Способ консервирования спермы человека Советский патент 1987 года по МПК A01N1/00 

1 . . 1 Изобретение относится к медицине и может быть использовано при низкотемпературном консервировании спермы

человека с целью искусственной инсеминации.

Целью изобретения является повышение выживаемости спермы человека.

Способ осуществляют следующим образом.

Сперму помещают на 25-30 мин в термостат (37°С) для разжижения. После этого к сперме в соотношении 1:1 добавляют консервирующую среду, содержащую следующие компоненты, мас.% Глюкоза3,7-А,3

Натрий лимоннокислый1,1-1,4 Желток куриного

яйца24,0-30,0

20%-ный раствор холинахлорида 1,6-2,4 Глицерин .4,6-6

Вода дистиллированнаяОстальноеПосле 45-60 мин эквилибрации при

комнатной температуре сперму разливают в подключичные катетеры.

Замораживание осуществляют сначала со скоростью 0,5 град/мин до 2 - 5 С, а затем со скоростью 90 - 100 град/мин до температуры от -180 до -190°С, после чего переносят в жидкий азот для хранения. Размораживание осуществляют в водяной бане при 40°С в течение 5-7 с.

Пример 1. Для опыта взяли сперму со следующими показателями: объем эякулята 2,4 мл, общее чество сперматозоидов 136 млн в 1 мл, из Них активно подвижных 65%, подвижных форм 71%, нормальных форм 80% лейкоцитов 1-2 в поле зрения, простатические тельца изредка, вязкость нормальная.

К 2 мл спермы после ее разжижения добавили 2 мл среды, содержащей,мас. Глюкоза4,0

Натрий лимоннокислый1,2 Желток куриного яйца 26,0 Глицерин 5,0 20%-ный раствор холинахлорида 2,О Вода дистиллированная Остальное Через 45 мин после этого спермой заполнили подключичные катетеры диаметром 1,4 мм по 0,3 мл и заморозили

122

ее сначала со скоростью 1 град/мин до , а затем со скоростью 90 град/мин до -180°С, после чего образцы перенесли для хранения в жидкий азот. Размораживание осуществляли через 3 недели хранения в водяной бане при 40°С в течение 5 с.

Данные сперматограммы: рН 7,4, общее количество спермиев в 1 мл 62 млн подвижных спермиев 55%, активно подвижных 43%, спермиев нормальной формы 72%.

Пример 2. Для опыта взяли 2 пробы спермы по 2 мл и добавили к ней по 2 мл среды, содержащей,мас.%: Глюкоза4,0

Натрий лимоннокислый1,2 Желток куриного яйца 26,0 Глицерин 5,0 20%-ный раствор

холинахлоридаОстальное

После расфасовки спермы по 0,3 мл в подключичные катетеры ее заморозили: сначала обе пробы заморозили со скоростью 1 град/мин до +5°С, а затем одну пробу замораживали со скоростью 90 град/мин, другую - со скоростью 100 град/мин. После того как обе пробы заморозили до -180°С, их перенесли для хранения в жидкий азот Через три недели разморозили в водяной бане. При этом получены следующие результаты:

Подвижность спёр- мов после размораживания, %

90

48,81+1,48

J00 46,13+3,42

Приведенные примеры свидетельствуют о том, что применение глицерина в концентрации 4,6-6% и ведение замораживания на II этапе со скоростью 90-100 град/мин способствует повыше - нию выживаемости спермы после размораживания, что является весьма существенным для последующей инсеминации.

Формула изобретения Способ консервирования спермы человека путем двуступенчатого замораживания до -180 -190 С в криокон31355212.

серванте, содержащем глицерин, соно-цитратном консерванте, концентскоростью замораживания на первомрация глицерина в котором составляет

этапе 0,5-1,0 град/мин до температу-4,6-6%, а отношение объема последнеры не выше +5°С, отличаю-го к объему замораживаемой спермы

щ и и с я тем, что, с целью повы-составляет 1:1, при этом замораживашения выживаемости спермы, заморажи-ние на втором этапе ведут со скование осуществляют в глюкозо-желточ-ростью, 90-100 град/мин.

Изобретение относится к медицине, предназначено для низкотемпературного консервирования спермы человека для искусственной инсеминации. Цель изобретения - повышение выживаемости спермы человека. Для этого сперму помещают на.25-30 мин в термостат () для разжижения. Затем к сперме добавляют в соотношении 1:1 консервирукицую среду со следующими компонентами, мае. %: глюкоза 3,7- 4,3; натрий лимоннокислый 1,1-1,4 желток куриного яйца 24,0-30,0; 20%- , ный р-р холннахлорида 1,6-2,4; пш- церин 4,6-6,0; вода дистиллированная - остальное. Затем сперму разливают в подключичные катетеры после 45-60 мин эквшшбрации при комнатной температуре. Замораживают с начальной скоростью 0,5 град/мин до +2 - +5°С, затем 90-100 град/мин до температуры от -180 до , переносят в жидкий азот для хранения. 1 табл. (Л