31604844
Культурально-морфологические свойтва.
Колонии гриба на восьмой день оста при на агаризованной ере- е Чапека имеют диаметр 6 см. На реде сусло-агар - 8,5 см. Колонии оричневато-черного цвета, видимая асть колонии состоит из длинных онидиеносцев (1-1,5 мм высотой),
отходящих от субстратных гиф.. Обратная сторона колонии складчато-мор- щинистая, бледно-желтоватого цвета. При рассмотрении на месте роста головки конидиеносца крупные, ради- 5 альные (до 1000 мкм в диаметре, но чаще - мельче, т.е. 250-300 мкм). Конидиеносцы гладкие, с толстыми стенками, бесцветные,, но под вздутием конидд еносца - светло-желтые, Пу- jo зырь конидиеносца крупный, округлый, 20-50 мкм в диаметре, иногда больше, Профиалиды расположены на пузьфе плотно , размер их 25-30 х 5-7 мкм. д-.. Фиалиды в количестве 4-5 в пучках на 25 каждой профиалиде величиной 6-10 х. X 2-3 мкм. Конидии круглые, вначале бесцветные и гладкие, затем - коричневые, шиповатые, диаметром большей частью 2,5-3,5-мкм. Склероции у дан- ного штамма отсутствуют.
На масляно-минеральной среде в соотношении масло:среда 2:5 и инкубировании в пробирках в термостате при 30- 35 С на 5-8 сут появляется рост на границе раздела водно-масляного слоя, который со временем увеличивается до плотного черного осадка волокнистой формы. Состав минеральной среды, %: NaNO: 0,2-0,35; MgSO Q 0,35-0,6; КН2.Г04 0,07-0,15; KCl 0,15-- 0,25, вода водопроводная остальное. .TeNfflepaTypHbM минимум роста состав35
ляет , оптимум 30-35°С, максимум 45°С.
Физиологические признаки. Штамм способен активно расти на технических смазочных маслах. Отношение к источникам углерода: штамм хорошо усваивает сахарозу, глюкозу, сорбит., маннит, крахмал, хуже - глицерин и целлюлозу. Отношение к источникам азота: хорошо усваивает сх:- - аспарагин, БЬ-с(.-аланин, DL-oC-лейцин, L rjivTaMHH, хуже DL-аспарагиновую кислоту, L-глутаминовую кислоту, мочевину, азотнокисльй аммоний, азотнокислый натрий, сернокислый аммоний.
45
50
Q
5
45
50
Штамм хорошо растет на сусло-агаре, на среде Чапека, на масляно-минеральной среде при рН 6-11 и 30-35 С. Антибиотическая активность на среде Чапека по отношению к левомицетину, тетращишину и эритромицд-ту у штамма Aspesgillus niger van Tieghem BKMF- 3080Д выражена слабее, чем у Asper- gillus niger van Tieghem BKMF-1119. ПРИ испытании методом перпендикулярных штрихов подавляет РОСТ Chaeto- mium globosum Kunze, Trichoderma viride Pers.ex. Fr, S.F. Gray,
Его развитие не подавляется другими видами грибов.
На образцах технических масел различных марок Aspergillus niger van Tieghem BKMF-3080fl чаще всего.развивается с Penicillium chrysogenum и бактериями рода Bacillus. С разной интенсивностью Aspergillus niger van Tieghem BKMF-3080fl растет на технических маслах, - Предлагаемый штамм не патогенен.
Пример 1. Лабораторные испытания грибостойкости технических смазочных .масел в лунках минеральной среды в чашках Петри. Проводят испытания 19 марок технических масел. Оценку поражения исследуемых образцов масел осуществляют по 4-бальной системе: О - полное отсутствие роста микроорганизмов в образце; 1 - зарастает 25% поверхности образца; 2 - зарастает 50% поверхности образца; 3 - зарастает 100%.поверхности образца. За конечный результат принимают цифру, соответствующую усредненному значению степени зарастания материала в каждой из пяти лунок. Результаты приведены в табл. 1.
Из табл. 1 видно, что штамм ВКМЕ-ЗОВОД развивается на всех испытанных маслах различных марок. Причем он весьма агрессивен, так как степень поражения 15 образцов масел оценивается в 3 балла и только четырех образцов - в 2 балла. Эти результаты свидетельствуют о высокой агрессивности штамма Aspergillus niger van Tieghem В1СМР-3080Д.
Пример 2. Изменение физико- химических свойств масел и рН водных фракций под воздействием штамма гриба А.niger ВКМГ-ЗОВОД.
