Способ диагностики активного воспалительного процесса при урологических заболеваниях Советский патент 1987 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клинической иммунологии для экспресс-диагностики .ния активного воспалительного процесса.

Целью изобретения является выявление воспалительного процесса на доклинической стадии за счет определения фагоцитарной активности ранних нейтро филов.

Способ осуществляется следующим образом.

У больного берут кровь, выделяют субпопуляцию ранних нейтрофилов, при этом разделение клеток крови пр.оизво- дят наслаиванием цельной крови на двойной градиент фиколл-уротраста с плотностью 1,072-1,077 г/мл и 1,092-1,099 г/мл, центрифугированием взвеси клеток при 0-4 С со скоростью 1000-1500 об./мин в течение 0-15ми}. Получают две чистые популяции клеток: лимфоп,итарную и нейтрофильную. Соединяют 0,1 мл (310 в 1 мл) нейтрофилов с 0,1 мл 1 млрд. взвеси бактерий (штамп Lepin золотистого стафилококка Смесь инкубируют в холодильнике при 0-Д С. в течение 15-20 мин, дополнительно перемешивают через 7-10 мин. Делают мазки на стекле, сушат, фиксируют метанолом 3-5 мин, красят, азур- эозином 3-5 мин.

В мазках просчитывают 50-100 ней- .трофилой, вычисляя из них процент клеток с захваченными микробами (% фа- гоцитоза), фагоцитарный индекс (ФИ) - среднее число фагоцитированных бактерий на клетку, абсолютное число фагоцитирующих нейтрофилов в 1 мкл, абсо- лютный фагоцитарный показатель (АФП) абсолютное число поглощенных бактерий в 1 мкл.

Определяют содержание лейкоцитов в ,1 мкм (L), а также подсчитывают процентное содержание нейтрофилов (1). и ранних Е-РОН (-а) среди всех лейкоцитов в мазке крови. Зная процентное содержание, вычисляют их абсолютное содержание в 1 мкл крови (N и м)

.

Гоо

М

N а

Too

Подсчитывают процент фагоцитирующих клеток на 50-100 нейтрофилов в препарате, т.е. относительное содержание фагоцитирующих клеток (б).

Абсолютное содержание фагоцитирующих нейтрофилов (Р) вычисляют по формуле

.. б . М . J./

100

где б - процент фагоцитирующих нейтрофилов в препарате; М - абсолютное количество ранних Е-РОН (в 1 мкл периферической крови).

Зная количество поглощенных бактерий (б) всеми клетками (а), вычисля15

ют ФИ .

а

АФП ФИ.Р.

Смесь А содержит фиколл 11,2 г; уротраст 60% 20 мл; дистиллированную воду 100 мл. Плотность раствора 1 ,092-1 ,099 г/мл.

Смесь В содержит фиколл 7,2 г; уротраст 60% 20 мл; дистиллированную воду 100 мл. Плотность раствора 1,072-1,077 г/мл. Аналоги: урографин, верографин.

Пример 1. Содержание лейкоцитов в 1 мкл крови 5I50,,процентное содержание нейтрофилов в формуле крови 56. Подставив в формулу цифровые значения, получают

N

100

2884 в 1 мкл.

В иммерсионной системе микроскопа в 6-7 разных полях препарата-1 получено 30% ранних (активных) розетко- образующих нейтрофилов, подставив в формулу цифровые значения, получают

М

865,2 в 1 мкл.

100

В иммерсионной системе микроскопа. в препарате-2 получено 47% фагоцитирующих нейтрофилов. Подставив в формулу цифровые значения, получают

, 100

Р

406,6 в 1 мкл.

Количество поглощенных бактерий 207, следовательно

ФИ

207 46

4,5.

АФП 4,5 406,6 1829,7 в 1 мкл.

В примере 1 определяли содержание ранних Е-розеткообразующих нейтрофилов (Е-РОНР) и показатели, характеризующие фагоцитарную активность данной субпопуляции клеток у практически здорового человека.

Пример 2. Больная С. 47 лет Поступила с жалобами на наличие свища в левой поясничной области, тупые боли, температура тела ЗЭ. с озно- бон.

По данным экскреторной урографии функция почек сохранена. По данным радиоизотопной ренографии снижение очистительной способности почек спра- ва на 42%, слева на 64%.

