Способ изготовления камеры для культивирования микроорганизмов или клеток в организме Советский патент 1985 года по МПК C12M1/00 

Од

со о

о©

О) Т1эобретение относится к медицине кой микробиологии и может быть использовано для выращивания, изучения характера роста и биологических свойств микроорганизмов или клеток в организме. Целью изобретения является yrtpoщение способа получения камеры. Сущность способа состоит в том, что подлежащие культивированию микроорганизмы или клетки иммобилизуют в расплавленный 1,5-3%-ный раствор агар-агара в физиологическом растворе. Для этого к 100 мл физиол гического раствора добавляют 2,5 г агар-агара, размешивают.и кипятят на водяной бане до полного расплавлен-ия агар-агара, Расплавленный агар-агар стерилизуют паром под давлением при 1.20 С в течение 30 ми Затем 5-6 мл стерильного агар-агара с помощью стерильной пипетки переносят в стерильную пробирку и охлаждают до 45-48 С, Затем в агар добавляют предварительно приготовленную суспензию исследуемого микроорганизма или клеток и тщательно размешивают, ее в агаре. Полученную смесь выливают в стерильную чашку Петри и дает ей застыть. При этом получают тонкую (1-1,5 мм) пластину агарового геля с иммобилизованными микроорганизмами или клетками. Из данной пластины стерильным сверлом для пробок, например 0,6 см, вырезают круглые блоки. Затем во вторую стерильную чашку Петри наливают 15-16 мл стерильного расплавленного раствора агар-агара в физиологическом растворе и охлаждают до 45-48 С. Из первой чашки Петри стерильным скальпелем извлека ют агаровый блок с иммобилизованными микроорганизмами или клетками и в горизонтальном положении догружают его в гель, находящийся во второй чашке. Петри, чтобы- блок со всех сторон полностью покрылся расплавленным агар-агаром и не касался дна чащки Петри. Таким образом, в одну чашку Петри можно погрузить.10-12 блоков с иммолизованными микроорганизмами или клетками на расстоянии 2-2,5 см друг от друга. Место расположения блоков в расплавленном агаре маркируют на дне чашки Петри. Дают агару застыть, а затем стерильным сверлом для Пробок диаметром, например, 2 см вырезают корпус так, чтобы блок с иммобилизованными микроорганизмами или клетками располагался в центре. При этом получают монолитные камеры агарового геля круглой формы, которые могут быть имплантированы в организм. Рост микроорганизмов в камере обеспечивается за счет диффузии питательных веществ из-организма в гель. При этом слой агарового геля, окружающий внутренний блок, служит надежным препятствием для проникновения клеток организма в камеру и выхода микроорганизмов или клеток эа пределы камеры. В зависимо.сти от целей исследований и вида животного камеры готовят различных форм (круглые, прямоугольные, овальные и др.) и размеров и .в необходимом количестве. Изменяя процентное соотношение агар-агара в агаровом геле, регулируют проницаемость камер для питательных веществ.

СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ КАЖРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ ИЛИ КЛЕТОК В ОРГАНИЗМЕ, включающий формирование корпуса и расположенйого внутри него блока для микроорганизмов или клеток, о т л ичающийс я тем, что, с целью упрощения способа, блок для микроорганизмов или клеток формируют перед формированием корпуса путем иммобилизации микроорганизмов или кяеток в расплавленный стерильный раствор) агар-агара в физиологическом растворе и выштамповЫвания блока после застывания раствора, а формирование корпуса осуществляют путем погружения блока в расплавленный раствор того же состава и выштамповьгеания корпуса после застывания раствора.