Изобретение относится к биотехнологии и касается нового штамма грибов, используемого для определения грибостойкости металлических материалов, а именно алюминиевьпс сплавов, может быть использоваН в качестве тест-культуры для испытаний на грибо- стойкость различных конструкций техники, выполненных из алюминиевых сплавов.
Цель изобретения - получение активного штамма грибов, использование которого в качестве тест-культуры позволяет повысить достоверность оценки при определении грибостойкости алюминиевых сплавов,
Для получения штамма Penicilliiun chrysogenura BKMF-3068D были исследованы биоповреждения деталей из алюминиевых сплавов (D16 В95, В93, 19, АК4 и др.), входящих в состав технических изделий, эксплуатировавшихся в различных климатических районах. В составе вьщеленной из продуктов коррозии алюминиевых сплавов микрофлоры наиболее часто встречались грибы рода Ре- nic 11 litom, Лабораторные испытания выделенных ;. культур электрохимическим методом показали наиболее высокую коррозионную активность у штамма Р.chrysogenum BKMF--3068D.
О
ел
DO
Морфолого-культуральные свойства.
Колонии на агаризованной,среде Чапека растут довольно быстро, на 10-й де;нь роста достигая 3,5-4,0 см в диаметре, бархатистые, радиально бброзд- чатые, край погруженный,,
Конидиальная зона колоний серо- сине-гзеленого цвета, позднее становится оливковой. Край роста около 2 мм шириной, белыйо В центре колонии стерильная зона в виде бугорка белого (желтоватого) цвета. Эксудат обильньш, в виде капель лимонно-жел- того цвета. Запах слабый, неопределенный в Обратная сторона колонии жел- таяа Вьщеляет в питательную среду желто-зеленый пигменто
Конидиеносцы гладкие, неокрашен-. ные,ассиметрические, обычно с одной или несколькими веточками, отходящими от главной оси, с 2-5 метулами, несущими стеригмы, Конидиальные цепочки объедйне.ны в колонку. Веточки 15- 20хЗ-3,5 мкм, метулы 10-13x3- « - 3,5 MKMj стеригмы 8-9x2,5-3 мкм. Конидии эллипсоидные, 3x4 мкм, гладкие, в массе серо-сине-зеленые
Физиолого-биокимические свойствао
Аэробы, активно растут при 20-: и нейтральной или слабокислой реакции среды,, Подкисляют среду до рН 3,5,
Г,. . , .
Половое размножение не выявлено. Покоящиеся структуры не обнарз ень. Антагонистические свойства по отношению к другим культурам, вьщёлен- ным в тех же условиях, отсутствуют.
Хранение штамма осуществляют в -лио- фильно высзгшенном состоянии в стерильных ампулахо Непродолжительное время (до 6 мес без пересева) может храниться в холодильнике в пробирках с агаризованной средой
1606530
ру 5инми щи ко
Q вл бо ва ги ст
15 3 ни
че чи
20 но то су аг не
25 ку .ру ку пи
30 ал
ев
до де ве ли
ют
4Q по ме ро P, то
45 Ку
35
ре ет со ду
рез 5-7 сут, когда в чашках наблюдается сплошной рост грибного мицелия со спорами, на его поверхность кладут образцы из алюминиевого сплава
Культура не является патогенной, : Пример, Вьщеление штамма.
Измельченные в ступке продукты кор-50 размером 30x15x2 мм.
розии алюминиевого сплава массойОбразцы предварительно обрабатывают следующим образом: двухкратно промывают в ацетоне, высушивают на воздухе, затем протирают влажным там Петри с застывшей средой Чапека Док- поном, смоченным этиловым спиртом са и тщательно растирают шпателем и фламбируют (несколько раз обжигают
0,1 г, содержащие споры штамма PoChrysogenum BKMF-3068D, пе:реносят с соблюдением стерильности в чашку
Чашки закрьюают крышками и инкубируют в термостате при -28 С в течение 57 сут, Обьгано в первой чашке после инкубации наблюдают сплошной рост микроорганизмов, тогда как в последующих можно обнаружить изолированные колонии
Получение чистой культуры осуществляют по методу Коха. Для этого не. большое количество спор из изолированной колонии переносят микробиологической петлей в чашку Петри с заг- стывшей средой Чапека Докса уколом в
3 точки и инкубируют при 28°С в течение 7-10 сутс
Пересев повторяют 1-2 раза до получения чистой культурыо Проверку на чистоту осуществляют путем визуальной оценки и микроскопирования. Кроме того, посевом на среду БСА (1 часть сусло-агара +1 часть мясо-пептонного агара) выявляют бактериальные загрязнения .
