Штамм дрожжей LеUсоSроRIDIUм GеLIDUм-продуцент липидов с высоким содержанием ненасыщенных жирных кислот Советский патент 1987 года по МПК C12N1/16 C12P7/64 

1335567

Изобретение относится к микробиологической промышленности и представляет собой новый штаммiдрожжей с высоким содержанием липидов высокой с-гепени ненасыщениости, способных по своему составу служить заменителем растительного масла, используемого, в частности, для технических целей.

Цель изобретения - получение штамма, обладающего при росте на этаноле высоким содержанием липидов с высокой степенью ненасьпценности.

Поставленная цель достигается селекцией нового штамма дрожжей, полученного в результате многоступенчатого отбора высокопродуктивных вариантов в условиях непрерывного культивирования на среде с этанолом.

до-споры размером (5,4-10,8)х(6,5- 13,5) мкм.

Физиологические признаки. Ассимилирует глюкозу, сахарозу, галактозу, )

L-арабинозу, ксилозу, раффинозу, инозит, рамнозу, адонит, сорбит, маннит сорбозу, рибит, этанол. Сбраживает сахарозу, глюкозу, мальтозу. Азотно- 1Q кислый калий ассимилирует, разжижает желатину, Уреазная активность обнаружена. На безвитаминной среде не растет. Культура способна расти при 0-20°С и рН 4,0-6,0. Оптимальные ус15

ловия выращивания при 13-15 С и. рН 5,5.

Предлагаемый штамм способен расти на стандартных питательных средах, таких как среда 9М, содержащих исШтамм дрожжей Leucosporidium geli- 20 точники азота, фосфора в виде солей,

а также источник углерода в виде синтезированного этанола. Культура синтезирует биомассу, содержащую до 30% белка и до 60% липидов. 5 Аминокислотный состав белка, %: аргинин 2,1; гистидин 1,1; лизин 4,9; аспарагиновая кислота 8,0; глю- таминовая кислота 11,4; треонин 4,1; серин 4,7; глицин 5,9; аланин 5,3; -jg прелин 2,3; дистин 0,9; метионин 1,2; валик 6,2; изолейцин 3,8; лейцин 6,1; тирозин 2,6; фенилаланин 3.1.

Жирно-кислотный состав липидов, %;

dura выделен из дерново-подзолистых почв. Почвенную суспензию высевают на сусло-агар с молочной кислотой (4 мг/мл), инкубируют в холодильнике при 5°С 30 сут и выделяют развившийся тип колонии дрожжей. Затем про- веряют способность расти на среде с этанолом. В результате отбирают штамм облигатно-психрофильных дрожжей, который идентифицирован по определи- ,телю leasts, а taxonomic -study ed by Lodder 1970, как относящийся к виду Leucosporidium gelidum.

Полученный штамм Leucosporidium gelidum депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов под номером ВКПМ Y-527. Штамм хранится также в коллекции микроорганизмов института ВНИИ синтезбелок под номером ВСБ-931, Штамм непатогенен.

35

н; о

16: 1 18.-1

следы; С . о следы;

4,9; С 30,7; С

16; 2 18-2

1, С,8,, 48,5; С

GUIO 5,0; 0.,8;

Q 7

18 , 3 ° I

Сумма ненасыщенных кислот 94,2 мас,%. Теоретическое йодное число 161,5.

40 Таким образом, предлагаемый штамм отличается от известного размером и формой клеток, способностью, ассимилируя этанол, расти при 15 с и рн5,5, образовывать биомассу с высоким соМорфологические признаки. Клетки при 12 С на жидком сусле, овальные, единичные или парами. Размер клеток (2,2-5,9)х(4,8-9,2) мкм. Пленки и кольца не образуют, образуют осадок, через месяц - осадок и толстые мице- лиальные кольца.

Культуральные признаки. На солодовом сусло-агаре размер клеток (2,2- 5,9)х(3,8-13,5) мкм. Рост мягкий, полублестящий, гладкий, периферия сильно ,№1делиальная и морщинистая. Мицелий истинный, разветвленный с регулярно встречающимися септами на концах, много терминальных и интерка- лярных клеток, единичных, парами, короткими цепочками. Образует хламидо-споры размером (5,4-10,8)х(6,5- 13,5) мкм.