Для определения влияния исследуемого штамма грибов на физико-химические показатели техничесютх масел
55
последние заражают суспензией спор гриба и инкубируют в колбах на качалках. Испытуемые образцы масел в количестве 70 мл наливают в колбы Эрленмейра объемом 750 мл, куда вносят 30 мл посевного материала, приготовленного в водопроводной воде. Колбы с опытными образцами помещают на качалку, вращающуюся со скоростью 200 об/мин и инкубируют в течение 30 сут при . О развитии микроскопических грибов в поставленных на испытания образцах судят по изменению внешнего вида масла, образованию эмульсий и накоплению волокнистого черного мицелиального осадка в срав- ,нении с контролем. Контролем служат масла с добавлением стерильной водо- пр-оводной воды.
По истечении заданного срока кул ь- тивирования штамма гриба в колбах на качалке проводят определение некоторых физико-химических показателей масел о Для этого содержимое колб переливают в делительные воронки. При отстаивании образуются 3 слоя: верхний - масло, средний - тела микроорганизмов, нижний водный слой..
После отслаивания верхний слой масла деконтацией сливают в отдельные стаканчики. Дпя удаления из масла следов воды стаканчики ставят в сушильный шкаф, где вьщерживают при
120 С в течение 2 ч (в отсутствии воды убеждаются пробой на потрескивание) , После этого опр.еделяют вязкость и кислотное число во всех поставленных на испытания пробах.
Определяют вязкость масел и кис- отно е число. Нижний слой (водную ракцию) сливают из делительных воронок в стаканы и определяют величину его рН.
Изменение физико-химических свойств масел и рН водных фракций од воздействием, штамма гриба A.ni- ger приведены в табл. 2.
16
6048446
Из табл. 2 следует, чтс штамм ВКМР-3080Д при использовании в качестве единственного источника углеро- , да технических масел MG-8PK МК-8 +
+ 10% Акор-1, IfflM-10, АМГ-10 и , ВНШ-1НП--50-1-4Ф значительно 5 ваиичи- вает кислотное число указанных марок масел, Б меньшей степч ни, но тагаке to значительно штамм ВК1-1Р-3080Д изменяет и вязкость масел. Изменение физико-химических показатеттей масел под действием вьделенного из тропического климата штамма БЬ2 Р-3080Д говорят о J5 значительной его агрессивности по отношению к исследуемым техническим маслам.
Таким образом, Aspergillus niger van Tieghem ВКМР-3080Д способен ак- 20 тивно развиваться на технических маслах, широкой номенклатуры, используя их в качестве единственного источника углеродного питания, при этом он изменяет в большой степени кислотное 25 число и вязкость. Уменьшение (сдвиг) рН водных фракций после развития штамма ВК 1Р-3080Д в маслах CBi-щетелъству- ет о вьщелении кислых иродуктов метаболизма, способных приводить к ин- 30 тенсификации процессов коррозии стальных деталей, контактирующих с техническими маслами. Все это позволяет рекомендовать вьделенный штамм для использования его в качестве одного из перспективных и безопасных для здоровья человека тест-организмов при проверке грибостойкости технических масел в пр оцессе их разработки для промышленного применения в странах с тропическим климатом ,1.
Фо рмула изобр.етения
Штамм микроскопического гриба Aspergillus niger van Tieghem BM-IF- , 3080Д, используемый в качестве тест- 45 культуры.для определения микологи- ческой стойкости технических масел, применяемых в тропическом климате.
35
40
1604844 8
Т а -б л и ц а 1 .
Изобретение касается биоповреждений технических материалов и может быть использовано для оценки грибостойкости технических смазочных масел, применяемых в тропическом климате, в лабораторных условиях. Целью изобретения является получение агрессивного штамма микроскопического гриба-деструктора технических смазочных материалов, применяемых в условиях тропического климата, безопасного для здоровья людей. Цель изобретения достигается тем, что в качестве тест-культуры при определении грибостой кости технических масел, используемых в тропическом климате, используется штамм ASPERGILLUS NIGER BKMF-3080D, который впервые выделен из масла ИПМ-10, находившегося на хранении в течение полугода в условиях тропического климата Республики Куба. Штамм развивается на всех 19 испытанных марках технических масел, причем степень поражения 15 образцов масел оценивается в 3 балла, а остальных - в 2 балла. При развитии на маслах штамм значительно увеличивает их кислотное число, а также изменяет вязкость. 2 табл.
Марка масла
Штамм гриба Asper- gillus niger van Tieghem ВК№-3080Д
a б л и ц a
| Штамм гриба @ @ 2б @ -1973,используемый для оценки стойкости полимерных материалов | 1981 |
|
SU1060677A1 |
| Методы лабораторных испытаний на стойкость к воздействию плесневых грибов | |||
| Разборный с внутренней печью кипятильник | 1922 |
|
SU9A1 |
