Способ определения сорбционной способности гемосорбентов Советский патент 1989 года по МПК G01N33/48 A61M1/34 

Изобретение относится к медицине, а имеЯно к способам апробации гомо- сорбентов,

Цель изобретения - повышение эффективности способа за счет отбора гемосорбентов по способности к погло- ингибитора протеолитического фермента.

Способ осуществляется следующим образом,

В пробирки помещают по 50 мг каждого из исследуемых сорбентов, куда добавляют по 0,5 мл- сыворотки крови (разведение 1:20). Контакт сыворотки с сорбентами 30 мин при 37 С.

Готовят ряд из восьми пробирок с различным количеством трипсина на забуференном физиологическом растворе (рН 7,2), начиная с 500 мкг/мл - с последующим перепадом концентраций в 2 раза до 3,9 мкг/мл в последней пробирке. Раствор трипсина до использования в опыте хранят при 2-4 С.

После контакта сорбентов с исследуемой сывороткой крови жидкую фазу смести в объеме по 0,1 мл переносят в лунки полистироловой пластины (восемь лунок), куда добавляют равные объемы (по 0,1 мл)ранее приготовленного раствора трипсина соответствующих концентраций.

Одновременно ставят контроль на активность трипсина: в восемь лунок добавляют по О,1 мл раствора трнпси- на различных концентраций, указанных .вьше,и по О,1 мл забуференного физиоСП

О 00

СП СП

логического раствора (рН 7,2), Исследуют и антипротеазную емкость сыворотки крови без воздействия сорбентов (контроль сыворотки).

На предварительно приготовленную рентгенологическую пленку, бывшую в употреблении, наносят по капле си каждого разведения. Экспозиция 1 ч при 37 с. После смыва с меси из пленки под струей воды и просушивания на воздухе учитывают результат по образованию просветлений на пленке

в зоне контакта исследуемого материала и желагинового слоя пленки.

Смещение просветлений вправо свидетельствует об зффективной сорбции активированными углями ингибиторов протеина сыворотки крови ввиду того, что добавленный трипсин не ин- активировался и вызвал расщепление ж елатины.

Изобретение иллюстрируется примером (см, табл.).

Изобретение относится к медицине, а именно к способам апробации гемосорбентов. По предлагаемому способу определяют сорбционную способность гемосорбентов по отношению к ингибиторам протеолитических ферментов , в частности, трипсина. Изобретение позволяет снизить побочное действие гемосорбции, обусловленное нарушением функций протеолитических ферментов, в том числе регуляции процессов коагуляции и фибринолиза путем отбора гемосорбентов. Гемосорбенты, обладающие выраженной способностью к поглощению ингибитора трипсина, не могут быть рекомендованы для клинического применения.

Как видно из табл. 1, активирован

ньте угли № 2 и 4 обладают выраженной способностью поглощать ингибиторы пр из сыворотки крови и не могут быть рекомендованы для проведения ге мосорбции,

Экспериментальное обоснование не- обходимости апробации гемосорбёнтов способности поглощать ингибиторы про теолитических ферментов приведено в табл, 2.

В качестве опытньпс животных были использованы белые мыши,

В 1-м опыте животным внутрибрю- шинно вводилась токсическая доза трисина (4 мл на 1 животное), во 2-м - трипсин после обработки донорской сывороткой, обладающей высокой ингиби- тррной емкостью в отношении трипсина, в 3-м опыте сьшоротка предварительно пропускалась через сорбент СКН n-l, не понижающий ее ингибитор- ной емкости, в 4-м - через сорбент СКН П-4, уменьшающий ингибиторную емкость сыворотки в 2 раза.

35

Таблица 2

40

Из табл, 2 видно, что сорбент СКН П-4 при использовании его при гемо- сорбции может вызвать побочное действие, обусловленное нарушением функций протеолитических ферментов, в частности регуляции процессов- коагуляции и фибринолиза.

Формула изобретения

Способ определения сорбционной способности гемосорбёнтов, включающий биохимический метод исследования

1508155°

сыворотки крови до и после йонтактак поглощению ингибитора протеолитис гемосорбеитом, отличаю-ческих ферментов, определяют активщ и и ,с я тем, что, с целью повыше-иость ингибитора трипсина и по его

ния эффективности способа за счетуровню определяют сорбционную споотбора гемосорбентов по способностисобность.