Способ определения глюкозы путем изотахофореза Советский патент 1990 года по МПК G01N27/26 

Изобретет1 относится к органическому анализу и может быть использова-. но для качественного и количественного определения глюкозы в мелассе и в процессе биосинтеза лизина.

Цель изобретения - упрощение определения и повышение достоверности результата анализа.

Для этого глюкозу окисляют перио- датом калия, после окисления проводят изотахофоретичрское разделение исходного раствора. На границе электролитов соляная кислота - уксусная кислота при рН 3„5-3,7 в присутствии -аланинл измеряют количество непрореагировавшего периодата, образовавшегося иодата и формиата непосредственно в разделительном капилляре. Таким образом, измеряя непосредственно в среде окисления все полученные компоненты реакции, можно контролировать ее стехиометрию. Определение муравьиной кислоты, продукта реакции, количество которой прямо пропорционально количеству определяемой альдогек сазы, устранит вклад сверхокисления и перерасхода периодата (избытка иодата) на результат анализа, получить информацию о количестве альдогексазы по одной реакции, не используя при этом нестабильные светочувствительные растворы.

Пример. В пробирки заливают мл раствора глюкозы (или стократсд

о со сп

-sj

но разбавленную дистиллированной водой мелассу)с концентрацией 10 SM и промывают I мл раствора периодата калия с концентрацией 2 1 О М, встря- хивают и выдерживают 10 мин в темноте при 50°С; раствор после окисления далее разделяют электрофоретически. Электрофорез проводят в фторпласто- вой (стеклянной, кварцевой или дру- гон токопроводящей) капиллярной трубке с внутренним диаметром 0,3-0,5 мм, длиной см, при токе, стабилизированном в пределах 50-150 мА, изменением напряжения 2-10 кВ в конце разделения, что приводит к среднему времени анализа 10 мин при внесении, в капилляр 10 °моль ионо- генных веществ (5 мл Ю тмояяр- ных растворов).

Концентрация Электролитов 6 10L3- 2 10 моль/л, рН ведущего электролита 3,5+0,3, буферирующий ион -fe-ала- нин (или другой ион с рН 3,).

Использование предлагаемого способа повышает достоверность результатов анализа, так как исключается влияние сверхокисления. Способ позволяет измерить расход окислителя и контролирует стехиометрию протекания реакции окисления глюкозы.

Формула изобретения

Способ определения глюкозы путем изотахофореза, заключающийся в окислении исходного раствора периодатом калия с последующим определением продуктов реакции окисления, отличающийся тем, что, с целью повышения достоверности способа и упрощения процесса определения, после окисления проводят иэотахофорети- ческое разделение исходного раствора на границе электролитов соляная кислота - уксусная кислота при рН 3,3- 3,7 и измеряют количество иодата, периодата и формиата непосредственно в разделительном капилляре.

Изобретение относится к области органического анализа и может быть использовано для качественного и количественного определения глюкозы в мелассе и в процессе биосинтеза лизина. Для того, чтобы повысить достоверность анализа, исходный раствор, содержащий глюкозу, окисляют периодатом калия, проводят изотахофоретическое разделение на границе электролитов соляная кислота - уксусная кислота при PH 3,8 - 3,7 и измеряют количество непрореагировавшего периодата, образовавшегося иодата и формиата непосредственно в разделительном капилляре.

Редактор М.Келемеш

Составитель И.Рогаль

Техред Л.Сердюкова Корректор М.Шароши

Заказ 1319

Тираж 510

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, г.Ужгород, ул. Гагарина, 101

Подписное