Способ введения биологически активных веществ в организм животного Советский патент 1991 года по МПК A61K38/17 A61K47/42 

Изобретение относится к медицине, а именно к способам доставки биологически активных веществ в органы-мишени, и касается способа введения биологически активных веществ в организм животных.

Целью изобретения является повышение эффективности способа за счет селективного транспорта активного ве1цества к органам.

Способ осуществляют следуюпмм образом.

Из плазмы крови человека или животного ультрацентрифугированием в растворах КИг последовательнв выделяют .фракции липопротеидов очень низкой, низкой и высокой плотности,которые затем диализуют против 500- кратного объема О,15 М NaCl, 0,05 М трис/глициновый буфер (рН 7,4). К раствору, содержащему 0,5-1,0 мг/мп липопротеидного белка, добавляют связывающийся с липопротеидами лиганд (биологически активное вещество), инкубируют в течение 0,5-1,0 ч при 37 и освобождают от избытка ли- ганда с помощью гель-фильтрации. Нагруженные лнгандом липопротеиды выбранного класса плотности в количестве f определяемом целью введения биологически активного вещества, вводят внутривенно в организм.

Пример 1. Меченый йод-125- тироксин ( М) добавляли к

СЛ

О- 0) О) -ч

смеси липопротеидов очень Ш1зкой,низкой и высокой плотности (ШЮНП, ЛПНГ и ЛПВП), содержащей 1,5-2,0 мг белка. Смесь подвергали кроматогра- фиче.скоьгу разделению с помощью гель-фильтрации на колонке с сефаро- зой АВ (). Йод-125-тиооксин элюировался с колонки двумя пиками. Первый пик выходил с фракцией ЛПВП, Второй пик радиоактивности соответствовал свободному (.несвязанному) гормону. Связывание тироксина с ЛПВП носило специфический характер,поскольку полностью подавлялось в присутствии 500-кратного избытка ченого тироксина.

Связывание кортикостероидов и их некоторых предшественников в отдельные фракции ЛП проводили при добавлении к раствору ЛП (0,5 мг белка) меченых С-прегненолона, зН -дезоксикортикостерона, Н-кортизола

и Н-кортикостерона. Смесь инкубировали в течение 0,5-1,0 ч при 37 . и подвергали хроматографическому разделению на колонке ( мм) с сефадексом Г-25 (Фармация). Элюент - 0,02 М трис/НС1, рН 7,А, содержащий 5 мМ ЭДТА Ыау и 5 мМ 2-меркаптоэта- нола. Появление радиоактивности в объеме выхода ЛПВП свидетельствует о связывании Н-кортизола фракцией ЛПВП.

Полученные данные свидетельствуют о специфическом связывании липопротеидов во стероидными гормонами.

Дпя изучения селективности достав

ки биологически активных веществ к органам-мишеням использовали С-хо- лестерин. Вьщеленные с помощью ультрацентрифугирования липопротеиды (ЛПОНП, ЛПНП и ЛПВП) плазмы коови крыс инкубировали с С-холестери

7

1

ном. Несвязавшийся с липопротеидами лиганд удаляли гель-фильтрацией на сефадексе Г-50. Меченые холестерином ЛПОНП, ЛПНП и ЛПВП вводили крысам в одну из хвостовых вен. Через 3 ч (ЖИВОТНЫХ забивали и исследовали распределение С-холестерина в различных органах и тканях крыс.

Поглощение С-холестерина органами и тканями крыс через 3 ч после внутривенного введения в составе ЛПОНП, ЛПНП и ЛПВП представлено в taблицe.

Таким образом, представленные ин вино данные подтверждают факт селективной доставки лиганда с ЛПОНП в печень, а с ЛПВП - в надпочечники.

20 Формула изобретения

1. Способ введения биологически активных веществ в. организм животного путем инкубации их с носителем и внутривенной инъекции, отличаю- m и и с я тем, что, с целью повыше0

S

0

ния эффективности способа за счет селективного транспорта активного вещества к органам, в качестве носителя используют липопротеиды крови высокой, низкой илиочень низкой плотности.

2.Способ по п.1, отличаю- щ и и с я тем, что, с целью селективного транспорта в печень стероидных гормонов, в качестве носителя используют липопротеиды очень низкой плотности.

3.Способ по П.1, отличающийся тем, что, с целью селективного транспорта в надпочечники стероидных гормонов в качестве носителя используют липопротеиды высокой плотности.

Изобретение относится к медицине и касается способа доставки биологически активных веществ непосредственно к органам-мишеням. Целью изобретения является повышение эффек- тивностн способа за счет селективного транспорта вещества к органам.Для осуществления способа из плазмы крови крыс выделяли липопротеиды низкой, очень низкой и высокой плотности, инкубировали с С-холестерином и несвяяавшийся лиганд удаляли гель- фильтрацией. Меченные холестерином липопротеиды вводили крысам и определяли распределение С-холесте- рина в различных органах и тканях крыс. Показана селективность доставки меченого гормона с липопротеидами очень низкой плотности - в печень, а с липопротеидами высокой ти - в надпочечники. 2 з.п.ф-лы, 1 табл. г сл