Способ определения фертильности эякулята Советский патент 1988 года по МПК G01N33/53 

;о

4

со

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимии, и может быть использовано, в частности для установления степени нарушения сперматогенеза.

Цель изобретения - повьшение точности способа.

Пример 1, Больной Л., 30 лет. Получена сперма для исследо- вания степени нарушения фертильности Определение проводится следующим образом. Спермальную плазму получают центрифугированием эякулята в течение 10 мин при 3000 об/мин.

На стеклянные пластинки размером см заливают 10 мл агаразы, содержащей 5% моноспецифической кроличьей антисыворотки к лактоферрину человека (стекло 1) 5% моноспецифи- ческой антисыворотки к простатической кислой фосфатазё человека (стекло 2) и 10% моноспецифической анти- сьгаоротки к простатическому бета- глобулину (стекло 3) соответственно После застывания агара в нём проби- 12 лунок диаметром 30 Miji, в которые вносят пробу спермальной плазмы больного, а также при разведении стандартного препарата лактоферрина (стекло 1), простатической кислой фосфатазы (стекло 2), простатического бета-глобулина (стекло 3).

Объем всех проб по 20 мкл. Пробу спермальной плазмы больного исходно разводят в 20 раз электродным буфером. Затем из этого раствора для определения простатического бета-глобулина готовят окончательные разведения 1:200, а для определения кислой фосфатазы (К), лактофер- рин определяют в исходном разведении.

После -внесения проб пластинки по мещают в аппарат для электрофореза . Ванны заполнены веронал-ме- динаповым буфером, рН 8,6, на котором приготовлена и агароза. Электрофорез проводят в направлении анода (в течение ночи) при напряжении 3 В/см.

Окончание электрофореза оценивается визуально по завершению формирования ракетообразных преципитатов стандартов. Затем измеряют высоту пиков у соответствующих проб лунок больного и высоту пиков стандартных белков. По высоте пиков стандартных белков строят калибровочный графи: :

и вычисляют концентрации исследуемых белков.

У больного Л. концентрация про- статического бета-глобулина равна 112 мг%, лактоферрина - 28 мг%, а простатической кислой фосфатазы - 706 мг%. Подставив эти данные в фомулу, получаютследующую величину

112+28

коэффициента фертильности

706

0,2. Вывод: эякулят инфертилен, данные цитологического исследования - объем 5,5 МП, желтоватая жидкость, сперматозоиды отсутствуют, через 45 мин полного разжижения нет Азооспермия.

Пример 2. Больной Б., 23 года. Получен эякулят для исследования степени нарушения сперматогенеза. Определение проводится так же, как в примере 1. Концентрации исследуемых белков у больного: простатического бета-глобулина - 137 мг%, лактоферрина - 36 мг%, простатической кислой фосфатазы - 522 мг2. Подставив эти данные в формулу, получают величину коэффици. 137 + 36

цента фертильности

522

0,33.

Вывод: , эякулят инфертилен. Данные цитологического исследования: 0,5 мл беловатой жидкости, сперматозоиды отсутствуют, разжижение через 45 мин полное. Азооспермия.

Пример 3. Больной М. Получен эякулят для определения степени нарушения сперматогенеза. Определение проводится так же, как в примере 1. Получены следующие концентрации белков: простатического бета-глобулина - 130 мг%, лактофферина - 35 мг%, кислой фосфатазы - 470 мг%. Подставив эти значения в формулу, получают следующее значение коэффициен130+35 „ ,, та фертильности гур 0,35.

Эякулят субфертилен. Цитологическое исследование: 2,0 мл беловатой жидкости, сперматозоиды 0-3-5, слабоподвижны, разжижение через 45 мин полное. Олигозоспермия.

Пример 4. Больной М. Получен эякулят для определения степени нарушения сперматогенеза. Определение проводится так же, как в примере 1. Получены следующие концентрации исслрдуемых белков: простатического бета-глобулина 156 мг%, лактоферрина - 40 мг%, кислой фосфатазы 390 мг%. Подставив эти значения в формулу, получают следуклцее значение

жж д.156 + 40

коэффициента фертильности

390

е

1409943

димости в цолучении эякулята непосредственно перед исследовянием, чем решается ряд организационных и этических проблем. Способ лишен субъективизма в оценке, унифициро 5

Изобретение относится к медицине, точнее к биохимии, предназначено для установления степени нарушения сперматогенеза. Для этого спермаль- ную плазму получают центрифугированием эякулята при 3000 об/мин. В спермальной плазме иммунологическим методом рассчитывают концентрацию простатического в-глобулина, лакто- ферина, кислой фосфатазы, рассчитывают отношение суммы концентраций простатического л-глобулина и лакто- феррина к концентрации кислой фосфатазы и по значению зтого показателя делают вьшод о состоянии эякулята - интерфильном, субфертильном или фертильном. 1 табл. G S

0,5. Эякулят субфертилен. Цитологическое исследование: 5,0 мл белесой жидкости, вязкая, сперматозоиды 30-50, слабоподвижны, характер движе ния поступательный, разжижение через 45 мин полное. Олигозоспермия. Пример 5. Больной С,, 26 лет. Получен эякулят для определения степени нарушения сперматогенеза Определение проводится так же, как в примере 1. Получены следующие концентрации исследуемьк белков: простатического бета-глобулина - 222 мг%, лактоферрина - 46 мг%, кис- лой фосфатазы - 358 мг%. Подставив эти значения в формулу, получают ко222 + 46

эффициент фертильности

J-)H

0,75. Эякулят фертилен. Цитологическое исследование: 25 мл, сперматозоиды 50-65-80, подвижны, движения вращательно-поступательные. Нормозо- оспермия.

Пример 6. Больной К. Получен эякулят для выяснения степени , нарушения сперматогенеза. Определение проводится так же, как в примере 1. Получены следующие концентрации белков: простатического бета- глобулина - 242 мг%, лактоферрина - 52 мг%, кислой фосфатазы - 326 мг%. Подставив эти значения в формулу, получают коэффициент фертильности 242 + 52

326

0,9. Эякулят фертилен.

Цитологическое исследование №13231: 5,0 мл белесой жидкости, сперматозоидов много, хорошо подвижны, разжижение через 45 мин полное. Нормо- .зооспермия.

Предлагаемьй способ дает возможность установить степень нарушения сперматогенеза. При этом нет необхоQ0

5

0

5

0

5

вать несколько образцов, прост в осуществлении .

Исследовано с вычислением коэффициента фертильности в общей сложности 456 проб спермальной жидкости. Учитывая, что известньй способ не поддается количественной оценке, можно только оценить совпадение сделанных заключений (см.таблицу),

Различия по предлагаемому способу между коэффициентами фертильности, по которым делается разное заключе ние, следующие: между минимальным коэффициентом, при котором эякулят считают фертильным 0,7, и высшим, при котором эякулят уже субфертилен 0,5, достоверность значима ) то же касается и различия между коэффициентами инфертильности и стерильного зякулята. В промежутке 0,7-0,5 и 0,33-0,35 во всем исследованном материале коэффициент не получался ни разу.

Формула изобретения

Способ определения фертильности эякулята путем исследования спермьт, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, в спермальной плазме иммунологически определяют концентрацию простатического бета-глобулина, лактоферрина и кислой фосфатазы, рассчитывают отношение суммы концентраций простатического бета-глобулина и лактоферрина к концентрации кислой фосфатазы и при показателе, равном 0,2-0,33, оценивают эякулят инфертильным, 0,35-0,5 - субфертильным, 0,75- 0,9 - фертильным.