СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ АНТИАМНЕСТИЧЕСКИМ И ПРОТИВОГИПОКСИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ Российский патент 1997 года по МПК A61K31/50 

Изобретение относится к медицине, в частности к применению гидросукцината 1,2,3,4-тетрагидропирроло[1,2-a]пиразина в качестве средства, обладающего антиамнистической и противогипоксической активностью:

Известно применение пирацетама /ноотропила/ для повышения умственной работоспособности человека, оказывающего также противогипоксическое действие. Однако действие пирацетама проявляется в высоких дозах /300-600-1000 мг/кг/ и только/ после длительного лечения.

Целью изобретения является разработка средства с антиамнестической и противогипоксической активностью, обладающего более высокой эффективностью, чем пирацетам.

Поставленная цель достигается применением гидросукцината 1,2,3,4-тетрагидропирроло[1,2-a] пиразина (1), ранее известного в качестве транквилизирующего средства.

Соединение (1) оказывает антиамнестический и противогипоксический эффекты. В опытах на мышах и крысах показано, что соединение обладает способностью устранять неблагоприятное действие на память максимального электрошока и депривации парадоксального сна, вызывающих "стирание" памятного следа. Другим проявлением действия полученного соединения является защита животных от гибели при гипоксии различного типа.

Прототипом исследуемого вещества по фармакологическому действию служит пирацетам, обладающий выраженными антиамнестическими и противогипоксическими свойствами.

1. Изучение антиамнестического действия.

Фармакологическое изучение проводили на белых беспородных мышах-самцах массой 18 22 г по методике 151 условного рефлекса пассивного избегания /УРПИ/, которая обычно используется для изучения ноотропного действия препаратов. Экспериментальная камера состояла из двух отсеков: темного с электродным полом и освещенного, соединенных отверстием. Животное помещается в освещенный отсек хвостом к темному отсеку. В течение 2 минут регистрировали время пребывания животного в темном и светлом отсеках. Затем в темном отсеке мышь получала однократный удар током /0,4 мА/ через электродный пол /обучение/. В качестве амнезирующего фактора использовали максимальный электросудорожный припадок /50 Гц, 50 мА, 0,2 сек/. Проведение электрошока непосредственно после обучения вызывало стирание памятного следа. Тест на воспроизведение осуществляли через 24 часа после обучения. Животное помещали в светлый отсек, и регистрировалось латентное время захода в темную камеру и время пребывания в темном и светлом отсеках в течение двух минут. При воспроизведении рефлекса пассивного избегания без действия электрошока контрольные животные предпочитали находиться в светлой части камеры большую часть двухминутного периода. Стирание обученного при помощи электрошока вызывало у животных амнезию, в результате чего животные с коротким латентным времен заходили в темную камеру и оставались там большую часть времени.

Вещества вводили внутрибрюшинно за 40 минут до начала обучения. Антиамнестический эффект изучали на 10 животных. Данные антиамнестического эффекта представлены в таблице 1.

Результаты исследований показали, что соединение 1 обладает выраженным антиамнестическим эффектом, проявляющимся в способности вещества устранять неблагоприятное действие на память максимального электрошока. Антиамнестический эффект изучаемого соединения выражался в увеличении латентного времени первого захода животного в темный отсек по сравнению с контролем. Как видно из таблицы 1, увеличивалось время нахождения мыши в светлой камере в 3 раза и соответственно уменьшилось время его нахождения в темном отсеке.

Следовательно, новое соединение при сравнении с пирацетамом показало преимущественную эффективность по антиамнестическому действию.

Положительной особенностью нового соединения является также более высокая активность по дозам: антиамнестический эффект выявлялся в 600 раз меньших дозах /0,5 мг/кг/, чем у пирацетама /300 мг/кг/.

Изучение влияние 1 и пирацетама на воспроизведение
УРПИ после депривации парадоксальной фазы сна.

Исследования проводили на белых беспородных крысах-самцах массой 180 - 250 г. Использовали камеру с электродным полом, разделенную на два отсека: освещенный и темный. Крысу помещали в освещенный отсек камеры и фиксировали латентное время ее перехода в темный отсек. После этого в темном отсеке камеры крыса получала однократный удар током /0,5 мА/ и выбегала из него. Если она в течение 30 с не перебегала, то считалась обучившейся. После сеанса обучения крысу подвергали депривации парадоксальной фазы сна /ПФС/. Для этой цели использовали методику Жуве, или "малых площадок". Крыс помещали в бассейн, наполненный водой /37^oC/, на цилиндрические площадки диаметром 6,5 см, выступающие над водой на 1 см. Находясь на такой площадке, крысы либо бодрствуют, либо находятся в состоянии медленно-волнового сна /МС/. При наступлении ПФС происходит расслабление мышц тела, животные падают в воду, и сон на этой фазе прерывается. Депривацию ПФС применяли в течение 24 часов. Тестирование в данном случае проводили через 10 мин после снятия крыс с площадок в бассейне, чтобы исключить первичную реакцию. При тестировании крысу помещали в освещенный отсек и в течение 3 мин наблюдали, фиксируя время ее перехода в темный отсек.

