Способ определения повреждения органов Советский патент 1985 года по МПК A61B10/00 

4

Од

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при определении функционального состояния органов в процессе ко-нсервирования и непосредственно перед трансплантацией.

Для решения вопроса о целесообразности консервирования и трансплантации органа необходимо иметь данные о степени его повреждения, позволяющие судить о его функциональном состояни

Известен биохимический способ определения степени повреждения органов, основанный на определении количества продуктов метаболизма в ткани консервируемого органа 1 .

Однако этот способ громоздок, требует значительных затрат времени и реактивов, связан с нарушение целостности органа и не позволяет оценивать его состояние в процессе консервирования.

Известен способ определения повреждения органа путем его перфузии и исследования оттекающего перпузата, основанный на анализе энергетическог баланса перфузируемого органа. Для этого измеряют скорость перфузии, напряжение углекислоты и кислорода, концентрацию водородньЬс ионов и бикарбонатного буфера, после чего на основании математического расчета определяют состояние органа (23 .

Однако известньй способ трудоемок требует значительных затрат времени и сложной аппаратуры,

Цель изобретения - упрощение способа определения степени повреждения органа.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу определения повреждения органов путем перфузии органа, и исследования перфузата,. в перфузионную среду вводят Флюоресцендиацетат в концентрации 10 -10 М и интенсивность флюоресценции в оттекающем от органа перфузате свидетельствует о степени повреждения органа.

Пример 1. Выли проведены 3 серии опытов (в каждой по 6 почек кролика): 1-я серия - почки со сроком ишемии 5 мин, 2-я серия - со СрЬком ишемии 30 мин и 3-я серия со сроком ишемии 60 мин.

Все почки после тепловой ишемии перфузировали раствором Хэнкс0, в которьй бь1л добавлен флуоресцеиндиацетат в концентрации 10 М при4с

перфузионном давлении 60 мм рт.ст., пульсирующим потоком в течение 60 мин

Флуоресцендиацетат (€« Н,(, О) представляет собой кристаллический порошок слабожелтого цвета, плохо растворимый в воде (-10 М), мол.вес 416,4, т.пл., 202-204°С. Применяется для изучения клеточных мембран и гистохимического определения эсТераз.

В перфузат добавляют нефлуоресцирующее соединение флуоресцендиацетат которое при повреждении органа разлагается на флуоресцеин и уксусную кислоту. Уровень интенсивности флуоресценции перфузата соответствует степенл повреждения клеток органа и определяется на спектрофлуориметре в проточной кювете в оттеке перфузата из вены при длине волны возбуждения в 481 - 1 нм и максимуме длины волны флуоресценции Хф 617-1 нм.

В концентрации 10 10 М флуооресцеиндиацетат не оказьгеает повреждакйцего действия на орган. Уровень интенсивности фруоресценции увеличивается параллельно времени тепловой ишемии органа.

Через 5 мин интенсивность флуоресценции не изменялась, через 30мин. ишемии возрастала в 1,5 раза, через 60 мин. ишемии в 2 раза. После окончани перфузии почки подключали на абдоминальньй отдел аорты с целью изучения их функционального состояния. В 1-й серии после подключения почек к кровеносным сосудам в них восстанавливался почечны кровоток, почки были розового цвета, из мочеточника отмечалось выделение мочи (0,25-0,07 мл/мин. Количество креатинина в моче составляло 40,3 2,5 мг %. Индигокарминовая проба положительная на 2-гй минуте.

Во второй серии опытов после подключения почек к сосудам кролика кровоток восстанавливается на 5-й мин. почки бьши с синюшным оттенком, диурез мочи - 0,10%,05 мл/мин, креатинина в моче - 10,,6 мг %. Индигокарминовая проба положительная на 7-й минуту.

В 3-й серии кровоток восстанавливается на 10-й мин., почки синюшного цвета, мочи не было, индигокарминовая проба - отрицательная;

Как видно из приведенных примеров предлагаемый способ прост, не требуе сложной аппаратуры, позволяет с высо31146000 4

кой точностью определить степень . факторам и Дает возможность осуществповреждения органов, обладает высо- пять динамический контроль эа состоя кой чувствительностью к повреждающим нием органа в процессе консервирования,

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОВРЕЖДЕНИЯ ОРГАНОВ путем перфузии органа и исследования пер узата, о т л и-чающийся тем, что, с целью упрощения способа, в перфузионную среду вводят флюоресцендиацетат в концентрации 10 -10 М и интенсивность флюоресценции в оттекающем от органа перфузате свидетельствует о степени повреждения органа.