@ -Никотиноиламинокислоты, обладающие противогипоксической и антиамнестической активностью Советский патент 1988 года по МПК C07D213/82 A61K31/455 A61P7/00 A61P25/28 

при R - DL-NH-CH-(CH,2)j,COOH к - ОН;

СООН при R - Ш(СН,)5СООН

R - ОН,

обладакщие противогипоксической и

R - ОН,

антиамнестической активностью.

00

а

00

со

1-13683142

Изобретение относится к новым к N-никотиноиламинокислотам общей химическим соединениям, конкретно формулы

R yg -COR

N-никотиноиламинокислоты общей формулы TSf , . R - ОН, Вг; S 1(Л

при R L-NH-CH-(CH2)aCOOH R ОН (1а), Вг (16);

СООН при к DL-NH-CH-(CHj)COOH R ОН (1в) ;

СООН при R ЫН(СН)зСООН R ОН (1г),

обладающим противогипоксической и антиамнестической активностью.

Указанные свойства позволяют преполагать возможность применения их в медицине для профилактической защиты людей от последствий кислородной недостаточности и как средство улучшающее процессы памяти при ее ра;зличных нарушениях..

Известно средство пирацетам (но- отропил), который повьшает умственную работоспособность человека и животных, оказывает противогипокси- ческий эффект СП, 2.

Однако действие пирацетама проявляется в высоких дозах (300- 600 мг/кг) и наступает после длительного курсового лечения.

Наиболее близким к изобретению является Н-никотиноил-ВЬ-глутами- новая кислота, обладающая фибрино- литической активностью 3.

Целью изобретения является поиск веществ, обладающих противогипоксической и антиамнестической активностью в ряду никотиноиламинокислот.

Поставленная цель достигается N-никотиноиламинокислотами вышеуказанной формулы, обладающими противогипоксической и антиамнестической активностью.

Названные соединения при действии глутаминовой кислоты или гамма-аминомасляной кислоты на азид 5-замещенной никотиновой кислоты в присутствии едкого натра в водной среде при 20-23 С.

Соединения представляют собой белые кристаллические вещества с т, пл. 200 С, растворимые в воде и спирте.

0

5

0

5

0

5

0

5

Предлагаемые соединения оказывают выраженный противогипоксический и антиамнестический зффект с минимальным побочным действием, В опытах на мышах и крысах показано, что соединения обладают способностью устранять неблагоприятное действие на память воздействий, вызывающих стирание памятного следа. Другим проявлением действия испытуемых соединений является защита животных от гибели при гипоксии различного ге- неза.

Пример 1. N-Никотиноиламино- кислоты.

К раствору 0,01 М L-глутаминовой или DL-глутаминовой кислоты или гамма-аминомасляной кислоты в 100 мл 0,1 н. NaOH добавляют 0,01 М азида 5-замещенной никотиновой кислоты, Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч, затем раствор упаривают на 2/3 объема и нейтрализуют конц. НС1 до рН 5. Выпавший продукт перекристаллизовы- вают из воды с добавлением угля. Получают аминокислотные производные 5-замещенной никотиновой кислоты.

Физико-химические данные и результаты анализов приведены в табл. 1.

Пример 2. Изучение противо- гипоксического действия.

Противогипоксическую активность соединений изучают на 3-х моделях гипоксии: гиперкапнической, гипобари- ческой и гемической, обычно применяемых для оценки антигипоксантов.

Исследования проводят на беспородных мьш1ах-самцах массой 18-20 г (при гипобарической гипоксии массой 25-28 г). Каждую дозу вещества изучают на 10 животных вещества вводят внутрибрюшинно за 40 мин до начала эксперимента.

Гипобарическую гипоксию воспроиз- j. водят в герметически плотно закрывающихся банках объемом 200 см Острую Гипобарическую гипоксию моделируют в проточно-вытяжной барокамере, давление регистрируют высотоме- to ром, скорость подъема - вариометром. Животных поднимают со скоростью 50 м/с до высоты 10,5-11 км. Геми- ческую гипоксию исследуют при под- Ложном введении раствора нитрата 15 натрия в дозе 200-300 мг/кг. Сравнение проводят с аналогом по назначению - пирацетамом,

При изучении противогипоксической активности устанавливают, что все 20 вещества 1а - 1г обладают способностью существенно увеличивать длительность жизни мышей в условиях острой кислородной недостаточности в барокамере, превосходя по этому 25 показателю пирацетам в 2-3 раза.

Существенным является то, что эффект испытуемого соединения реализовывается в 5 раз меньших дозах, чем у пирацетама и проявляется в до- 30 зе 20-50 мг/кг (табл. 2).

Высокую эффективность испытуемые; соединения проявляют и по другим противогипоксическим тестам. Наприотсеков: темного (небольшого) с электродным полом и освещенного (большого), куда помещают животное. В течение 2-х минут регистрируют время пребывания животного в светлом и темном отсеках. Затем в темном отсеке животное получает однократный удар током (0,4 мА) через электродный пол (облучение). Для получения амнезии используют максимальный электросудорожный припадок (максимальный электрошок, 50 Гц, 0,2 с). Проведение электрошока непосредственно после обучения вызывает стирание памятного следа. Тест на воспроизведение осуществляют через 24 ч после обучения: животное помещают в светлый отсек камеры и как и прежде регистрируют время пребывания в темном и светлом отсеках в течение 2-х минут. При воспроизведении рефлекса пассивного избегания без действия электрошока контрольные животные предпочитают находиться в светлой части камеры большую асть двухминутного .периода. Стирание обучения при помощи электрошока вызывает у животных амнезию, в результате чего животные с коротким латентным временем заходят в темную камеру и остаются там большую часть времени.

