Изобретение относится к способу получения биологически активных соединений, меченных радиоактивными изотопами, конкретно к усовершенствованному способу получения меченных тритием α -аминокислот, которые используют для медико-биологических исследований.
Целью изобретения является повышение молярной радиоактивности меченных тритием аминокислот.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
П р и м е р 1. В ампулу для изотопного обмена объемом 40 мл помещают 90 мг гетерогенного катализатора, содержащего 6% палладия на сульфате бария, и 2,0 мл водного раствора, содержащего 22 мг (69 мкмоль) родийлизинового комплекса (L-LyS)RhCl2. Смесь замораживают жидким азотом и воду удаляют лиофильной сушкой. Ампулу откачивают до давления 10-3 ГПа и заполняют газообразным тритием до давления 200 ГПа. Ампулу нагревают до 165оС и выдерживают при этой температуре 2 ч.
Реакционную смесь суспендируют в 3,0 мл смеси равных объемов 0,2 М водного аммиака и этанола. Катализатор отделяют центрифугированием, раствор упаривают досуха для удаления лабильного трития и растворяют в 0,5 мл 0,1 М водного аммиака.
Хроматографическую очистку проводят на карбоксильном катионите Амберлит СG 50 в медной форме. Степень заполнения сорбента медью 15% . Элюент - 0,2 М водный аммиак. Используют ультрафиолетовый детектор, после измерительной кюветы которого помещают колонну (15 х 10 мм) для удаления ионов меди из продукта, заполненную комплексообразующим сорбентом Дауэкс А-1. Фракцию, содержащую аминокислоту, собирают с 22 по 28 мл. Элюент упаривают, аминокислоту растворяют в 50% -ном водном этаноле и доводят радиоактивную концентрацию до 1 КИ/л. Получают 980 мКи лизина с молярной радиоактивностью 74 Ки/ммоль. Химический выход аминокислоты 20% .
Анализ радиохимической чистоты проводят с помощью тонкослойной хроматографии на "Силуфоле" в системе пиридин: диоксан: аммиак: вода (35: 35: 15: 15). Подвижность лизина 0,42. Радиохимическая чистота 98% . Анализ оптической чистоты проводят с помощью колоночной лигандообменной хроматографии на полиакриламидном сорбенте, содержащем группировки L-фенилаланина и заполненном ионами меди, оптическая чистота более 90% .
П р и м е р 2. В ампулу для изотопного обмена объемом 8,5 мл помещают 11 мг гетерогенного катализатора, содержащего 6% палладия на сульфате бария, и 0,5 мл водного раствора, содержащего 2 мг родийнорлейцинового комплекса (L-NLe)RhCl2. Смесь замораживают жидким азотом и воду удаляют лиофильной сушкой. Ампулу откачивают до давления 10-3 ГПа и заполняют газообразным тритием до давления 300 ГПа. Ампулу нагревают до 165оС и выдерживают при этой температуре 2 ч.
Реакционную смесь суспендируют в 3,0 мл смеси водного аммиака и этанола. Осадок отделяют центрифугированием. Раствор упаривают досуха и растворяют в 0,5 мл 0,1 М водного аммиака.
Хроматографическую очистку проводят на карбоксильном катионите Амберлит СG 50(III) в медной форме. Степень заполнения сорбента ионами меди 70% . Элюент - 0,2 М водный аммиак. Используют ультрафиолетовый проточный детектор, после измерительной кюветы которого помещают колонну (15х10 мм) для удаления следов ионов меди из элюента. Эту колонну заполняют комплексообразующим сорбентом Дауэкс а-1. Фракцию аминокислоты собирают с 20 по 26 мл. Элюент упаривают, аминокислоту растворяют в 50% -ном водном этаноле и доводят радиоактивную концентрацию до 1 Ки/л. Получают 280 мКи (3Н)-норлейцина с молярной радиоактивностью 100 Ки/ммоль. Химический выход 41% .
Анализ радиохимической чистоты проводят с помощью тонкослойной хроматографии на "Силуфоле" в системе изопропанол: ацетон: аммиак (15: 9: 9). Подвижность норлейцина 0,6. Радиохимическая чистота 98% .
