Способ окраски тромбоцитов на мазках Советский патент 1989 года по МПК G01N33/48 A61B10/00 

Изобретение относится к медицине, ,а именно к лабораторньм методам исследования.

Цель изобретения - получение более четкой дифферениировки грануломера и гиаломера в тромбоцитах. Особенно- важна такая дифференцировка структур клетки у больных псориазом, так как у этих больных отмечается изменение способности тромбоцитов окрашиваться известными методами.

Способ осуществляют следующим образом.

Из пальца обследуемого берут 0,75 мл крови в пробирку, содержащую 0,25 мл 5%-ного раствора цитрата натрия. Готовят тонкие мазки, фиксируют любым способом (метиленовым спиртом, смесью Никифорова, спирт-ацетона и т.д.). На фиксированный мазок наносят.1,0 мл 0,1%-ного раствора метиленового голубого, приготовленного на 7,5%-ном растворе углекислого натрия, и красят

в течение 1-2 Mim, затем, не сливая краски, на маяок наносят смесь красок Азур Пи Эозина К на 15-20 мин. Приготовление смеси проводят следующим образом. К 120 мл нейтральной (рН7,2) дистиллированной воды прибавляют 9,0 мл 0,1%-ного раствора Азура П и 8,0 мл 0,1%-ного раствора Эозина К. 0,1%-ный раствор Азура П и 0,1%-ный раствор Эозина К готовят на кипяшей дистиллированной воде (рН 7,2). Затем мазки промьшают водопроводной водой.

Трвдмбоциты в мазках, окрашенньк таким образом, расположены по одиночке ипи группами темно-азуро-синего цвета, имеют то невполне округлую, то вытянутую ипи звездчатую сЬорму, одно- ррдную ипи зернистую структуру. В них хорошо ввдна зернистая часть (грану- ломер) и периферическая гомогенная часть (глаломер). Грануломер состоит из азурофильньк зерен, в гиаломере хорошо различаются вакуоли и псевдо(Л

подии. Хорошо идентифицируются при такой окраске и другие форменные элементы крови.

Пример 1. Обследование при профосмотре. Результаты подсчета тромбоцитов следующие: количество тромбоцитов 31 О-1 О /л; из них форм, %: зрелых 87; юных 5; старых 5; форм раздражения 3; тромбоцитов с хорошо различимым грануломером и гиаломером 99,5%.

У здорового человека абсолютное : количество тромбоцитов, подсчитанных известным и предлагаемым способом, мало различается, однако предлагаемый способ значительно облегчает подсчет тромбоцитов,

Пример 2. Больной постзт1ил в клинику с диагнозом псориаз распространенный, прогрессирующая стадия. Больному была проведена ПУВА-те- рапия с псобераном № 10. До и после лечения проведено определение тромбоцитов , данные представлены в табл. 1.

9

Таблица 1

ство окраски по предлагаемому способу.

Пример 3. Больной поступил в клинику с диагнозом: фурункулез. Был проведен курс пенициллино- и витаминотерапии. Данные по определению тромбоцитов до и после лечения приведены в табл. 2,

Таблица 2

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным методам исследования. Целью изобретения является более четкая дифференцировка грануломера и гиаломера клеток. Эта цель достигается тем, что перед приготовлением мазков кровь смешивают с 4 - 5%-ным раствором цитрата натрия в соотношении 1:3, а в качестве красителя используют смесь, содержащую метиленовый голубой и углекислый натрий в следующих соотношениях, мас.%: метиленовый голубой 0,1 - 0,15

углекислый натрий 7,9 - 7,6

вода остальное, при этом PH красителя доводят до 11,4 - 11,8.

В данном примере предлагаемый способ окраски позволяет выявить значи

телъно большее количество., тромбоцитов у больного псориазом, и, особенно, после лечения. Способ позволяет .также выявить большее количество форм раздражения..Как видно из данных табл. 1, ПУ.ВА-терапия у больного псо- риазом значительно изменяет способность тромбоцитов окрашиваться по .известному способу и не влияет на каче35

40

43

50

55

У больного фурункулезом количество тромбоцитов, определенное извест- ньм способом и предлагаемым, мало различалось, однако по предлагаемому способу 100% тромбоцитов быпи хорошо окрашены что значительно облегчает и ускоряет подсчет мазка. Пенициллино- и витаминотерапия практически не отразились на способности тромбоцитов окрашиваться по известному и предлагаемому способам,

Следовательно, предлагаемый способ окраски тромбоцитов в отличие от прототипа обеспечивает высокую стабильность окраски тромбоцитов за счет выявления грануломера и гйаломера, в том числе и у больных псориазом после) ПУВА-терапии в сочетании с фотосенсибилизаторами, что значительно облегчает точный подсчет тромбоцитов в мазке с учетом их форм, а также имеет большое значение при контроле лечения больных псориазом и профилактике осложнений, вызываемых лечением.

о р м у л а

изобретения

Способ окраски тромбоцитов на мазках, путем их инкубации с .красителем

515325486

с последующей докраской в растворесодержащую метиленовый голубой и уг-.

Аз р-Эоэина, отличающийсялекислый натрий в следующих соотнощетем, что, с целью более четкой диа фе-ниях, мас.%1

ренцировки грануломера и гиаломераМетиленовый голубой0,1 - 0,15

клеток, перед приготовлением мазковУглекислый натрия7,А - 7,6

кровь смешивают с 4-5%-ным растворомВодаОстальное

цитрата натрия в соотношении 1:3, апри этом рН красителя доводят до

в качестве красителя используют смесь,11,4 - 11,8.