Способ моделирования аллергического альвеолита Советский патент 1989 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к медицине, точнее к.экспериментальной медицине, и может быть использовано в пульмонологии, гигиенических исследованиях, фтизиатрии.

Цель изобретения - приближение к клиническому течению за счет лимфо- идно-гистиоцитарной инфильтрации межальвеолярных перегородок.

Способ осуществляют следующим образом.

Морским свинкам в течение 1-3 мес непрерывно ингалируют аэрозоль кормового белка эприна в концентрации 0,09-1,5 мг/м с размером частиц 1-10 мкм (85% частиц размером 1-5мкм, 15% частиц размером 6-10 мкм). Затравку животных проводят в камерах Гильденскиольда объемом 144 л с дозаторами двух типов: распылителем Гиль- денскиольда (для концентрации 1,5 мг/м ) и дозатором ВНИИБТ (для концентрации 0,09-0,5 мг/м ). Очистка воздуха проводится фильтрами ФВ-6-. 336. Применяются компрессоры мембранного типа, подающие очищенный воз дух со скоростью 50 л/мин. Для предотвращения слипания белка в дозаторах ис- .пользуются вибраторы. Контроль содержания белковой пыли в камере проводится методом Лоури в модификации ЛСГМИ, которьй позволяет определять растворимые и нерастворимые в воде белки. Калибровочную кривую строят по щелочному раствору БСА. .Расчет количества белка в 1 м- с учетом разведения и объема отобранного во,здуха проводится по формуле

/

S

(Л

СП

05

-у - л

В

С X Тооо

где

X - количество белка в 1 м

воздуха, мг/м ; А - количество белка в 1 мл

раствора, взятого на анализ;

В - количество раствора, взятого на анализ, мл; С - объем отобранного воздуха, м.

Чувствительность метода 10 мкг/мл

Состояние сенсибилизации животных тестируют в динамике, например, через 10, 20, 30, 60 и 90 сут после начала воздействия с помощью комплекса иммунологических и морфологических методов: активная кожная анафилаксия (АКА) по Ovary - определение гомоцитотропных антител; реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ); реакция связывания комплемента (рек)i реакция специфического повреждения базофилов (РСПБ) в модификации Л.А.Дуевой; уровень гиста- мина в крови; оценка гистоструктуры легких.

Пример, Морской свинке проводят ингаляционное воздействие эпри на в концентрации 0,09 мг/м . В реакции АКА уже на 10-е сут ингаляции появляются гомоцитотропные антитела, изменение концентрации которых имеет волнообразный характер и к концу экс пер1шента остается относительно высокой.

Изучение РТМЛ показало, что на 20-е сут воздействия нарастает выработка фактора миграции лимфоцитов (МИФ). К концу эксперимента через 90 сут уровень МИФ достоверно превышает контроль.

РСК logj титра комплементсвязы- вающих антител возрос через 20 сут ингаляции и до конца эксперимента был достоверно выше контроля.

В РСПБ, начиная с 30 сут воздействия, наблюдали тенденцию к увеличению дегрануляции базофилов и развитию четко выраженных псевдоподий. Известно, что степень дегрануляции базофилов коррелирует с уровнем гис- тамина в крови. Максимальное количество гистамина в крови подопытных животных обнаружено на 20-е и 60-е сут ингаляции эприна. Получена достоверная корреляция между степенью дегрануляции базофилов и уровнем гистамина в крови.

Гистологическое исследование лег ких животных через 1 и 3 мес ингаляции эприна выявило наличие харак терных признаков аллергического апь.

0

5

0

5

0

5

0

5

0

5

веолита: лимфоидно-гистиоцитарную инфильтрацию межальвеолярных перегородок, формирование гранулем, деструкцию альвеолярного эпителия, вас™ куляты. Характерной реакцией легочной паренхимы являлось утолщение межальвеолярных перегородок за счет их отека и лимфоидно-макрофагальной инфильтрации. В артериолах и венулах легкого наблюдали отек всех слоев стенки. Отмечено значительное увеличение количества альвеолярных макрофагов с повышенной активностью лак- татдегидрогеназы и кислой фосфатазы. В легких обнаружены многочисленные, варьирующие по размерам гранулемы, сливающиеся между собой и образующие массивные безвоздушные участки. Нередко гранулемы формируются вокруг бронхов, несущих признаки хронического воспалительного процесса. В большинстве случаев гранулемы пред-, ставлены лимфоидно-макррфагальными элементами с эпителиоидными клетками. В участках гранулематозного поражения встречаются кровеносные сосуды с деструкцией стенок. У отдельных животных наблюдаются гранулемы преимущественно лимфоидного характера.

Таким образом, обнаруженное при морфологическом исследовании грануле- матозное поражение легких и характерные иммунологические сдвиги позволяют сделать заключение о развитии у всех подопытных животных в ответ на ингаляционное воздействие аэрозоля эприна экзогенного аллергического альвеолита.

Коэффициент корреляции между показателем размера частиц и уровнем гистамина в крови морских свинок представлен в таблице.

Формула изобретения

Способ моделирования аллергического альвеолита путем ингаляционного введения белка экспериментальным животным, отличающийся тем, что, с целью приближения к клиническому течению за счет лимфоидно-гис- тиоцитарной инфильтрации межальвеолярных перегородок, в качестве белка используют эприн в течение 1-3 месяцев в концентрации 0,09-1,5 мг/м .

14675676

Коэффициент корреляции через ,сут

10

...bi.2°n

90

90

Изобретение относится к медицине. Для приближения к клиническому течению за счет лимфоидно-гистиоци- тарной инфильтрации межальвеолярных перегородок морским свинкам в течение 1-3 мес непрерывно ингалирзтот аэрозоль кормового белка эприна в концентрации 0,09-1,5 мг/м с размером частиц 1-10 мкм. 1 табл.

0,21 0,54 0,67 0,50 0,54 0,72 0,54 0,84 0,88

0,7 0,63 0,81 0,87 0,91 0,80