Способ определения полупериода агрегации эритроцитов Советский патент 1986 года по МПК G01N33/48 

ts3

35

ю : Изобретение относится к меди1(ине, а именно к физиологии (гематологии). Цель изобретения - повьшение чувствительности способа за счет того, что дезагрегацию осуществляют пьез оэлементом, работаюпщм в звуковом диапазоне частот. Способ осуществляют следующим образом. Исследуемую пробу (капиллярной, венозной, артериальной) крови втягивают шприцем через щтуцера в специальную кювету, предварительно промытую гепарином (приготовленным из расчета 500 ед. на 10 мл крови) и высушенную. Штуцера закрывают микропробками, с помощью электрического разъема подсоединяют к стандартному источнику питания пьезоэлемента и стандартной измерительной аппаратуре . Микрокювету устанавливают горизонтально на предметном столике биологического микроскопа. Свет подают в вертикапьном направлении с зеркала микроскопа через типовой конденсатор исследуемую пробу крови, оптическую систему микроскопа на фотоэлемент и фото/кинокамеру. Выходным напряжение и частотой источника питания задают амплитуду и частоту механических колебаний пьезоэлемента и жестко с ним связанной стенки кюветы необходимые для полной дезагрегации,. Вкпючают ис точник питания и разрушения проводят механическими колебаниями с амплитудой 0,1-1,0 мкм и частотой 1,0-20,0 кГц, при этом механическое воз, действие направлено перпендикулярно к поверхности исследуемой пробы. Изменения оптической плотности исследуемой пробы крови, связанные, с обра тимой агрегацией эритроцитов,, преобразуются в электрический сигнал фотоэлементом, усиливаются усилителем и регистрируются на бумажную ленту самопксцем. Степень дезагрегации контролируют в процессе перемешивани фотометрированием и микроскопировани ем. После достижения полной дезагре гации, соответствующей максимальной оптической плотности исследуемой кр ви, выключают питание пьезоэлемента и (по изменению оптической плотности) регистрируют процесс спонтанной агрегации эритроцитов. Полупериод агрегации эритроцитов вычисляют на основании результатов измерений фотометрической кривой, регистрируемой

кого разрушения агрегатов эритроцитов с последующим определением оптической плотности исследуемой пробы крови, амописцем, Долупериод агрегации ремя, в течение которого амплитуда отометрического сигнала изменяется а 50% (полная амплитуда определяетя от момента прекращения перемешивания при достижении полной дезагрегаии эритроцитов - максимальная оптическая плотность, до выхода фотометрической кривой на плато, соответствующее полной агрегации эритроцитов - минимальная оптическая плотность исследуемой пробы крови). Способ позволяет повысить точность исследования, так как величина полупериода агрегации эритроцитов, характеризующего кинетику агрегации эри|роцитов, зависит от степени их дезагрегации. Пример . Механическое воздействие на исслудемые пробы крови человека, собаки, кощки, крысы, мыши осуществляют с амплитудой порядка 0,1 мкм и,соответственно,частотами 1,0 и 20,0 кГц. О неполной дезагрегации эритроцитов свидетельствуют малая амплитуда фотометрического сигнала и НсШичие характерного пика на фторметрической кривой в момент прекращения перемешивания. Далее проводят механическое воздействие при оптимальных значениях частоты и амплитуды колебаний для эритроцитов крови мыши ttg 13,0 кГц, Ag 0,5 мкм). О полной дезагрегации эритроцитов свидетельствует отсутствие характерного пика в момент прекращения перемешивания, а также более высокая амплитуда сигнала той же самой пробы крови. Отличаются и численные значения полупериода -агрегации, определенные на основании обсчета фотометрических кривых. 40,0; 105,0 и 70.,0 с соответственно. Применение предлагаемого способа, на основании анализа меньшей дозы крови (0,005 мл вместо 0,01 мл согласно известному спо.собу), позволяет повысить чувствительность измерений в 4 - 5 раз. Формула изобретения Способ определения полупериода , агрегации эритроцитов путем механичес3,12623764 ..

отличающийся тем, что, с1,0 tiKM и частотой 1,0 - 20,0 кГц,

целью повышения чувствительности спо- при этом механическое воздействие соба, разрушение проводят механичес-направлено перпендикулярно к поверхкими колебаниями с амплитудой О,1 -ности исследуемой пробы.

Изобретение относится к области медицины, а именно к физиологии, и может найти применение в гематологии. Цель изобретения - повьшение чувствительности способа. Исследуемую пробу крови втягивают через штуцер шприцем в микрокювету, промытую гепарином и высушенную. Штуцер закрывают микропробкой и с помощью электрического разъема подсоединяют к стандартному источнику питания пьезоэлемента и стандартной измерительной аппара- . туре. Микрокювету устанавливают горизонтально, свет подают вертикально .с зеркала микроскопа через типовой конденсатор, пробу крови, оптическую систему микроскопа на фотоэлемент. Амплитуду и частоту механических колебаний пьезозлемента, необходимые для полной дезагрегации, задают выходным напряжением и частотой источ о ника питания. Амплитуда 0,1-1,0 мкм, (f. частота 1,0-20 кГц. Механическое воздействие перпендикулярно к поверхС ности исследуемой пробы.