Способ диагностики наследственного сфероцитоза Советский патент 1987 года по МПК A61B10/00 G01N33/68 

Изобретение относится к медицине и кас ается способа диагностики наследственного сфероцитоза.

Целью изобретения является повышение точности способа за счет выяв- ления латентной формы заболевания.

Способ осуществляется следующим образом.

У лиц с подозрением на наследственный сфероцитоз берут кровь из пальца и проверяют на начилие микро- сфероцитоза, уменьшенного диаметра и пониженной осмотической резистент- ности эритроцитов и повьшенного числа ретикулоцитов. Параллельно из веИы берут кровь в объеме 15 мл, выделяют мембраны эритроцитов по методу Brink- man, определяют ((-K) АТФ-азную активность, белок по Loury, фосфор по Fiske, фракционный состав липидов по Шталь.

При наличии микросфероцитоза, уменьшенного диаметра и пониженной осмотической резистентности эритроцитов и повышенного числа ретикулоцитов с одновременным повышением () АТФ-азной активности мембран эритроцитов и визуально определяемым увеличением липидной фракции в зоне свобод ных жирных кислот подтверждают диа- гноз наследственного сфероцитоза. Если повьшение (Na +К) АТФ-азной ак-- тивности мембран эритроцитов и увеличение липидной фракции в зоне свободных жирных кислот сочетается с отсутствием микросфероцитоза, уменьшением диаметра и пониженной осмотической резистентности эритроцитов и повышенным числом ретикулоцитов, ставят диагноз латентной формы на- следственного сфероцитоза.

Пример 1. Больной 30 лет поступил в клинику с диагнозом наследственный сфероцитоз. Жалобы на общую слабость, чувство тяжести в левом подреберье, субфебрильную температуру. Болеет с детства.

Объективно: кожа и видимые слизистые желтушны, селезенка выступает из подреберья на 7 см,плотной консис- тенции, проекция желчного пузыря болезненна .

Анализ крови НЬ 94 г/л; эр. 2,8 «10 /л; цветной показатель 1; СОЭ 4 мм; лейк. 5,0-10 /л; тромб. 47%; ретик. 78%; базофильная сетчатость в. толстой капле +++; средний диаметр эритроцитов 7,0 мкм; осмотическая ре5

5

5 0

5

0

5

зистентность эритроцитов О,56-0,32% NaCl. Отмечается умеренный анизоци- тоз эритроцитов за счет насыщенных микро- и не большого количества мак- роцитов, небольшая полихромазия, встречаются овалоциты 5-8 в поле зрения, а также единичные слезовид- ные. Лейкоцитарная формула,%: пал. 6,0; сегм. 50,0; мои. 5,0; зоз. 1,0; лимф. 38,0.

Функциональные пробы печени: общий билирубин 46,5 мк мол/л, прямой 7,2 мк мол/л, свободный 39,3 мк мол/л, тимоловая проба 9,0, общий белок 7,2 г/л.

При специальном исследовании мембран эритроцитов обнаружено, что (Na -t-K ) АТФ-азная активность составляет 2,21 мМ/мг бч., липидная фракция в зоне свободных жирных кислоты визуально увеличена.

Больному произведена спленэктомия и холецистэктомия.

Анализ крови после операции: Нв 120,0 г/л; эр. 4,2 10 /л; цветной показатель 0,91; морфология эритроцитов не изменилась, но появились эритроциты с тельцем Жолли.

На основании указанных исследований мембран эритроцитов подтвержден диагноз наследственного сфероцитоза.

П р и м е р 2. Больной Б. 6 лет постудил в клинику с диагнозом врожденная гемолитическая анемия (предполагается микросфероцитоз). Жалобы на общую слабость, высокую те-мпературу, сонливость и беспокойность. Ребенок болеет с годовалого возраста.

Объективно: выраженная желтушность кожных прокровов и видимых-слизистых, на губах герпесная йыпь, селезенка выступает из подреберья на 7 см, печень - на 6 см.

Анализ крови: НЬ 90,0 г/л; эр. 2,8-10 /л, цветной показатель 0,93; СОЭ 22 мм; лейк. 6,810 /л; тромб. 230,4-Ю /л; ретик. 110% ;базофиль- ная сетчатость в толстой капле ++++; средний диаметр эритроцитов 7,0 мкм, осмотическая резистентность 0,56- 0,32 NaCl. Отмечается выраженный ани- зоцитоз за счет микро- и макроцитов, небольшой пойкилоцитоз, часть эритроцитов гипохромна, часть полихромато- фильна, встречаются овалоциты (20- 25 в поле зрения, в том числе узко- элипсоидные, единичные слезовидные, Лекйкоцитарная формула, %: пал. 11,0;

сегм. 38,0; мои. 3,0; эоз. 6,0; лимф. 42,0.

При цитологическом изучении мазка периферической крови эритроциты, содержащие Нв 10% . При инкубации крови с бриллиантовым крезиловым синим красителем внутриэритроцитарные включени нестабильного гемоглобина не обнаружены.

