Лазерный флуориметрический детектор для микроколоночной хроматографии Советский патент 1988 года по МПК G01N30/74 

(Л

с

Изобретение относится к лазерной спектроскопии и может быть использовано в лазерных флуориметрах для микроколоночной хроматографии. Целью изобретения является повышение чувствительности и разрешающей способности детектора. В лазерном флуориметричес- .ком детекторе система формирования лазерного излучения выполнена в виде цилиндрического телескопа и трапециевидной диафрагмы. Цилиндрический телескоп превращает излучение лазера в проекции в прямоугольную полоску, соответствующую по форме каналу с исследуемой жидкостью в проточной кювете. Диафрагма регулирует длину прямоугольной полоски соответственно величине хроматографического пика. 2 ил.

оо

sj

О5 О К

Изобретение относится к лазерной спектроскопии и может быть использовано для анализа малых количеств флуоресцирующих жидкостей, например, в микроколоночных жидкостных хроматографах.

Цель изобретения - повьшюние чувствительности и разрешающей способ ности детектора.

На фиг. 1 изображена оптическая схема предлагаемого устройства; на фиг. 2 - кювета и диафрагма.

Схема состоит из оптически связанных лазера 1, цилиндрического телескопа 2, регулируемой диафрагмы 3, прямоугольной кварцевой кюветы 4 с внутренним каналом для протока исследуемой жидкости, светоловушки 5, приемника 6 излучения флуоресценции.

Хроматографическая колонка закреплена резьбовым соединением к входному торцу кюветы, помещенной внутрь оправы-держателя. Между кюветой и колонкой установлен фильтр.

Детектор работает следующим образом.

Лазерное излучение формируется цилиндрическим телескопом в вертикальную полоску, ширина которой равна ширине канала для протока исследуемой жидкости. Длина полоски лазерного излучения регулируется с помощью диафрагмы, установленной перед кюветой детектора. Далее лазерное излучение проходит через кювету, столб исследуемой жидкости и гасится в светоловушке. Излучение флуоресценции собирается объективом в плоскости перпендикулярной возбуждению.

Регулируемая диафрагма в форме при прямоугольной трапеции установлена таким образом, что ее грань, перпендикулярная основанию, расположена параллельно стенке кюветы. Данное расположение диафрагмы обеспечивает возбуждение флуоресценции в столбе исследуемой жидкости сразу же после ее выхода из хрбматографической колонки, тем са самым сводит к минимуму послеколоноч- ный объем жидкостного тракта детек-. тора. Перемещение диафрагмы в горизонтальной плоскости позволяет в определенных пределах плавно менять высоту столба жидкости, возбуждаемой лазерным излучением.

Преимуществом предлагаемой конструкции по сравнению с известной явля0

5

0

5

0

5

0

5

0

5

ется повьшение чувствительности на два порядка и разрешающей способности в 1,5-2 раза.

Пример. Измерительная кювета детектора изготовлена из кварца марки КУ-1 ,который не люминесцирует под дейст-. вием лазерного излучения.Наружные размеры кюветы 4x10x20 мм, внутренний канал 0,5x0,5 мм. Цилиндрический телескоп обеспечивает формирование лазерного излучения в виде полоски размером 0,5x7 мм. Для создания строго прямоугольной формы лазерного излучения с равномерным распределением мощности по площади диафрагма ограничивает максимальную длину полоски до 6 мм, минимальная длина полоски . Таким образом детектируемый объем может плавно регулироваться от 0,25 до 1,5 мкл. Послеколоночный объем детектора не более 0,05 мкл. Излучение флуоресценции возбуждается длиной волны 325 им и регистрируется на длине волны 550 нм. Система регистрации работает в режиме счета одно- электронных импульсов.

При этих условиях и микроколонкой 0,6x170 мм (разрещающая способность 8 -10 теоретических тарелок) получена пороговая чувствительность -детектирования ДНС-аминокислот 2 моль в хроматографическом пике.

Формула изобретения

Лазерный флуориметрический детектор, для ми роколоночной хроматографии, содержащий оптически связанные лазер, узел для формирования лазерного излучения, проточную кювету, светоловуш- ку, диафрагму и приемник излучения флуоресценции, отличающий- с я тем, что, с целью повьш1ения чувствительности и разрешающей способности детектора, узел формирования лазерного излучения выполнен в виде цилиндрического телескопа, а между этим телескопом и проточной кюветой расположена диафрагма, выполненная в виде прямоугольной трапеции и установленная с возможностью перемещения в плоскости, перпендикулярной направлению лазерного излучения.пои- чем грань, перпендикулярная основанию трапеции, расположена параллельно стенке проточной кюветы.

Фиг.1

U

Фиг. 2