Иммунологические исследования: содержание ранних Е-РОН 5840 в 1 мкл; фагоцитирующих ранних Е-РОН 5787,4 в 1 мкл (99,1%); ФИ П ,5; АФП 66555,1 в 1 мкл. Произведено иссечение свища и назначена антибактериальная и стимулирующая терапия.

У больной диагностирована атака пиелонефрита справа.

Иммунологические исследования: содержание ранних Е-РОН 1824,5 в 1 мкл (45%) ; фагоцитирующих ранних Е-РОН 939,6 в 1 мкл (51,5%); ФИ 6,3; АФП 5919,5 в ,1 мкл.

Таким образом, иммунологические показатели свидетельствовали об остром воспалительном процессе, иссечение свища и назначение мощной антибактериальной и стимулирующей терапии сопровождалось положительной динамикой: уменьшением фагоцитирующих ранних Е-РОН в 6 раз; ФИ с 11,5 до 6,3; АФП с 66555,1 в 1 мкл до 5919,5 В 1 мкл.

в последующем показатели все нормализовались и больная в удовлетворительном состоянии выписана домой.

Пример 3. Больная К., 41 год Поступила с жалобами на тупые боли по ходу левого мочеточника, иррадиация в левьй пах. Симптом Пастернадского отрицательный с обеих сторон.

На уретропиелограмме определяется негативный камень левой почки. Болеет с 1980 г. Анализы крови в норме. Анализ мочи : белок 0,165; лейкоциты 10-15 в поле зрения; соли мочевой кислоты в большом количестве. Анализ мочи по Неч1-шоренко: лейкоциты 750; эритроциты отсутствуют.

(

У больной острый левосторонний пиелонефрит. Произведена экстренная пиелолитотомия, нефростомия, интубация мочеточника. Камень удален пиело- томическим и нефротомическим разрезом Кровотечение во время операции умеренное. Операция средней травматич- ности.

Q

5

0

5

о

5

5

0

5

0

Иммунологические исследования: Е-РОИР 1320 в 1 мкл (50%); содержание фагоцитирующих Е-РОН 620,6 в 1 мкл (47%); ьи 4,1; АФП 2543,6 в 1- мкл; лейкоциты 4000 в 1 мкл, палоч- коядерные нейтрофилы 40 в 1 мкл (1%); сегментоядерные нейтрофилы 2640 в 1 мкл (65%) ; лимфоциты 1040 в 1 .мкл (26%) ; моноциты 320 в 1 мкл (8%)

Состояние больной удовлетворительное. Жалоб нет. Повязка , нефро- стома функционирует хорошо. Температура тела 36,8-36,7 С.

Иммунологические исследования: Е-РОНР 3916 в 1 мкл (80%); содержание фагоцитирующих ранних Е-РОН 1280,5 в 1 мкл (32,7%); ФИ 5,6; АФП 7170,8 в 1 мкл; лейкоциты 6800 в 1 мкл; сегментоядерные нейтрофилы 4895 в 1 мкл (72%) ; лимфоциты 1020 в 1 мкл (15%); моноциты 884 в 1 мкл (13%).

Иммунологические исследования: Е-РОНР 2920,3 в 1 мкл (95%); фагоцитирующих ранних Е-РОН 2777,2 в 1 мкл (95,1%); ФИ 9,6; АФП 26661,1 в 1 мкл; лейкоциты 5300 в 1 мкл, палочкоядер- ные нейтрофилы 106 в 1 мкл (2%); сегментоядерные нейтрофилы 3074 в 1 мкл (56%); лимфоциты 1590 в 1 мкл (30%); моноциты 583 в 1 мкл (П%).

Состояние больной расценено как атака пиелонефрита в оперированной почке. 20.11 отошли 2 мелких конкремента (0,1 0,2 и 0,2-: 0,2).

Атака пиелонефрита купирована1 Состояние больной удовлетворительное. Температура тела нормализовалась. Катетер функционирует хорошо. Симптом Пастернацкого отрицательный с обеих сторон. Анализ крови в пределах нормы.

Иммунологические исследования: содержание Е-РОНР 714 в 1 мкл (25%); фагоцитирующих Е-РОН 313,4 в 1 мкл; 43,9 в 1 мкл, ФИ 4,7; АФП 1472,9 в 1 мкл; лейкоциты 4200 в 1 мкл; сег- ментоядерные нейтрофилы 2856 в 1 мкл (68%) ; лимфоциты 1050 в 1 мкл (25%); моноциты 210-в 1 мкл (5%) - Больная выписана на амбулаторное до- .лечивание.

