Способ диагностики почечной недостаточности Советский патент 1982 года по МПК A61B10/00 G01N33/48 

1

Изобретение относится к медицине, в частности к урологии, и может быть использовано для диагностики уремических состояний.

Известен способ диагностики почечной недостаточности путем определения в крови содержания компонентов средней молекулярной массы, который включает гелевую хроматографию сыворотки крови, спектрофотометрирование фракций элюата, выходящих вместе с маркером (витамином ) , и определение наличия уремической интоксикации по увеличению их содержания D.

Недостатком известного способа является использование достаточно растянутого во времени (не менее 2 ч на разгон одного образца) метода гелевой хроматографии.

Цель изобретения - ускорение способа.

Указанная цель достигается тем , что при осуществлении способа диагнрстики почечной недостаточности путем определения в крови содержания компонентов средней молекулярной массы с помощью спектро(|ютометрии плазму крови обрабатывают раствором трихлоруксусной кислоты, образовавшийся осадок отделяют и спектрофотометрируют супернатант.

На фиг. 1 дана гельхроматография плазмы нативной (I) и обработанной трихлоруксусной кислотой (II), колонка (102X2 см), сефадекс Г-25, на фиг. 2 тоже, колонка (40S1,0 см), сефадекс Г-75.

Способ осуществляется следующим образом.

Образцы свежей сыворотки или

.плазмы крови в количестве 1,0 мл

депротеинизируют 0,5 мл 10 -ного

раствора трихлоруксусной кислоты

(ТХУ);

При постановке микрометода 0,1 мл сыворотки или плазмы предварительно

разводят до 1 мл физиологическим раствором.

При заборе крови из пальца аналогичным образом разводят 0,2 мл цельной крови. Дальнейшие манипуляции во всех случаях идут по общей схеме. После обработки ТХУ образцы центрифугируют со скоростью 3000 об/мин в течение 30 мин. Полученный супернатант, содержащий спектр метаболитов с молекулярной массой около 1000 дальтон, характер распределения которых соответствует таковому в нативной плазме, детектируют после разведения дистиллятом в отношении 1:9 на спектрофотометре при длине волн 280 или 25ч нм.

Параллельные исследования по гельхроматографии сыворотки крови с маркером метаболитов средней молекут. лярной массы (витамин В) и плазмы, обработанный ТХУ, показывают, что величины абсорбции при 25 и 280 км образцов такой плазмы соответствуют высоте среднемолекулярного пика (фиг. 1 и 2).

Содержание компонентов средней молекулярной массы в плазме крови уремических больных достоверно превышает уровень, характерный для здоровых людей. Выявлена зависимость указанных показателей от степени тяжести уремической интоксикации. При удовлетворительном состоянии больных на фоне минимальных проявлений симптомов уремической интоксикации содержание в крови компонентов средней молекулярной массы значительно снижается и, наоборот, наиболее выраженное увеличение их содержания (в раз и более от уровня здоровых) отмечают у больных с явлениями нарастания симптомов криза отторжения почечного трансплантата,

П р и м е р 1, В пробирки, содержащие по 0,5 мл 10%-ного раствора ТХУ, .последовательно добавляют по 1 мл плазмы крови 20 больных хронической почечной недостаточностью и 20 здоровых доноров, 06разцы центрифугируют в течение

30 мин при 3000 об, в мин. В чистые пробирки, содержащие по ,5 мл дистиллированной воды, добавляют по 0,5 мл супернатанта, полученного от

центрифугирования образцов обработанной плазмы. Пробы просматривают на спектрофотометре против дистиллированной воды. Как следует из данных табл, 1, уровень средних

молекул в плазме больных хронической почечной недостаточностью в 3 и более раз выше, чем у здоровых доноров.

Пример2.В пробирки, содержащие по 0,9 мл физиологического раствора, добавляют по 0,1 мл плазмы крови 13 больных хронической почечной недостаточностью и по 0,1 мл

плазмы крови 13 здоровых доноров,

В каждую пробирку добавляют по 0,5 мл 10%-ного раствора трихлоруксусной . кислоты, центрифугируют и детектируют предварительно разведенный,

как указано в примере 1, супернатант на спектрофотометре при длине волны 280 нм. Результаты, представленные в табл, 2, свидетельствуют о том, что в сыворотке больных хронической почечной недостаточностью содержание средних молекул значительно превосходит уровень у здоровых доноров ,

В табл. 1 приведены показатели содержания (Е) компонентов средней молекулярной массы по результатам спектрофотометрии ( нм) плазмы крови больных с хронической почечной недостаточностью и здоровых доноров . Примечани личий между группами по В табл. 2 приведены показатели содержания (Е) компонентов средней молекулярной массы по результатам спектрофотометрии (280 нм) плазмы е. Достоверность разкритерию Стьюдента ,001. больных с хронической почечной недостаточностью и здоровц с доноров (ми «1юметод),

931.1718

Т а б. л и ц а 2

Примеча различий между груп Стьюдента ,001. Формула. изобретения Способ диагностики почечной недостаточности путем определения в крови содержания компонентов средней молекулярной массы с помощью спектрофотометрии, отличающ Иси с я тем, что, с целью ускоие. Достоверность и по критерию .рения способа, плазму крови обрабатывают раствором трихлоруксусной кислоты, образовавшийся осадок отделяют и спектрофотометрируют супернатант. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Авторское свидетельство СССР по заявке N 2838001 , 1979 г.

If

«Ь/