Способ количественного определения флавоноидов в растительном сырье Советский патент 1989 года по МПК A61K35/78 

Изобретение относится к медицине, а именно к фармацевтической химии, и может быть использовано для количественного определения флавоноидов в лекарственном растительном сырье.

Цель изобретения - сокращение числа операций и времени.

Сущность предлагаемого способа состоит в быстрой экстракции флавоноидов из растительного материала большим (не менее чем 100-кратным) избытком кипящего 30-70% водного раствора спирта, проведении реакции ком- плексообразования с хлоридом алюминия и спектрофотометрировании на фоне пробы, подкисленной уксусной кислотой. Такой способ спектрофотометрирования позволяет получать более точные результаты анализа, так как при этом исключается поглощение сопутствующих окрашенных веществ растений. Контрольную пробу подкисляют уксусной кислотой для переведения флавоноидов и сопутствующих им веществ в недиссоциированную форму с целью улучшения воспроизводимости результатов.

Пример 1. Определение рутина в бутонах софоры японской.

0,5 г (точная масса) измельченного и просеянного сквозь сито с размером отверстий 0,5 мм сырья бутонов софоры японской помещают в колбу со шлифом вместимостью 200 мл, прибавсд

ее

3150

ляют 100 мл 30%-ного этилового tnnp- та, взвешивают, присоединяют к колбе обратный водяной холодильник, содержимое колбы нагревают 20 мин на ки- пящей водяной бане, отмечая время с начала кипения, затем колбу отсоединяют, искусственно охлаждают, взвешивают и при необходимости доводят до первоначального веса соответст- вующим спиртом. В Две мерные колбы вместимостью 100 мл помещают по 1 мл экстракта, в одну колбу прибавляют 4 мл 5%-ного раствора хлорида алюминия, а в. другую колбу - 0,1 мл 30%-ной уксусной кислоты, доводят объем в колбах водой до метки, перемешивают и через 10 мин измеряют оптическую плотность раствора с хлоридом алюминия на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 415 нм, применяя в качестве контроля раствор, подкисленный уксусной кислотой.

Параллельно в тех же условиях проводят опыт с 1,5 мл 0,1%-ного раствора рутина.

Расчет содержания рутина в абсолютно сухом сырье проводят по формуле

- Ц 100-Со- ЮО ЮО D.. V-a-(IOO-b)

оо

где D - оптическая плотность спектро фотометрируемой пробы анали- зируемого экстракта; Dp - оптическая плотность спектрофотометрируемой пробы раствора рутина; Сд - содержание рутина в спектро

фотометрируемой пробе в пересчете на сухое вещество,г; а - масса сырья, взятая для

экстрагирования, г; b - влага сьфья, %;

V - объем экстракта, взятого для спектрофотометрир ова- ния, мл.

Пример 2. Определение флаво- ноидов в листьях скумпии.

1 г (точная масса) измельченного и просеянного сквозь сито с размером отверстий 1 мм растительного материала помещают в колбу со шлифом вместимостью 200 мл, прибавляют 100 мл 50%-ного этилового спирта,взвешивают, присоединяют к колбе обратный водяной холодильник, содержимое

0

5

0

0

0

5

колбы нагревают 30 мин на водяной бане, отмечая время с начала кипения, затем колбу отсоединяют, искусственно охлаждают, взвешивают и при необходимости доводят до первоначального веса соответствующим спиртом. Часть извлечения фш1ьтруют, отбрасывая первые порции фильтрата. В две мерные колбы вместимостью 25 мл помещают по 2,0 мл фильтрата, в одну колбу прибавляют А мл 5%-ного раствора хлорида алюминия в 70%-ном спирте, а в другую колбу -0,1 мл 30%-ной уксусной кислоты, доводят объем в колбах 70%-ным спиртом до метки, перемешивают и через 30 мин измеряют оптическую плотность раствора с хлоридом алюминия на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 415 нм на фоне раствора, подкисленного уксусной кислотой. Параллельно в тех же условиях проводят опыт с 1,5 мл 0,1%-ного раствора рутина в 95%-ном спирте. Расчет содержания фпавоноидов в сырье в пересчете на мирицетин-3-рамнозид, проводят по приведенной в примере 1 формуле, однако, в знаменатель вводят коэффициент 1,27, полученный делением молекулярной массы рутина на молекулярную массу мирицетин-3-рамнозида, так как последний является основным компонентом флавоноидов листьев скумпии.

В таблице приведены результаты определения флавоноидов предлагаемым способом в различном растительном сырье.

Предлагаемый способ упрощает количественное определение флавоноидов в растительном сырье за счет исключения операций упаривания, фильтрации, обработки аликвотной части извлечения четыреххлористым углеродом, уксусной кислотой, пиридином, а также в 10 раз сокращает время проведения анализа.

Формула изобретения

Способ количественного определения флавоноидов в растительном сырье путем экстракции спиртом, обработки извлечения алюминия хлоридом и фотомет- рирования, отличающийся; тем, что, с целью сокращения числа операций и времени., экстракцию проводят кипячением в течение 20-30 мин с 30-70%-ным водным раствором спирта

дующим спектрофотометрированием на

кислотой.

Изобретение относится к фармации, а именно к фармацевтической химии, и может быть использовано для количественного определения флавоноидов в лекарственном растительном сырье. Цель изобретения - сокращение числа операций и времени анализа. Точную навеску лекарственного растительного сырья кипятят 20-30 мин с 30%-70%-ным спиртом при соотношении 1:(100-200) в колбе с обратным холодильником, охлаждают, доводят до первоначальной массы соответствующим спиртом, профильтрованную аликвотную часть экстракта обрабатывают алюминия хлоридом в 70%-ном спирте и измеряют при аналитической длине волны 410-415 нм оптическую плотность раствора на спектрофотометре на фоне пробы, не обработанной алюминия хлоридом, а подкисленной уксусной кислотой. Параллельно в тех же условиях проводят опыт с 1,5 мл 0,1%-ного раствора рутина. Расчет содержания флавоноидов в сырье осуществляют по формуле, приведенной в описании.

П р и м е ч а

нив. Соотношение сырье - экстрагент 1:100.

По методике берут 1 мл экстракта на 100 мл спектрофото- метрируемого раствора.