Способ определения активности фагоцитов крови Советский патент 1987 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения активности фагоцитоза при диагностике обширной группы заболеваний (аутоиммунных , инфекционньгх, наследственных и т.д.),

Цель изобретения - повышение точности определения.

Способ осуществляется следующим образом.

Цельную кровь в количестве 3 мл, помещенную в пластмассовую пробирку диаметром 12 мм, обрабатывают ультразвуком в импульсном режиме (датчик с резонансной частотой 2,64 ± 5% мГц и диаметром 10 мм) в течение 5 мин, после чего производят постановку НСТ-теста путем смешения равных количеств (1,0 мл) обработанной крови и 0,1%-ного раствора НСТ в забуфе- ренном фосфатным буфером физиологическом растворе (рН 7,2) с последующей инкубацией смеси в термостате при 37 С 15 мин и 15 мин при комнат- ной температуре (20-22°С). Далее из смеси кровь - нет делают мазки, которые фиксируют метиловым спиртом 3 мин и окрашивают смесью пиронин - метиловый зеленый по Папенгейму. Производят подсчет (%) формазанположи- тельных клеток (увел.хЮОО).

Пример 1. Больная М-я С. В., 21 г., история болезни № 676/48 за 1984 г. Диагноз: системная красная вюлчанка, активная фаза,, II степень а1ктивности, подострое течение, люпус- нефрит, полиартралгия, миокардиодист- рофия.

При определении активности фагоитоза тестом с нитросиним тетразо- ием без стимуляции УЗ получены реультаты: 8% формазанположительных леток (в группе доноров - 9,0 + 1,2%). Таким образом, существенных тклонений от нормы со стороны даного показателя активности фагоцитоСоставитель В, Фролова Редактор М. Петрова Техред И.Попович .Корректор Л.Патай

Заказ 3382/40 Тираж 776Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д, 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

0

5

0

5

0

5

0

5

за не обнаружено. При стим-уляции фагоцитирующих клеток УЗ (интенсивность 7.мВа/см, резонансная частота 2,5 мГц, врейя воздействия 5 мин) у данной больной получен результат - 16% формазанположительных клеток, т.е. имеется значительное снижение по сравнению с результатамИэ полученным в норме (26,0 + 2,б1%)о

Таким образом, чувствительность реакции в выявлении.нарушения актив- - ности фагоцитоза существенно возрастает при стимуляции ультразвуком.

П р и м е р 2о Определение активности фагоцитоза со стимуляцией УЗ (с указанными ранее параметрами) .проведено у донора Ц-ко в 10 параллель- (Ных пробах. Результаты исследования; 25, 24, 21, 22, 24, 25, 21, 21, 23, 22% формазанположительных клеток. Данные статистической обработки; М .+ гп 22,7 + 0,45 ё 1,7; R 4(21- -25), Как свидетельствуют приведенные данные, воспроизводимость реакции достаточно велика, в особенности в сравнении с другими способами стимуляции фагоцитоза.

Точность способа по сравнению с известньпу возрастает примерно в 2-3 раза. Предлагаемый способ может быть использован в клинической практике и при скрининг-обследованиях.

Формула изобретения

Способ определения активности фагоцитов крови путем их стимуляции и оценки фагоцитоза в присутствии нит- росинего тетразолия с последующим подсчетом клеток,, содержащих нитро- синий формазан, отличающий- с я тем, что, с целью повышения точности, стимуляцию осуществляют путем обработки крови ультразвуком интенсивностью 6,0-8,0 Вт/см с резонансной частотой 2,64+5% мГц,

Изобретение относится к иммунологии. Цель изобретения - повышение точности определения. Цельную кровь обрабатывают ультразвуком в импульсном режиме, смешивают ее с раствором нитросинего тетразолия и инкубируют. Делают мазки, фиксируют их, окрашивают и подсчитьгеают формазанположи- тельные клетки. Чувствительность реакции в выявлении нарушения активности фагоцитоза существенно возрастает при стимуляции- ультразвуком. ОО: 1C О) UD 00