозоустойчивость. Кроме того, способ требует минимальных трудозатрат. Проводить исследования может лаборант средней квалификации. При проведении анализов важно внести в суспензию митохондрий необходимые экзогенные субстраты, а в дальнейшем полученные данные автоматически фиксируются на самописце. Данные сразу же можно читать и даBajb оценку исследуемому материалу, в то время как получение полных данных по величине АДФ/0 требует от исследователя высокой специальной подготовки и проведения целого ряда дополнительных сложных исследований.

Формула изобретения

них митохондрий, добавление адеко- зиндифосфата к их суспензии, измерение их фосфорилирующей активности и отбор особей с наибольшей фосфорили- рухлдей активностью митохондрий, о т- личающийся тем, что, с целью повьппения достоверности при упрощении, аденозиндифосфат добав

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к способам вьивления и отбора морозоустойчивых сортов и селекционного материала. Цель изобретения - повьппение достоверности при упрощении. Проростки озимой пшеницы подвергают закаливанию, вьщеляют из них митохондрии, к суспензии которых добавляют 150-250 мкМ аденозиндифосфата (АДФ), и измеряют продолжительность периода его потребления митохондриями. В качестве морозостойких отбирают те сорта или тот селекционный материал, на потребление АДФ митохондриями которых требуется меньший промежуток времени. 3 табл. g (Л

бпособ определения и отбора моро- Q ляют в количестве 150-250 мкМ, а фос- зоустойчизых сортов и селекционного форилирующую активность измеряют материала озимых зерновых культур, по промежутку времени, за который включающий выращивание растений в он метаболизируется суспензией мито- условиях закаливания, вьделение из хондрий.

Таблица 1

0,88

1,02

1,30

1,44

1, 78

1,88

О

80 мкМ экзогенного АДФ

1300,92

1501,30

150 мкМ экзогенного АДФ 1201,35

1201,51

250 мкМ экзогенного АДФ 1351,61

901,80

300 мкМ экзогенного АДФ

1,46 1201,68

Показатель

Сорт

Одесская 16 АДФ/0

(высокоморозоустойчивый) h,c

150 165

160 135

200 140

250 150

Таблица 2

Экзогенный АДФ1 мхМ

I 200 Т 250

1,82 142

1,67 156

Продолжение табл.2

Дабпица 3