Способ определения засухоустойчивости пшеницы Советский патент 1987 года по МПК A01G7/00 

11292680

Изобретение относится к физиолоии растений и может быть использоано в селекции озимой и яровой пшеицы.

Цель изобретения - повышение объктивности оценки и уменьшение труоемкости способа.

Пример. 1. Семена опытных

кр но во йо на ют ро ле ре ти ри на ни вс пе си на и пр си о ны

образцов пшеницы, взятые с растений, выращенных рядом (парным методом) с сортами-классификаторами, проращивают в чашках Петри по 30 семян в каждой по схеме: 48 ч при в темноте, затем еще 48 ч при последовательном двухкратном чередовании во здействия света (белого от люми- десцентных ламп для яровой и пропущенного через красный светофильтр для озимых) 15 ч и темноты 9 ч. Пов- торность опыта 4-кратная. Для анализа берут 20 проростков из каждой чашки и переносят в стеклянные пробирки емкостью 25 мл, в которые наливают по 10 мл воды, помещают на водяную баню при температуре воды 80,85 к,90°С на 10,15 и 20 мин. После этого пробирки с проростками . ;одновременно вынимают и быстро выливают из них горячую воду и тут же опускают их в воду комнатной температуры. Далее проростки тщательно растирают в ступках с толченым стеклом и экстрагируют фермент водой из расчета 0,5 мл на одно проросшее семя. Растертую массу переносят в пробирки той же емкости, взбалтывают на качалке в течение 1 ч, центрифугируют 20 мин при 6 тыс. об/мин. Активность изофермента d -амилазы определяют методом вертикального электрофореза в полиакриламидном геле (И.В.Лукашевич. К методике определения изоферментов амилазы в полиакриламидном геле с йод-крахмальной пробы. - Изв. АН Кирг.ССР, 1974, № 1, с. 42-45).

На 1 мл насадочной жидкости добавляют 60 мг акриламида, 0,4 мл этой смеси наносят на Tpy6ky с поли- меризованным 7,5%-ным полиакриламид- ным гелем и проводят электрофорез в трио-глициновом буфере рН 8,3. Белковые зоны, обладающие о(.-амилазной активностью, обнаруживают в гелях путем инкубации фермента при в течение часа в 3%-ном растворе

ВНИШТИ Заказ 300/1

Произв.-полигр пр-тие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4

5

0

5

0

5

крахмала, приготовленном на ацетатном буфере рН 5,6. Далее промывают водой и выдерживают 5 мин в растворе йода для выявления реакции фермента на крахмал. Окрашенные гели промывают водой и фиксируют 2%-ным раствором трихлоруксусной кислоты. Проявленные полосы на гелях (электрофо- реграммы) отражают степень активности изоферментов о(-амилазы и регистрируют в виде записи (денситограмм) на микрофотометре МФ-4. Для выявления степени разрушения изоферментов вследствие воздействия высокой температуры измеряют высоту (мм) у максимально проявленного изофермента на денситограмме в опытном образце и выражают ее в процентах к высоте проявления того же фермента на денситограмме сорта-классификатора. Сортом-классификатором берут для озимых Одесскую-51, для яровых - Эритроспермум 841, оба районированные, засухоустойчивые.

Полученные экспериментальные данные позволяют утверждать, что оценка степени разрушения изоферментов ci -амилазы и снижение их активности в проросших семенах высокой температурой позволяет достоверно дифференцировать сорта мягких озимых и яровых пшениц по их засухоустойчивости и может быть принята в качестве способа определения этого свойства при ведении селекции в этом 1 направлении.

40

45

Формула изобретения

Способ определения засухоустойчивости пшеницы, включающий проращивание семян, воздействие температуры, измерение биохимического показателя и сравнение с контролем, отличающийся тем, что, с целью повьш1ения обг ективности оценки и уменьшения трудоемкости, семена проращивают в течение 84-132 ч, затем подвергают воздействию температуры 84-87°С в течение 15-20 мин, а в качестве биохимического показателя используют активность изоферментов ot- - -амилазы, при этом засухоустойчивость тем больше, чем меньше снижена активность изоферментов.

ираж 630 Подписное .

50

Из обретение относится к физиологии растений и может быть использовано в селекции озимой и яровой пшеницы. Цел-ь изобретения - повьппе- ние объективности оценки и уменьшение трудоемкости способа. Семена проращивают в течение 84-132 ч. Затем семена на водяной бане подвергают воздействию температуры 84-87°С в течение 15-20 мин. Измеряют активность изоферментов сА-амилазы методом вертикального электрофореза в полиакриламидном геле и сравнивают с контролем-сортом классификатором. Чем меньше снижена активность изоферментов, тем больше засухоустойчивость. а е (Л ю кэ 05 00 О