Способ определения содержания средних молекул в крови Советский патент 1990 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, в частности к способу определения пептидов в биологических средах.

Цель изобретения - упрощение способа.

Согласно предлагаемому способу осуществляют забор капиллярной крови в количестве не менее 60 мкл, добавляют антикоагулянт, а перед обработку ТХУ супернатант предварительно разводят водой в соотношении не менее

1:15.

Способ осуществляют следующим образом.

В стеклянные, с коническим дном, пробирки объемом 3-5 мл (можно использовать пробирки из любого прозрачного нейтрального пластика, не подверженного действию кислот) с помощью пипетки-дозатора приливают по 30 мкл исходного раствора (0,9%NaCl, 3,5% Ка-оксалата--5,5 ). До забора

крови пробирки с раствором хранят закрытыми пробкой,

Забор капиллярной крови пациента производится из пальца или мочки уха в стеклянные пипетки объемом 50- 100 мкл. Предварительно пипетки промывают исходным раствором и высушивают. Отобранную кровь тщательно перемешивают в пробирке с 30 мкл находящегося там исходного раствора из расчета на 30 мкл раствора 100 мкл капиллярной крови. Дальнейшие операции производят как можно быстрее. Допускается хранение отобранных проб на холоду при 4°С, но не более 4 ч.

Пробы центрифугируют на лабораторной медицинской центрифуге ОПн-8 в течение 10 мин при 5000 об/мин (1700). После окончания центрифугирования из каждой пробирки пипеткой-дозатором осторожно извлекают по 50 мкл супернатанта (не затрагивая осадок,

(Л

с

ел

со

00

ю

оо

который содержит форменные элементы крови) и переносят в чистую аналог гичную пробирку. Затем в каждую пробирку добавляют по 750 мкл дистиллированной НА0 и 400 мкл 10%-ного водного раствора ТХУ (раствор трихлор- уксусной кислоты предварительно пропущен через фарфоровые фильтры). Через 5 мин после добавления ТХУ и об- разования непрозрачной взвеси пробы центрифугируют на центрифуге ОПн-8 при 5000 об/мин в течение 5 мин.

После центрифугирования1 по 1 мл супернатанта каждой пробы помещают в кварцевую кюветув Оптическую плотность при 254 и 280 нм измеряют против слепой пробы (3%-лый раствор ТХУ) на любом отечественном или зарубежном спектрофотометре-УФ,напри- мер, СФ-26 (СССР) с использованием кюветы с длиной оптического пути 5 мм.

Формула изоб

е т е н и я

Способ определения содержания средних молекул в крови путем отбора пробы, отделения форменных элементов, обработки супернатанта трихлор- уксусной кислотой центрифугированием с последующим измерением оптической плотности при ft 254 нм и 280 нм отличающийся тем, что, с целью упрощения способа и снижения его травматичности, в качестве пробы используют капиллярную кровь в объеме не менее 60 мкл, а перед обработкой ТХУ супернатант предварительно разводят водой в соотношении не менее 1:15,

Изобретение относится к медицине, а именно к способам определения средних молекул в крови. Целью изобретения является упрощение способа, снижение его травматичности. Способ заключается в том, что для исследования используют капиллярную кровь в объеме не менее 60 мкл, которую центрифугируют, супернатант разводят водой в соотношении не менее 1:15 и обрабатывают ТХУ, вновь центрируют супернатант, спектрофотометрируют и по оптической плотности определяют концентрацию средних молекул.