Вещество вводят внутрибрюшинно

мер, введение веществ в дозе 100 мг/кг с +0 до начала обучения, каждую

дозу изучают на 6 животных.

приводит к увеличению продолжительности жизни мьш1ей в условиях гипоксии с гиперкапнией в гермообъеме на 20-70% по сравнению с контролем, Пирацетам при этом.виде гипоксии оказывает аналогичный эффект в значительно .большей (500 мг/кг) дозе.

В условиях жесткой гемичес- кой (метгемоглобиновой) гипоксии предлагаемые вещества также оказываются эффективными, пирацетам независимо от вариации доз при этом виде гипоксии активность не проявляет (табл. 2).

Пример 3. Изучение антиам- нестического действия соединений.

Исследования проводят на белых беспородных мышах-самцах массой 17- 20 г по методике пассивного избегания Буреша и соавторов в модифицированном варианте, которая используется обычно для изучения действия.но- отропных препаратов (1976). Экспериментальная камера состоит из 2-х

отсеков: темного (небольшого) с электродным полом и освещенного (большого), куда помещают животное. В течение 2-х минут регистрируют время пребывания животного в светлом и темном отсеках. Затем в темном отсеке животное получает однократный удар током (0,4 мА) через электродный пол (облучение). Для получения амнезии используют максимальный электросудорожный припадок (максимальный электрошок, 50 Гц, 0,2 с). Проведение электрошока непосредственно после обучения вызывает стирание памятного следа. Тест на воспроизведение осуществляют через 24 ч после обучения: животное помещают в светлый отсек камеры и как и прежде регистрируют время пребывания в темном и светлом отсеках в течение 2-х минут. При воспроизведении рефлекса пассивного избегания без действия электрошока контрольные животные предпочитают находиться в светлой части камеры большую асть двухминутного .периода. Стирание обучения при помощи электрошока вызывает у животных амнезию, в результате чего животные с коротким латентным временем заходят в темную камеру и остаются там большую часть времени.

Вещество вводят внутрибрюшинно

+0 до начала обучения, каждую

дозу изучают на 6 животных.

Данные антиамнестического эффекта представлены в табл. 3.

Как.видно из табл. 3, все соединения обладают выраженным антиамнес- тическим эффектом, что характеризуется способностью этих веществ устранять неблагоприятное действие на память электрошока, в результате чего время нахождения животных по сравнению с контролем в светлой камере существенно увеличивается, а в темной уменьшается. Данный эффект веществ носит дозозависимый характер.

При сравнении действия испытуемых соединений с пирацетамом по тестам вхождения и нахождения животных в темной камере (основной критерий опыта) была показана лучшая сохранность памятного следа после применения указанных соединений, чем пирацетама .

Положительной особенностью новых соединений является также их более

высокая активность по дозам: антиам- нестический эффект этих соединений выявляется в дозах в 6 раз меньших, чем у пирацетама.

Пример 4. Изучение побочных эффектов и острой токсичности. По- бочные эффекты и острую токсичность соединений изучают на беспородных белых мышах-самцах (масса 17-20 г) при внутрибрюшинном введении веществ в возрастающих дозах; 25-100-400- -800-1200 мг/кг.

Оценивают миорелаксантное действи по нарушению координации движений на вращающемся стержне и гибель животных. Острзто токсичность изучают при постоянной температуре (22°С) окружающей среды у индивидуально содержащихся животных при постоянном ДОС- тупе к воде и пище. С этой целью мьппей помещают в клетки-ячейки ВхВх х8 см по однсзму животному в каждой клетке. Гибель животных регистрируют через 24 ч после введения вещест- ва учитывают число погибших и выживших мьшей. -

Результаты исследования представлены в табл. 4.

68,2 222-223 -14,8 49,374,59 ,10,25-C H O N

73,2 185-186 -8,639,713,11 8,23 24,36 C Hj BrOjN,

49,284,36 10,19-C,,H,

53,565,39 12,18-С„Н,

74,7 219-220 89220-221

С 5,8%-ная соляная кислота.

Пирацетам 250 .500 130+30,2

Опыты выявляют, что введение испытуемых веществ животным в дозах 25-200 мг/кг никаких видимых измене- НИИ в состоянии и проведении животных не вызывает. Соединения в этих дозах и Bbmie не вызывают миорелак- сантного действия, не нарушают координации движений. Токсические эффекты у животных наблюдаются, начиная с. доз 800-900 мг/кг, а при введении 1000-1300 мг/кг часть мьппей погибает.

Таким образом, предложенные в качестве средств с противогипоксической и антиамнестической активностью соединения в опытах на животных обладают способностью защищать мышей от гибели при острой кислородной недостаточности, при парциальном дефиците кислорода и метгемоглобиновой форме гипоксии. Испытуемые вещества также проявляют активность по сохранности кратковременной памятиj т.е. обладают антиамнестическим эффектом.

По сравнению с пирацетамом превосходят его как по видам и количественной характеристике противргипок- сического действияS так и по глубине антиамнестического эффекта.

Таблица

49,204,4810,4839,893,328,4624,15

49,204,4810,48- .

53,575,3612,50Таблица 2

101+11,8 133+39,9

98+7,8 103+9,6

13683148

Продолжение табл.2

136831А Таблица 4

10