Способ количественного определения примеси в органических красителях Советский патент 1990 года по МПК G01N21/64 

Изобретение относится к анализу органических веществ люминесцентным способом, а именно к определению N,N -диме- тил-1-нафтиламин-5-сульфокислоты (ДНАС) в дансилфториде (Ы,Ы-диметил-1-нафтила- мин-5-сульфофториде) и дансилхлориде (М,М-диметил-1-нафтиламин-5-сульфохло- риде).

Цель изобретения - обеспечение возможности экспрессного определения ДНАС в дансилах при контроле качества красителей в процессе их получения.

Способ определения заключается в том, что навеску красителя (дансила) растворяют в ацетоне, а затем добавляют(диметил формам ид) (ДМФА) в таком количестве, чтобы отношение ацетон:ДМФА составляло 4:1 и измеряют интенсивность люминесценции при Я в в 330 нм, АЛ 462 нм. При уменьше- нии количества ДМФА в смеси до 0,5 (0,5:4,5) уменьшается чувствительность определения из-за уменьшения квантового

выхода люминесценции на 30%. При увеличении количества ДМФА до 1,5 (1,5:3,5) происходит разрушение дансилов с образованием ДНАС, что приводит к завышенным результатам. Как показал эксперимент, только возбуждение при 330 нм и регистрация люминесценции при 462 нм раствора красителя, содержащего ацетон и ДМФА в указанном соотношении, позволяет достичь цели изобретения.

Определение выполняют следующим образом.

Навеску анализируемого образца красителя растворяют в ацетоне, затем добавляют ДМФА столько, чтобы его отношение к ацетону было равно 1:4. Затем измеряют интенсивность люминесценции и вычисляют количество ДНАС (%) в образце (пользуясь методом добавок) по следующей формуле

гдилс-0 ) 9 20 :1

ТЬДНАС- (igi|u).G

w w

Ё

ся

VI

Ј 00

где 1ц - интенсивность люминесценции испытуемого раствора;

1х интенсивность люминесценции холостой пробы;

Ig - интенсивность люминесценции испытуемого раствора с добавкой;

g - добавка ДНАС, мкг;

G - навеска красителя.

Время анализа 15-20 мин. Минимальные определяемые количества ДНАС 5 г/мл. Определение проводят на спектроф- луориметре Флуорикорд или на любом другом приборе для измерения интенсивности люминесценции.

П р. и м е р 1. Определение ДНАС в дансилфториде.

0,025 дансилфторида растворяют в 80 мл ацетона, а затем добавляют 20 мл ДМФА, раствор перемешивают. В три пробирки помещают по 0,5 мл приготовленного раствора, прибавляют по 3,5 мл ацетона, во вторую и третью пробирки последовательно добавляют 0,5 мл и 1 мл раствора, содержащего 2,5 мкг/мл ДНАС в ДМФА. Затем в первую и вторую пробирки добавляют соответственно 1 мл и 0,5 мл ДМФА. Растворы тщательно перемешивают и измеряют их интенсивности на Флуорикорде при Дв 330 нм и Хп 462 нм. Содержание ДНАС в анализируемом образце вычисляют по приведенной формуле.

Аналогичным образом проводят определение примеси ДНАС в дансилхлориде.

Указанные красители дансилхлорид и дансилфторид используются в качестве люминесцентных метчиков белка. После взаимодействия с белком этих красителей образуются лю.минесцирующие соединения, по интенсивности свечения которых проводится количественное определение

белка. В случае наличия в этих красителях ДНАС он люминесцирует в тех же условиях, что, и краситель, создает фон, на котором невозможно оценить люминесценцию метчика (дансила).

При наработке красителя в промышленных условиях его пригодность определяется после длительных микробиологических испытаний, тем самым задерживается выпуск готового продукта.

Предлагаемый экспрессный способ определения М-М-диметил-1-нафтил-5-сульфо- кислоты в дансилах позволяет контролировать качество продукта в процессе его наработки и предотвратить получение некачественного красителя. Формула изобретения Способ количественного определения примеси в органических красителях, включающий добавление к раствору красителя диметилформамида, возбуждение и регистрацию интенсивности люминесценции рас- тво ра, отличающийся тем, что, с целью обеспечения возможности определения

М,М-диметил-1-нефтил-амин-5-сульфокис- лоты в М,М-диметил-1-нафтиламин-5-суль- фофториде и М-М-диметил-1-1-нафтиламин- 5-хлориде при контроле качества красителей в процессе их получения, навеску красителя растворяют в ацетоне, добав- ляют к раствору диметилформамид в количестве, удовлетворяющем объем ному соотношению ацетонгдиметилформамид 1:4, возбуждают люминесценцию раствора

излучением с длиной волны Яв 330 нм, регистрируют интенсивность люминесценции на длине волны Ал 462 нм, и по величине измеренной интенсивности определяют количество М,м -диметил-1-нафтиламин-5сульфокислоты.

Изобретение относится к анализу органических веществ люминесцентным способом и предназначено для определения N, N¹ -диметил-1-нафтил-5-сульфокислоты (ДНАС) в дансилфториде и дансилхлориде. Цель - обеспечение возможности экспрессного определения ДНАС. Способ позволяет определять примесь ДНАС в дансилах путем использования в качестве растворителя ацетона и ДМФА в соотношении 4:1 и измерения флуоресценции ДНАС при λ_воз 330 нм и λ_люм 462 нм.