Способ получения инвазионных личинок стронгилоидес Советский патент 1984 года по МПК A01K67/00 

1-

Изобретение относится к биологии .и может быть использовано для получения инвазионной культуры стронгилоидее и для диагнрстики строгилоидоза.

Известен способ получения инвазионных личинок стронгиловдес, включающий внесение субстрата с инвазионными яйцамис крьшкой на 1/3 его заполнения и помещение его в термостат при 26-28°С на 5-6 сут с последующим перенесением субстрата с инвазионными личинками на марлю и внесения марли с субстратом в воронку, залитую водой, подогретой до 36С, с присоединенной к ней через резиновую трубку пробирки. Попадая в подогретую воду личинки интенсивно передвигаются, выходят из субстрата и. проваливаются в пробирку. Субстрат с марлей удаляют из воронки и через 10-15 мин пробирку от воронки отсоединяют, осевшие на дно пробирки личинки используют в ра- боте для заражения животных или для исследования или получения антигена Г3

Недостатком известного способа является значительное загрязнение культуры инвазионных личинок суб- стратом и посторонней микрофлорой, большая гибель инвазионного материала, опасность работы оператора, с инвазионной культурой, патогенной для человека во время перенесения субстрата на марлю и в воронку.

Цель изобретения - повышение выхода культуры инвазионных личинок, повышение выживаемости и упрощение способа.

Поставленная цель достигается тем, что выращивание личинок осуществляют на субстрате, покрытом увлажненным пористым материалом в виде I-5 слоев марли, а выделение инвазионных личинок осуществляют из 2 - 5-го слоев марли.

Пример 1. В I-литровую стеклянную банку л на 1/3 ее заполнения вносят 200 г субстрата, состоящ его из фекалия животных (свиней, сильна степень заражения, больных стронгилоидозом и смешанного с деревянными опилками в соотношеШ1и 1:1, поверх субстрата накладывают увлажненный пористый материал Ыарля ) 1-5 слоев, банку .закрывают крышкой (чашкой Петри) и ставят а термостат при 26 С на 4 дня.

6а

После заверщения культивирования емкость с инвазионной культурой вынимают из термостата, снимают крьшгку и с поверхности субстрата удаляют 1-4 верхних слоя марли. Затем окунают в емкость с подогретой до (35-36 С водой, Ь-а нижний слой марли не используют, так как он загрязнен с: бстратом. Из емкости, в

которую окунают, пористый материал с инвазионными личинками, сливают излишки воды, в осадке рбнаруживают только чистую культуру личинок. Пример 2. В I-литровую стеклянную банку на1/3 ее заполнения вносят 250 г субстрата, состоящего из фекалия животных, больных стронгилоидозом, и смешивают с дре- весными опилками в соотношении 1:2

и поверх субстрата накладывают увлажненный пористый материал 1-5 слоев, банку закрывают и ставят в термостат при 28° на 2 дня. Следующие манипуляции с культурой производят

согласно примеру 1 .

Пример 3. В -литровую стеклянную банку на 1/3 ее заполнения вносят 300 г субстрата, состоящего из фекалия животных, больных стронгилоидозом, и смешивают с древесными опилками в соотношении 1:1 и поверх субстрата накладывают увлажнённый пористый материал 1-5 слоев, банку закрывают и ставят в термостат при на 3 дня. Следующие

манипуляции с культурой осуществляют согласно примеру 1.

Диагностика стронгилоидоза. От 20 животных исследуют фекалии на наличие заболевания их стронгилоидозом как описано в примере 2 и 3. Установлено: сильная степень заражения 5 средняя 8, слабая 5 поросят.

Использование предлагаемого способа позволяет получить культуру инвазионных личинок, не загрязненных субстратом, увеличить срок жизни личинок в два раза, повысить выход инвазионного материала, исключить заражение оператора и в случае

необходимости испсшьзовать его для постановки диагноза на стрбнгилоидоз. При заражении животных инвазионным материалом, полученным предлагаеIVUIM способом,наблюдаем высокую интенсивность инвазии. При изготовлении антигена исключается необходимость в дополнительной очистке культуры инвазионных личинок.

Э 11183264

Для более полного освобождениядят с нижних слоев cy6cfpaTa 6anee

субстрата от инвазионного манерна-теплого в прохладга.й, избегая от

ла проводят подогрев с субстратомповьшенной температуры и в конечи инвазионным материалом с доннойном счете собираются в пористом

части емкости до температуры материале, покрывающем субстрат.

38-39 градусов. При отмеченнойКультуру инвазионных личинок

температуре подвижность инвазион-выделяют вьппе описанным обраных личинок усиливается и они ухо-зом.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНВАЗИОННЫХ ЛИЧИНОК СТРОНГИЛОИДЕС, включающий выращивание личинок на субстрате и выделение их, о т л и ч а ющ и и с я тем, что, с целью повышения выхода культуры инвазионных личинок и упрощения способа, н 1ращивание личинок осуществляют на субстрате , покрытом увлажненным пористым материалом в виде 1-5 слоев марли , а выделение инвазионных личинок осуществляют из 2 -.5-го слоев марли..