Способ прогнозирования ранних рецидивов рожи Советский патент 1989 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционной патологии человека, в частности у рожистого воспаления.

Цель изобретения - повьппение точности определения иммуноингибирую- щей активности антител для прогнозирования ранних рецидивов рожн.

Способ осуществляют следующим образом о

В центрифужных пробирках смешивают равные объемы (по 50-100 мкл) испытуемой сьгаоротки больных рожей и аллергена гемолитического стрептококка (0,1-0,2 кожные дозы в I мл),разведенного на забуференном физиологическом растворе (рН 7,2-7,4). Смесь инкубируют при 37 С в течение 20 - 30 мин.

Яа поверхность стерильного предметного стекла наносят по 10-20 мкл

гепаринизированной аутологичной капиллярной крови больных и его сыворотки, обработанной аллергеном, и инкубируют 15-20 мин при во влажной камере. Затем добавляют по IО мл 0,2%-ного нитросинего тетразолня и стимулятора (пирогенал 10 МПД/мл или опсонизированные частицы эимозана). Вновь инкубируют 15-20 мин при 37 С во влажной камере. Из капли на этом же предметном стекле кончиком паст- ровской пипетки делают мазок, который после подсушивания фиксируют метанолом и окрашивают 0,1%-ным водн,гм раствором нейтрального красного.

Микроскопирование проводят под световьгм микроскопом (900 х) в иммерсионной системе. Учитывают процент формазанполржительных полиморфно- ядерных лейкоцитов (с темно-си1П1Мн

4

СО ГС N5

оо

4:

отложениями глыбок формазана в цитоплазме) на 200-300 клеток.

Контролем является постановка реакции без предварительной обработки капиллярной крови сывороткой, т.е. общепринятая реакция стимулированного НСТ-теста.

Величина ингибирующего эффекта обработанной аллергеном сыворотки больных выражается с помощью индекс ингибирования (ИИ), вычисляемого по

К-П

формуле: ИИ, где К - % форк

мазанположительных нейтрофилов в контроле; О - соответствующий показтель в опытной пробе. За достоверное ингибирование принимают значе- тш ИИ 0,20.

Время постановки реакции 90 - 110 мин. Мазки сохраняются неограниченное время

Пример. Больной Ш. В. К., 40 лет,поступил с жалобами на отечность и покраснение кожи в области левой щеки и носа, головную боль, озноб, незначительное повышение температуры (37,8°С). Считает себя больным в течение двух лет, частота обострений 2-3 раза в год, чаще в зимне-осеннее время. Предыдущее обострение перенес в декабре 1984 г., рецидив протекал в форме эритематоз ного воспаления о Настоящий рецидив связывает с наличием трещин в слизитой полости носа. Объ.ктивно: эри- тематозное воспаление кожи в области левой щеки и носа, регионарный лимфоаденит подчелюстных узлов слева. Со стороны других органов и систем патологии не выявлено. По данным анализов крови - умеренный лейкоцитоз, относительный лимфоцитоз, в острС М периоде ускоренная СОЭ.

Диагноз: рецидивирующая рожа лица, эригематозная форма, среднетя- желое течение.

Исследование сьгеоротки по предлагаемому способу показало, что ин- гибирующий эффект сыворотки при поступлении 0,59 (в контроле 43,5%, в опыте 17,5%). При повторном обследовании перед выпиской на фоне полной инволюции местного очага поражения, отсутствия симптомов общей интоксикации, нормальной СОЭ (3 мм/ величина ингибирующего эффекта сыворотки 0,46 (контроль 28,5%,опыт 15,5%), т.е. существенно превышарт

0

контрольные значения. Через месяц после вьтиски у больного развился новый рецидив рожи, который также протекал в эритематозной форме Следовательно, у данного пациента, несмотря на клиническое выздоровле- ние, сохраршлся очаг стрептококковой инфекции, который выявил новое обост- рение (рецидив), о чем-свидетельст- вовали результаты предлагаемого способа

С использованием предлагаемого способа испытано 15 донорских сывороток и 38 сывороток от больных рожистым воспалением, находящихся в стадии ранней реконвалесценции, у 12 из которых при последующем наблюдении в течение первых 3-5 месяцев развились ранние рецидивы заболевания.

Положительные результаты предлагаемого способа чаще всего отмечались в группе пациентов с развивпм- 5 мися в последующем ранними рецидивами рожи (в 83,3+10,8% случаев), различие с другими группами обследованных по частоте статистически значимо „ У этик -ке больных были достоверно более высокими значения индексов ингибиции (0,40+0,06), тогда как в других -ореднегрупповые значения не достигали положительных значений.

Повышение точности способа при условии предварительной обработки испытуемых сывороток аллергеном гемолитического стрептококка демонстрируется на примере исследований с сыворотками от 10 больных с развившимися ранними рецидивами рожи„ В опытных пробах сыворотки предварительно обрабатывали аллергеном гемолитического стрептококка, в контрольных тестировали без обработки.

В опытной группе достоверный ингн-- бирующий эффект регистрировался в 8 из 10 случаев (80,0+12,6%), тогда как при тестировании этих же сывороток Ьез предварительной инкубации с аллергеном положительные результаты способа отмечены в 4 случаях (40,0+ +15,5%), различие по частоте статистически значимо (р 0,05). При этом предлагаемый способ позволяет 5 в 2,2 раза снизить ошибку метода по сравнению с известным.

Положительные значения предлагаемого способа являются основанием длл

0

5

0

5

0

51 92284е

проведения с больным повторного кур-отличающийся тем, что,

са антибактериальной терапии со сме-с целью повьппения точности

ной препаратов и назначения в после-прогнозирования, сыворотку обрабаты-

дукяцем длительной бицкплинопрофилак-вают аллергеном гемолитического

тики,стрептококка, добавляют стимулированные аутологичные нейтрофилы капиллярФормула изобретенияной крови, проводят НСТ-тест и определяют уровень ингибируюших факторов

Способ прогнозирования ранних Q по индексу ингибиции и при величине рецидивов рожи путем исследо-индекса ингибации выше 0,20 по сраввания в сыворотке крови больно-нению с контролем прогнозируют ранний

го иммуноингибирующих факторов,рецидив рожи.

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционной патологии. Цель - повышение точности прогнозирования рецидива рожи. Для этого осуществляют постановку реакции определения ингибирующей активности сыворотки на иммунологические реакции. Испытуемую сыворотку обрабатывают аллергеном гемолитического стрептококка и ее тестируют на аутологичных стимулированных нейтрофилах капиллярной крови, в качестве показателя функциональной активности которых используется стимулированный тест восстановления нитросинего тетразолия. Точность способа возрастает в 2,2 раза.