Таким образом, за 10 дней до клинических проявлений атаки пиелонефрита оперированной почки уменьшается процентное содержание фагоцитирующих ранних Е-РОН, АФП повьш ается в 3 ра-. за. На высоте воспаления процент фагоцитирующих ранних Е-РОН увеличивается с 32,7% до 95%; ФИ с 5,6 до 9,6| АФП с 7170,8 в 1мкл до 26,661 в1 мкл.

В результате интенсивной фагоцитарной активности атака пиелонефрита 26.1 купирована. Уменьшение процента фагоцитирующих ранних Е-РОН до клинических проявлений, по-видимому, обусловлено блокадой рецепторов или гибелью этого пула клеток.

Пример 4. Больной С., 53 лет госпитализирован в урологическую больницу .

Иммунологические показатели: Е-РОНР 2010,6 в 1 мкл (47%); количе-. ство фагоцитируюищх ранних Е-РОН 282,4 в 1 мкл (14%); фагоцитарный индекс (ФИ) 3,1; абсолютный фагоцитарный показатель 872,3 в 1 мкл.

Лейкоциты 6200 в 1 мкл,. палочко- яде1зные нейтрофилы 124 в 1 мкл (2%); сегментоядерные нейтрофилы 4030 в 1 мкл (65%); эозинофилы 124 в I мкл (2%); лимфоциты 1674 в 1 мкл (27%); моноциты 248 в 1 мкл (4%)

Болен в течение 2 лет. Получал лечение по поводу хронического простатита с положительным эффектом. Жалобы на боли по ходу правой паховой складки, учащенное почеиспускание вялой

струей, жжения, снижение потенции. Болезненность при пальпации правой подвздошной области. Правый- придаток болезненный при пальпации. Простата склерозировадная, плотная, туго эластичной консистенции. Функция почек

Одноэтапная аденомэктомия . Состояние больного соответствует тяжести перенесенной операции 35 I

9.07.84. Иммунологические исследования: Е-РОНР 4857,1 в I мкл (83%); количество фагоцитируюпдах ранних своевременная с обеих сторон. Чашечно- Е-РОН 1262,8 в 1 мкл (26%); ФИ 2jO; лоханочная система не расширена. На 40 АФП 2525,6 в 1 мкл. нисходящей цистограмме контуры моче- По клиническим данным у больного вого пузыря ровные, дефектов накопле- острый правосторонний эпидидимит, ния не определяется. Радиоизотопная температура тела 38°С. ренография. Снижение секреторной функ- Имг-гунологические исследования: ции слева на 19%. Справа дефицита нет.45 Е-РОНР 5179 в 1 мкл (54%); количест- Эвакуация препарата удовлетворительная, во фагоцнтируюгшх Е-РОНР - 517,9 в Анализы крови и мочи без особенностей. Диагноз: у больного аденома простаты Т степени, остаточные явления хро1 мкл (10%); ФИ 2,8; АФП 1450,8 в 1 мкл.

Лейкоциты 10900 в 1 мкл, палочко- .

нического простатита.

Таким образом, у больного содержание ранних Е-РОН в периферической крови увеличено в 2 раза, однако, от- носительное и абсолютное содержание фагоцитирующих Е-РОН и АФП на 50% ни- же, чем в норме. Фи также достоверно ниже. Снижение этих показателей является результатом хронического воспалительного процесса с относительным

10

0

5

0

эффектом в лечении. Больному назначено консервативное лечение.

Пример 5. Больной С. , 84 го да. Поступил в урологическую клинику. Жалобы на учащенное мочеиспускание, жажду, сухость во рту. Симптом Пас- тернацкого слева и справа отрицательный. Простата увеличена в 2,5 раза с четкими контурами, безболезненна, бороздка не выражена.

Урограмма. На обзорном снимке теней конкрементов нет. Функция почки удовлетворительная, нарушения пассажа мочи и деформации чашечно- лоханочной системы нет. Анализы крови и мочи без особенностей.

Для восстановления нормального пассажа по нижним мочевым путям показано оперативное лечение - аденомэк- томия. Диагноз: аденома простаты, хронический пиелонефрит.

