Способ получения иммуногенных вакцинных штаммов чумного микроба Советский патент 1989 года по МПК C12Q1/00 C12N1/00 A61K39/102 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к способам получения иммуногенных вакцинных штаммов чумного микроба in vitro.

Цель изобретения - упрощение и ycKopemie способа получения иммуно- генных вакцинных штаммов чумного микроба.

Пример 1. Суточную агаровую культуру I.pestis EV 76, выращенную при , засевают в цельную нормальную свежую сыворотку Лрови человека в количестве 1 -10 м.кл./мп, инкубируют при 37°С в течение 16 ч, после чего разводит физиологическим раствором до соответствуюш сс КОЕ/мл и вакцинируют животных.

Иммуногенность субкультур I.pestis EV 76 определяют на белых мышах

весом 18-20 г по критерию ImDjo количество микробных клеток, способ- ньк предохранить через 21 сут 50% взятых в опыт животных от 200 вирулентного штамма.

Иммуногенность субкультур I.pestis EV 76, инкубированных в сыворотке крови человека, по сравнению с исходной культурой повысилась в 25,1 раз.

П р и м е р 2. Аналогично примеру 1 вносят в сыворотку культуру в количестве 1-10 м.кл./мл, время инкубации 18 ч. Иммуногенность инкубированной в сыворотке субкультуры по сравнению с исходной повышается в 29,1 раза.

П р и,м е р 3. Аналогично примеру 2 инкубацию субкультуры в сыворотке проводят 24 ч. Иммуногенность инкубиел

N9

СО

СХ)

рованной в сыворотке субкультуры по сравнению с исходной повысилась в 29,5 раз.

Иммуногенность субкультур I.pes- tis EV 76, исходной и однократно инкубированных в нормальной свежей сыворотке крови человека приведена в таблице.

Таким образом, испол)3ование предлагаемого способа позволяет просто и быстро получать иммуногенные вакцинные штаммы I.pestis EV 76, причем 25-29-кратное увеличение иммуноген- ности вакцины достигается за 16-24 ч в то время как известный способ пассирования культур .в монослое макрофагов дает 25-кратное увеличение им- муногенности через 200-240 ч, Пред

лагаемьй способ не имеет ограничений в количестве исследуемых культур, прост в исполнении и легко воспроизводим.

Формула изобретения

Способ получения иммуногенных вакцинных штаммов чумного микроба путем посева микроорганизмов на куль- туральную среду с последующей инкубацией, отличающийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа, в качестве культуральной среды используют нормальную сыворотку крови человека, посев осуществляют в дозе м.клеток/МП, а инкубацию проводят в течение 16-24 ч.

Изобретение относится к медицинской микробиологии. Целью изобретения является упрощение и ускорение способа получения иммуногенных вакцинных штаммов чумного микроба. Способ заключается в однократной инкубации клеток вакционного штамма JERSINA PESTIS EV 76 в свежей нормальной сыворотке крови человека. Для этого J.PESTIS засевают в количестве 1.10⁷-1.10⁸ микробных клеток в 1 мл цельной сыворотки крови человека и инкубируют в течение 16-24 ч при 37°С. Затем суспензией бактерий в соответствующих значениях КОЕ/мл вакцинируют животных. Способ позволяет получить иммуногенные чумные штаммы в 10 раз быстрее по сравнению с прототипом. 1 табл.

Исходная Инкубированная в нормальной сыворотке крови человека По примеру 1 2 3

40740 19200 104000

16 18 24

1622 724 3526 1400 627 3640 1380 616 3090