Способ лабораторной диагностики стронгилоидоза Советский патент 1987 года по МПК A61B10/00 

Изобретение относится к лабораторной диагностике заразных болезней, в частности к диагностике паразитных болезней человека.

Цель изобретения - повьшение чувствительности способа за счет стимуляции миграции личинок гельминта .

Пример 1, Для исследования берут 3,0 г фекалий человека, которые помещают на металлические сеточки, прикрепленные к латунному ободку диаметром 25-27 мм с ручкой. Сеточки с фекалиями помещают в стеклянные баночки объемом 30 мл и осторожно по стенкам баночки заливают 0,9 или 1,2%-ньм раствором хлористого натрия в количестве 15 мл, подогретым до 40-45°С. Раствор хлористого натрия целесообразно готовить заранее и хранить перед употреблением в холодильнике до 1 мес.

Через 20 мин вьщержийания фекалий на сеточках в растворе хлористого натрия сеточку с фекалиями удаляют. Фексшии сбрасываются в 0,5-литровые стеклянные банки и заливаются 5%-ным лизолом, а сеточки впоследствии обрабатьшают кипячением.

Раствор хлористого натрия, в котором выдерживались фекалии, из баноче сливают в две центрифужные пробирки и центрифугируют при 1500 об/мин в течение 2 мин. После центрифугирования верхнюю часть жидкости из центрифужных пробирок осторожно сливают, оставляя.в осадке около 1 мл жидкости. Осадок распределяют на два-три предметных стекла и микроскопируют под увеличением 8x7 во всех полях зрения в пределах препарата. При обнаружении подвижных личинок их идентифицируют .до вида.

Проводят 327 параллельных анали- зов фекалий, из них с 0,6, 0,9 и 1,2%-ми растворами хлористого натрия а также с водой по 78 анализов. С 0,3%-ным раствором хлористого натрия проводят 15 анализов.

В связи с обнаруженной недостаточной зффективностью этого раствора анализы с ним прекращают. Проводят единичные анализы фекалий с 1,5%-ным раствором хлористого натрия. Резуль- таты представлены в табл. 1, из которой видно, что при использовании воды положительные результаты показывают 54,,7% анализов, а при ис

с

5 .

,,

5

0

пользовании 0,6-1,2%-ных растворов хлористого катрия доля положительных результатов возростает до 80,0-96,4% (р : 0,01). Наиболее высокая выявля- емость личинок наблюдалась при применении 0,9-1,2%-ных растворов (85,5- 96,4%). При средней интенсивности инвазии результаты всех анализов фекалий, как при использовании воды, так и солевых растворов, положительны.

Наблюдается также разница в средних числах личинок в исследованных навесках фекалий при применении разных жидких сред , представленных в табл. 2. Это число при низкой интенсивности инвазии повышается с 0,75 при использовании воды до 2,2- 3,1 личинок при использовании 0,9- 1,2%-ных солевых растворов. Такая же закономерность наблюдается и при средней интенсивности инвазии.

Таким образом, солевые растворы при определенных концентрациях раздражающе действуют на рабдитовидных личинок и тем самым способствуют более интенсивной их миграции из фекалий. При применении 1,5%-го раствора хлористого натрия наблюдается также интенсивное выделение рабдитовидных личинок из фекалий, однако в этом растворе через 20 мин наблюдается утрата личинками двигательной способности (до 70% личинок). Указанная концентрация соли является чрезмерно высокой для сохранения жизнеспособности личинок данного гельминта.

Пример 2. В клинических условиях проводят- 79 параллельных исследований фекалий больных стронгило- идозом по модификации,метода Бермана с использованием в качестве жидких сред подогретых до 40-45 С водопроводной воды и 0,9%-го раствора хлористого натрия. Результаты исследования представлены д табл. 3.

Как видно из табл. 3, при использовании водопроводной воды общая вы- являемость личинок достигает 89,9%, но при низкой их концентрации она составляет 46,7%. В то же время при применении 0,9%-го солевого раствора общая выявляемость личинок достигает 97,9%, т.е. приближается к максимальному возможному уровню. При низкой концентрации личинок их выявляемость также йысока (87,5%), намного превы3132А645 4

тающая соответствующий показатель помещение исследуемого материала на при использовании воды (р 0,01). металлическую сетку, вьщерживание в

Таким образом, способ позволяет горячей воде в течение 20-30 мин с при однократном обследовании населе- :последующим исследованием осадка, ния на стронгилоидоз вьшвлять боль 5 отличающийся тем, что, ных не только с высокой, но и в 85,5- с целью повышения чувствительности 96,4% с низкой интенсивностью инвазии. способа за счет стимуляции миграции Формула изобретения личинок гельминта, в горячую воду до- Способ лабораторной диагностики полнительно вводят раствор хлористого стронгилоидоза человека, включающий tO натрия до концентрации 0,9-1,2%.

1 Т а б л и ц а 1

55

30

55

41

54,5i6,6

23

23

100

Табл-ица 2

0,75t 1,09

23

125

5,4i5,9

23 171 7,4 ±5,5 23 194 8,4±4,3 23 256 11, It 8,9

Янэкая

Средняя высокая

Всего

15 7 46,7i12,9 24 21 64 64 100 124 121 79 71 89,,4 145 142

Составитель В. Романова

Редактор П. Гереши Техред И.Попович Корректор Е. Рошко

Заказ 2987/3 Тираж 595Подписное

ВНИШШ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113033, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Таблица 3

87,5±6,8

100 97,9±1,2

Изобретение относится к лабора- торной диагностике заразных болезней, в частности к диагностике паразитных болезней человека, и может быть применено для диагностики стронгилоидо- за человека. Целью изобретения является повьшение чувствительности способа за счет стимуляции миграции личинок гельминта. Для исследования берут навеску фекалий, помещают на металлическую сеточку. Сеточку с фека- . ЛИЯМИ опускают в стеклянную банку и осторожно по стенкам банки .заливают 0,9-1,2%-ным растворо хлористого натрия, подогретым до 40-45 С. Через 20 мин сеточку с фекалиями удаляют. Раствор хлористого натрия, в котором вьщерживались фекалии, сливают в центрифунсные пробирки и центрифугируют при 1500 об/мин в течение 2 мин. Исследуют осадок путем микроскопиро- вания. При обнаружении подвижных личинок их идентифицируют до вида. Использование 0,9-1,2%-ного раствора хлористого натрия позволяет выявлять больных с низкой интенсивностью инвазии (от 1 до 9 личинок в 3,0) в 85,5-96% случаев, в то время как при использовании водопроводной воды - в 54,4% случаев. При средней интенсивности инвазии (от 10 до 50 личинок в 3,0) выявляемость больных строн- гилоидозом обоими способами составляет 100%. Однако при использовании растворов хлористого натрия среднее количество личинок в анализе значительно превьшает таковое при применении водопроводной воды (8,4-11,1 и 5,4 личинки соответственно). Способ позволяет при однократном обследовании населения на стронгилогвдоз выявлять больных не только с высокой, но и в 85,5-96,4% с низкой интенсивностью инвазии. 3 табл. (Л с: оо ю 4:; 05 сд