Чистую культуру переносят в пробирку со скошенным сусло-агаром и иикуби- .руют 7-10 сут при 28 с. Полученную культуру используют для заражения питательной среды при испытаниях
алюминиевых сплавов на биостойкость.
Пример 2, Испытания алюминиг евых сплавов на грибостойкость.
Испытания проводят контактным методом, сущность которого состоит в выдерживании образцов металлов на поверхности агаризованной среды, иноку- лированной тест-культурой.
Расплавленный сусло-агар разливают в чашки Петри и дают застыть. На
поверхность среды в каждую чашку помещают небольшое количество (1 микробиологическую петлю) спор гриба P,chrysogenum BKMF-3068D и 7-14-су- точной культуры и растирают шпателем,
Культуру инкубируют при 22-25 С, Че
рез 5-7 сут, когда в чашках наблюдается сплошной рост грибного мицелия со спорами, на его поверхность кладут образцы из алюминиевого сплава
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для испытаний алюминиевых сплавов на грибостойкость. Целью изобретения является повышение достоверности оценки грибостойкости алюминиевых сплавов. В качестве тест-культуры предлагается использовать впервые выделенный из продуктов коррозии алюминиевых сплавов штамм PENICILLIUM CHRYSOGENUM BKMF-3068D, обладающий высокой коррозионной активностью по отношению к алюминиевым сплавам. Так, площадь пораженной поверхности образца алюминиевого сплава Д-16Т составляет в среднем 38,2%, потери в массе 14,5 г/мм2. Штамм P. CHRYSOGENUM BKMF-3068Д депонирован во Всесоюзной коллекции микроорганизмов ИБФМ АН СССР. 1 табл.
Затем этим же шпателем протирают поверхность среды последовательно во 2-й и 3-й чашках
над пламенем горелки), Количество образцов должно быть не менее.5. Контролем служат такие же образцы, поме5,1606530
на поверхность стерильного сусков в т
ло-агара,
Чатпки помещают в эксикатор, в котором поддерживается влажность 96- 98% за счет налитой на дно эксикатора стерильной дистиллированной во- ды, для предотвращения высыхания
среды.
Продолжительность экспозиции опытных и контрольных образцов 60 сут при 22-25°С, По окончании испытаний образцы извлекают из чашек Петри и дезинфицируют в 50%гном растворе фенола или формальдегида в течение 3 ч о Затей образцы с помощью скальпеля очищают от продуктов коррозии, промьшают в этиловом спирте, высутшвают и проводят исследование их поверхности на профилографе. Гри- бостойкость материала обратно пропорциональна площади пораженной поверхности образцов.
47,4 35,2 23,5 43,8 17,0 8,0 13,4 14,8
0
Результаты испытаний на грибостой- кость образцов из алюминиевого сплава D-16T с использованием в качест-. ве тест-культуры штамма P.chryso- genum BKMF-3068D представлены в таблице
Контрольные образцы коррозии не подвергались, убыли в массе не отмечено а
Использование активного штамма Penicillium chrysogenum в качестве тест-культуры повышает достоверность, испытаний алюминиевых сплавов на биостойкость,
Формула изобретения
5
20 Штамм низших грибов Penicillium chrysogenum-3068D как тест-культура для испытаний алюминиевых сплавов на грибостойкость.
41,2 38,2 19,6 14,5
| Разборный с внутренней печью кипятильник | 1922 |
|
SU9A1 |
| Изделия технические | |||
| Ме|тод испытаний на устойчивость к воздействию плесневых грибов | |||
| М.: Госстандарт СССР, 1977, с | |||
| Прибор для равномерного смешения зерна и одновременного отбирания нескольких одинаковых по объему проб | 1921 |
|
SU23A1 |
| Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