Функциональные лробы лечени: общий билирубин за счет непрямой реакции 25,2 мк мол/л; тимоловая проба 6; реакция сулемы 92%.

Моча и кал без изменения.

По показателям микроцитоза, мало- го диаметра и пониженной резистент- ности эритроцитов подозревается наследственный сфероцитоз. В результате специальных исследований мембран эритроцитов оказалось, что () АТФ-азная активность снижена (0,39 мМ/мг.б.ч.), липидная фракция в зоне свободньк жирных кислот визуально не увеличена, в связи с чем диагноз наследствеР ного сфероцитоза исключен.

Проведено лечение переливанием крови, витаминами B,,Bg, фолиевой кислотой.

Больной переведен в хирургическое отделение, где была произведена спленэктомия. Больной выписан с диагнозом: несфероцитарная гемолитическая анемия.

П р и м е р 3. Больной В. 60 лет.

Субъективно: жалоб нет.

Объективно: больной правильного телосложения, подкожная жировая клетчатка развита слабо, печень и селезенка не увеличены.

Анализ крови: Нв 155 г/л; эр.

10

4,910 /л, цветной показатель 0,95 СОЭ 5 мм; лейк. 5,2-10 /л; тромб. 54%; ретик. 5% , базофильная сетча- тость в толстой капле +. Отмечается небольшой анизоцитоз за счет единичных микро- и макроцитов. Лейкоцитарная формула,%: пал. 2,5; сегм. 59,5; мои. 3,5; эоз. 2,0; баз. 1,0; лимф. 31,5.

По всем показателям больной признан практически здоровым. Однако в связи с тем, что у его детей имеется точно установленный наследственный Сфероцитоз, бьити проведены специальные исследования мембран эритроцитов Оказалось, что () АТФ-азная активность мембран повышена и составляет 2,2 мМ/мг.б.ч. Липидные фракци в зоне свободных жирных кислот визуально увеличены.

В результате исследований больному поставлен диагноз латентной формы наследственного сфероцитоза.

П р и м е. р 4. Больной Г. 8 лет поступил в детское отделение в тоянии криза с жалобами на общую слабость, желтушность.

Объективно: обращает на себя внимание желтущность кожных покровов и видимых слизистых.

Анализ крови: Нв 93,0 г/л; эр. 2,7 1 О /л; цветной показатель 1 ,0, ретик. 270% . Отмечается склонность эритроцитов к мароцитозу, умере}П1ая полихромазия.

Предполагаемый диагноз: наследственный сфероцитоз. Проведено определение формы, диаметра и резистентнос ти эритроцитов. Оказалось, что мик- росфероцитоз эритроцитов отсутствует диаметр 7,5 мкм, резистентность 0,48 0,28. При проведении дополнительного специального изучения мембран эритроцитов оказалось, что (Na +К ) АТФ-азная активность в пределах нормы, ли- пидные фракции в зоне свободных жирных кислот визуально не увеличены. Диагноз наследственного сфероцитоза не подтвержден результар-1и исследований .

Больному проведено исследование активности фермента глюкозо-6-фосфат дегидрогеназы (Г-6-ФД), при этом оказалось, что активность фермента Г-6-ФД составила О мэ/гр Пв.

На основании этих данных поставлен диагноз: наследственная гемолитическая анемия, обусловленная дефицитом фермента Г-6-ФД.

Анализ крови: Нв 103 г/л; эр. 4,1 Ю /л.

Больной выписан в удовлетворительном состоянии.

Способ испытан в лабораториях биохимии, а также наследственных и приобретенных анемий на клинических и амбулаторных больных НИИ гематологии и переливания крови.

Способ обеспечивает 100%-ную точность диагностики заболевания, включая латентные формы, что позволяет своевременно провести целанаправлен- ное лечение, а также дает возможност правильно прогнозировать заболевани

513230836

в потомстве и проводить медико-гене-мы заболевания, дополнительно олредетическое консультирование.ляют (Na.+K) АФТ-азную активность

и липидный состав мембран эритроциФормула изобретениятов и при отсутствии уменьшения диа5метра и снижения осмотической резисСпособ диагностики наследственноготентности эритроцитов на фоне увелисфероцитоза путем определения формы,чения количества ретикулоцитов в содиаметра, осмотической резистентное-четании с повышением () АФТти эритроцитов и количества ретикуло-азной активности и увеличения липидцитов, отличающийся тем, Оной фракции в зоне свободных жирных

что, с целью повьппения точности спо-кислот относительно нормы диагностисоба за счет выявления латентной фор-руют латентную форму заболевания.

Изобретение относится к гематологии. Цель изобретения - повьппение точности способа. Проводят пробы на наличие наследственного сфероцитоза и затем определяют (Na +К ) АТФ-аз- ную активность и липидный состав мембран эритроцитов. При повышении (Na + К) АТФ-азной активности мембран эритроцитов и увеличении липидной фракции в зоне свободных жирных кислот в сочетании с отрицательными другими пробами на наследственный сфероцитоз диагностируют латентную форму этого заболевания. Способ обеспечивает проведение медико-генетических консультаций.