Результаты опытов представлены в таблице 2.

Как видно из таблиц, контрольные крысы после депривации ПФС находились в светлом отсеке камеры 37,6±5,94 с. Исследуемое вещество в дозе 0,5 мг/кг увеличивает время нахождения животных в светлом отсеке до 170,8±9,0 с, оно превосходит по активности пирацетам, который был использован в дозе 300 мг/кг.

Таким образом, исследуемое вещество обладает способностью устранять неблагоприятное действие на память депривации ПФС и имеет в этом отношении существенное преимущество перед пирацетамом.

3. Изучение противогипоксического действия 1 и пирацетама.

Для выявления противогипоксической активности 1 использовали модели гипоксии с гиперкапнией в гермообъеме, острой гипобарической гипоксии в барокамере.

Исследования проводили на беспородных мышах-самцах массой 18 22 г. Активность каждого вещества изучали на 12 животных, вещества вводили внутрибрюшинно за 40 минут до начала эксперимента.

Острую гипоксию с гиперкапнией в гермообъеме воспроизводили в герметически плотно закрывающихся банках объемом 200 см³. Острую гипобарическую гипоксию создавали в проточно-вытяжной барокамере, давление регистрировалось высотомером, скорость подъема вариометром. Животных поднимали на "площадку высотою 11000 м" со скоростью 50 м/сек. Учитывалась продолжительность жизни и число выживших животных.

Экспериментальное изучение противогипоксической активности показало, что 1 обладает способностью существенно увеличивать продолжительность жизни мышей в условиях разных моделей гипоксии /табл. 3 и 4/.

Как видно из таблиц 3, 4, испытуемое соединение обладает высоким антигипоксическим эффектом. Показано, что 1 в дозе 0,5 5,0 мг/кг вызывает увеличение продолжительности жизни животных в условиях острой гипоксии с гиперкапнией в гермообъеме в 2 2,5 раза, а при острой гипобарической гипоксии в 3 4,5 раза по сравнению с контролем.

Заявляемое соединение значительно превосходит по противогипоксическому эффекту ноотропный препарат пирацетам.

4. Изучение острой токсичности гидросукцината 1,2,3,4-тетрагидропирроло /1,2-a/пиразина.

Острую токсичность изучали на беспородных белых мышах-самцах массой 18 - 22 г при внутрибрюшинном введении в возрастающих дозах. Изучение проводили при постоянной температуре /22^oC/ окружающей среды индивидуально содержащихся животных при постоянном доступе к воде и пище. С этой целью мышей помещали в клетки-ячейки размером 8x8x8 см по одному животному в каждой клетке. Оценку результатов проводили через 24 часа после введения препарата. ЛД₅₀ у соединения 1 составила 1930 /1890-2000/, у пирацетама больше 8000 мг/кг.

Таким образом, заявляемое соединение обладает выраженным антиамнестическим и противогипоксическим действием, низкой токсичностью и значительно превосходит по антиамнестическому и противогипоксическому эффекту известный ноотропный препарат пирацетам.

Изобретение относится к медицине и может найти применение в качестве антиамнестического и противогипоксического средства. Сущность изобретения: применение гидросукцината 1, 2, 3, 4-тетрагидропирроло /1,2-а/ пиразина вызывает антиамнестический и противогипоксический эффекты. В опытах на мышах и крысах показано, что средство обладает способностью устранять неблагоприятное действие на память максимального электрошока и депривации парадоксального сна, вызывающих "стирание" памятного следа. Положительный эффект: средство в дозе 0,5 5,0 мг/кг вызывает увеличение продолжительности жизни животных в условиях острой гипоксии с гиперкапнией в гермообъеме в 2 - 2,5 раза, а при острой гипобарической гипоксии в 3 - 4,5 раза по сравнению с контролем и значительно превосходит по противогипоксическому эффекту ноотропный препарат пирацетам. Антиамнестический эффект средства выявляется в дозах меньших, чем у пирацетама. 4 табл.

Применение гидросукцината 1,2,3,4-тетрагидропирроло(1,2-а)пиразина в качестве средства, обладающего антиамнестической и противогипоксической активностью.