Способ распознавания озимых и яровых форм пшеницы Советский патент 1988 года по МПК A01H1/04 

со

О5

Изобретение относится к растениеводству : селекции.

Целью изобретения является тестирование индивидуальных растений-регенератов с последующим получением от них потомства.

П р и м е р. Зерно каждого селекционного образца, сорта или растений-регенератов пшеницы проращивают в растильнях на подложках из фильтровальной бумаги при комнатной температуре и естественном освещении и по достижении развитого 3-го листа помещают в климатическую камеру со следующим температурным режимом: первые сутки 8-10°С, вторые сутки , трое суток при О - (-2)С и сутки при (-5) - (-7)°С при 10-часовом искусственном освещении.

После этого для анализа срезают третий лист (навеска 0,02-0,025 г) и гомогенизируют на холоде в 0,3 см трис-глицинового буфера при рН 8,3, содержащего 40% сахарозы, в течение 30 мин. Затем гомогенат центрифугируют и после центрифугирования при 7000 g 15 мин надосадочную жидкость в количестве 0704 см используют для элек- трофоретического деления катодных изопероксидаз.

Электрофорез осуществляют в цилиндрических полиакриламидных гелях (7,5%) длиной 6-7 см и диаметром 0,6 см в режиме: трис-глициновый буфер при рН 8,3 от анода к катоду i. ч 20 мин, причем

первые 20 мин ток на трубку подается силой 2 мА, а затем 4 мА.

После электрофореза гели помещают в 0,02%-ный раствор бензидина солянокислого в ацетатном буфере рН4,7 на 20 мин, а затем гели переносят в 0,1%-ный раствор перекиси водорода l,o появления голубых полос изопероксидаз .

По наличию-отсутствию изоперок- сидазы А-32 судят о принадлежности испытуемого образца к озимым или соответственно к яровым формам пшеницы .

Формула изобретения

Спос об распознавания озимых и я;ровых форм пшениць, включающий воздействие низких температур на проростки, отличающийся тем, что, с целью тестирования индивидуальных растений с последующим получением от них потомства, проростки, имеющие 3-й развитой лист, помет щают в холодильную камеру с периодическим искусственным освещением и подвергают охлаждению н режиме: первые сутки , вторые 3-5°С, третьи-пятые О - (-2)С и шестые (-5) - (-7 )°С, после чего из 3-го листа извлекают пероксидазы, которые подвергают электрофорезу в полиак- риламидном геле и судят об озимости или яровости соответственно по наличию-отсутствию катодного изозима Л-32.

Изобретение относится к растениеводству и селекции. Цель изббре- тения - тестирование индивидуальных растений-регенератов с последующим получением от них потомства. Растения выращивают до фазы 3-го развитого листа, помещают в холодильную камеру с периодическим искусственным освещением и воздействуют на них в первые сутки температурой 8-10 С, вторые 3-5°С, третьи - пятые О - (-2)°С и шестые (-5) -(-7)0, Из 3-го листа получают навеску, которую гомогенизируют в присутствии трис-глицинового буфера в течение 30 мин и извлекают пероксидазу. Подвергают ее электрофорезу для электро- форетического деления катодных изо- пероксидаз.. По наличию-отсутствию катодного изозима А-32 судят об ози- МОС7И : или яровости соответственно. (Л