Физиологические признаки. Ассимилирует глюкозу, сахарозу, галактозу,

L-арабинозу, ксилозу, раффинозу, инозит, рамнозу, адонит, сорбит, маннит сорбозу, рибит, этанол. Сбраживает сахарозу, глюкозу, мальтозу. Азотно- кислый калий ассимилирует, разжижает желатину, Уреазная активность обнаружена. На безвитаминной среде не растет. Культура способна расти при 0-20°С и рН 4,0-6,0. Оптимальные ус

ловия выращивания при 13-15 С и. рН 5,5.

Предлагаемый штамм способен расти на стандартных питательных средах, таких как среда 9М, содержащих ис5

н; о

16: 1 18.-1

следы; С . о следы;

4,9; С 30,7; С

16; 2 18-2

1, С,8,, 48,5; С

GUIO 5,0; 0.,8;

Q 7

18 , 3 ° I

Сумма ненасыщенных кислот 94,2 мас,%. Теоретическое йодное число 161,5.

40 Таким образом, предлагаемый штамм отличается от известного размером и формой клеток, способностью, ассимилируя этанол, расти при 15 с и рн5,5 образовывать биомассу с высоким со45 держанием ненасыщенных жирных кислот. П р и м е р 1 . Штамм Leucospori- dium gelidum ВКПМ Y-527 выращивают в .колбах 750 мл на круговой качалке со скоростью вращения 200 об/мин при ис50 пользовании питательной среды состава, г/л: этанол 7,8; 7,0; 6,8; 2,0; MgSO 0,7. Дрожжевой экстракт 0,5. Процесс ведут при температуре культивирования

55l5°C и рН 5,5. Выход биомассы 80 мае.% при содержании белка до 15 мас.% и липидов до 75%.

Экстрагированные известным способом липиды имеют в своем составе

(% к липидам): фосфолипидов 6,5; моноглицеридов 0,31; диглицеридов 4,0j многоатомных спиртов 0,4; стё- ринов 7,0; свободных жирных кислот 20,1; триглицеридов 58,0; восков . 0,7; эфиров-стеринов 3,0; теоретическое йодное число 161,5 ед.

Жирно-кислотный состав: слёx7HjO 0,78; ZnS04x7H20 0,44; MnSO x5HjO 0,04; НдРОфцони, 12 мл; акт. и 0,5 г/л (0,05 мас.%). В качестве ис точника углерода используют этанол количестве 1,5 об.%. Коэффициент ск рости протока Д 0,05 при рН 5,5 и Т - 15°С. При этом выход биомассы составляет до 70 мас.%, содержание

ды; ,(3 следы; С.., 5,0; С. 4,9; 10 белка 30 мас,%, содержание липидов

С,б:2 1,4; Cig.o 0,8; С fe.i 48,5; C,g.,,

«м

30,7;

8,7. Сумма ненасыщенных кислот 94,2 мас,%.

Пример 2, Непрерывное выращивание штамма Ьеисозрог1д1шп geli- dum осуществляют в ферментере емкостью 1 л в составе питательной средь, г/л: КС1 12,9; MgS04x7HiO 7,7;

15

60 мас,%, содержащих 90% ненасыщенных жирнъЬс кислот.

Формула изобретени

Штамм дрожжей Leucosporidium ge- lidum ВКПМ Y-527 - продуцент липидов с высоким содержанием ненасыщен ных жирных кислот.

x7HjO 0,78; ZnS04x7H20 0,44; MnSO к x5HjO 0,04; НдРОфцони, 12 мл; акт. ил 0,5 г/л (0,05 мас.%). В качестве ис- точника углерода используют этанол в количестве 1,5 об.%. Коэффициент скорости протока Д 0,05 при рН 5,5 и Т - 15°С. При этом выход биомассы составляет до 70 мас.%, содержание

60 мас,%, содержащих 90% ненасыщенных жирнъЬс кислот.

Формула изобретения

Штамм дрожжей Leucosporidium ge- lidum ВКПМ Y-527 - продуцент липидов с высоким содержанием ненасыщенных жирных кислот.

Изобретение относится к микробиологической промьппленности и представляет собой новый штамм дрожжей Leucosporidium gelidum ВКПМ Y-527 - продуцент ЛИПИДОВ с высоким содержанием ненасьщенных жирных кислот. Предлагаемый шт амм при вырапщвании на аэрируемой питательной среде, содержащей непищевое сырье - этанол в качестве источника углерода, а также источники азота, фосфора, минеральные соли и микроэлементы, позволяет получить биомассу, содержащую до 60% ЛИПИДОВ, в состав которых входит 90% (к сумме кислот) ненасыщенных жирных кислот, йодное число этих липидов