Иммунологические исследования: лейкоциты 5700 в 1. мкл, палочкоядер- 5 Hbie нейтрофилы 171 в 1 мкл (3%); сегментоядерные нейтрофилы 3135 в 1 мкл (55%); эозинофилы 285 в 1 мкл (5%); лимфоциты 1083 в 1 мкл (19%); моно- питы 456 в I мкл (8%); Е-РОНР 969 в 1 мкл (17%); содержание фагоцитирующих Е-РОН. 416,6 в 1 мкл (43%); ФИ 4,1; АФП 1708,0 в 1 мкл.

Одноэтапная аденомэктомия . Состояние больного соответствует тяжести перенесенной операции 5 I

9.07.84. Иммунологические исследования: Е-РОНР 4857,1 в I мкл (83%); количество фагоцитируюпдах ранних Е-РОН 1262,8 в 1 мкл (26%); ФИ 2jO; АФП 2525,6 в 1 мкл. По клиническим данным у больного острый правосторонний эпидидимит, температура тела 38°С. Имг-гунологические исследования: Е-РОНР 5179 в 1 мкл (54%); количест- во фагоцнтируюгшх Е-РОНР - 517,9 в

1 мкл (10%); ФИ 2,8; АФП 1450,8 в 1 мкл.

Лейкоциты 10900 в 1 мкл, палочко- .

ядерные нейтрофилы 6546 в I мкл (б%); сегментоядерные нейтрофилы 8829 в 1 мкл (81%); эозинофилы 109 в 1 мкл (1%); лимфоциты 1199 в 1 мкл ( %); моноциты 109 в 1 мкл (1%). .

Рекомендована стимулирующая терапия. У больного состояние по клиническим и лаб орато-рным данным с тенденцией к улучшению. Однако, рана 4 3 2 в области машонки с некротическим дном. Рана 4 3 - 2 вяло гранулирует. Проведен курс стимулирующей I терапии декарисом.

Иммунологические исследования: г-РОНР 4783,2 в 1 мкл (73%), содержание фагоцитирующих ранних Е-РОН 2965,5 в 1 мкл (62%); ФИ 4,3; АФП 12757,6 в 1 мкл.

Лейкоциты 9100 в 1 мкл, палочко- ядерньш нейтрофилы 546 в 1 мкл (6%); сегментоядерные нейтрофилы 6006 в 1 мкл (66%); эозинофилы 819 в 1 мкл (9%); лимфоциты 1274 в мкл (14%); моноциты 546 в 1 мкл 6% .

Состояние удовлетворительное, свищ закрывается, рана активно гранулирует 2 0,8 1,5.

Иммунологические исследования: Е-РОНР 1560 в 1 14КЛ (13%); содержание фагоцитирующих ранних Е-РОН 639,6 в 1 мкл (41%); ФИ 4,3; АФП 2750,2 в 1 мкл.

Лейкоциты 12000 в 1 мкл; палочко- ядерные нейтрофилы 120 в 1 мкл (1%); сегментоядерные нейтрофилы 6600 в 1 мкл (55%); эозинофилы 360 в 1 мкл (3%); лимфоциты 3600 в 1 мкл (30%); моноциты 1320 в 1 мкл (11%).

Свищ над лоном закрылся, рана в машонке зажила. Больной вьшисан домой.

Составитель Н. Хрусталева Редактор Т. Парфенова Техред Л.Сердюкова Корректор А.Обруча э

615-1/48

Тираж 776Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская.наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г.Ужгород, ул.Проектная, 4

Таким образом у больного в результате осложнения - острого правостороннего эпидидимита потребовавшего

гемикострации и длительно незаживаю /

раны 1несмотря на высокое содержание ранних Е-РОН) имело место подавление их абсолютного и относительного числа фагоцитирующих клеток и

ФИ, что потребовало проведения курса стимулирующей терапии. В результате лечения увеличилось абсолютное и относительное содержание фагоцитирую- пдах ранних Е-РОН в 5,5 раза и ФИ

2 раза, АФП увеличилось в 8 раз.

В результате активного фагоцитоза рана стала интенсивно гранулировать, нормализовались клинические и иммунологические показатели и больной в

удовлетворительном состоянии вьшисан домой.

Нормализация формулы крови, данные бактериологических исследований

и положительная клиническая динамика не всегда являются абсолютными критериями излечения. Содержание показателей, характеризующих функцию ранних Е-РОН в периферической крови

больного,указывает на неполное излечение, что подтверждалось обострением воспадштельного процесса.