Анализ оптической чистоты проводят с помощью колоночной лигандообменной хроматографии на хиральных сорбентах. Оптическая чистота более 99% .
П р и м е р 3. В ампулу для изотопного обмена объемом 8,5 мл помещают 11 мг гетерогенного катализатора, содержащего 5% палладия на сульфате бария, и 0,5 мл водного раствора, содержащего 2 мг родийорнитинового комплекса (L-Orn)RhCl2. Смесь замораживают жидким азотом и воду удаляют лиофильной сушкой. Ампулу откачивают до давления 10-3 ГПа и заполняют газообразным тритием до давления 300 ГПа. Ампулу нагревают до 165оС и выдерживают при этой температуре 2 ч.
Выделение и очистку орнитина проводят по режиму, описанному в примере 1. Элюент - 0,5 М водный аммиак. Фракцию аминокислоты собирают с 15 по 20 мл. Получают 98 мКи меченного тритием орнитина с молярной радиоактивностью 46 Ки/ммоль. Химический выход 32% .
Анализ радиохимической чистоты проводят в системе изопропанол: аммиак (7: 3) на "Силуфоле". Подвижность орнитина 0,15. Радиохимическая чистота 99% .
Анализ оптической чистоты проводят с помощью колоночной лигандообменной хроматографии на хиральных сорбентах. Оптическая чистота 94% .
П р и м е р ы 4-10. В ампулу для изотопного обмена объемом 8,5 мл помещают 11 мг гетерогенного катализатора, содержащего 6% палладия на сульфате бария, и 0,5 мл водного раствора, содержащего 2 мг комплекса родия (III)с аминокислотой. Процесс проводят, как описано в примере 2. Изотопный обмен проводят с дейтерием, содержащим 0,1% трития при давлении 200 ГПа, в течение 1 ч. Результаты приведены в табл. 1.
П р и м е р ы 11-15. В ампулу для изотопного обмена объемом 8,5 мл помещают 10 мг гетерогенного катализатора, содержащего 5% палладия на сульфате бария, и 0,5 мл водного раствора, содержащего 2 мг комплексов платиновых металлов с аминокислотами. Процесс проводят, как описано в примере 2. Изотопный обмен проводят с дейтерием, содержащим 0,1% трития при давлении 200 ГПа. Результаты приведены в табл. 2.
Комплексы аминокислот с платиновыми металлами получают реакцией водных растворов аминокислот с водными растворами солей платиновых металлов при температуре 50оС и постепенном оттитровывании щелочью выделяющихся в результате реакции протонов в течение 1 ч.
Таким образом, способ позволяет повысить молярную радиоактивность аминокислот до 22-112 Ки/ммоль против 4-12 Ки/ммоль при известном способе. (56) Авторское свидетельство СССР N 1121928, кл. С 07 С 101/04, 1983.
H. Kryl, I. Inorg, Nuel, Chem, 1979, 41, 591.
Изобретение относится к одноосновным моноаминокислотам, в частности к способу получения меченных тритием ( a -аминокислот (АК), которые используются для медико-биологических исследований. Цель - повышение молярной радиоактивности продуктов. Получение АК ведут путем изотопного обмена с газообразным тритием в присутствии гетерогенного палладиевого катализатора на сульфате бария родиевого, или палладиевого, или рутениевого, или платинового комплекса соответствующей аминокислоты при 160 - 250С. Способ позволяет повысить молярную радиоактивность АК до 22 - 112 Ки/ммоль против 4 - 12 Ки/ммоль при известном способе.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЕЧЕННЫХ ТРИТИЕМ α -АМИНОКИСЛОТ путем изотопного обмена с газообразным тритием в присутствии гетерогенного палладиевого катализатора на сульфате бария при повышенной температуре, отличающийся тем, что, с целью повышения молярной радиоактивности продуктов, изотопному обмену подвергают родиевый или палладиевый, или рутениевый, или платиновый комплекс соответствующей аминокислоты при 160 - 250oС.
