Способ определения степени тяжести вульгарной пузырчатки Советский патент 1990 года по МПК G01N33/49 A61B10/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунодиагностике.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Из периферической крови готовят мазки. Далее мазки сушат на воздухе, наносят 20 - 25%-ный раствор уксусной кислоты и инкубируют с ней 1-2 мин. Затем без промывания на мазок наносят 0,3 - 0,5%-ный раствор ацетоорсеика.

Мазки покрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. В мазках определяют содержание лимфоцитов, в которых исследуют состояние хроматина. И по его распределению по ядру, в том числе: смещение к ядерной оболочке, лунообразный или крупноглыбчатый рисунок хроматина, мел- коглыбчатое распыление хроматина, определяют характер изменения в отношении нормы.

Все разновидности изменения хроматина оценены в сумме как изменение хроматина в виде гомогенного окрашивания, кольцевидное распределение и т.д. По проценту лимфоцитов с измененным хроматином к общему содержанию клеток на стекле определяют степень тяжестки заболевания.

П р и м е р 1. Больная 58 лет, диагноз при поступлении: вульгарная пузырчатка. Объективные данные: единичные высыпания в полости рта и -на красной кайме нижней губы. Стадия разрешения патологического процесса. Мазок крови делается общепринятым методом на предметном стекле. Фиксируются клетки 25%-ным раствором уксусной кислоты. Через 1 - 2 мин наносят каплю красителя 0,5%-ного раствора ацетоорсеина. Накрывают покровным стеклом и анализируют с помощью микроскопа МБР-3 при увеличении 10x90. При этом определяют структуру хроматина интерфазного ядра лимфоцитов. У больной выявлен в ядрах лимфоцитов мелкий хроматин

СО

С

ел

00

ю о ел

меньше 2 мк, глыбчатый хроматин, вакуоли- зироаанные ядра (до 30%клеток от общего содержания лимфоцитов). Эти данные позволили определить тяжелую степень заболевания.

П р и м е р 2, Больная, 40 лет, диагноз при поступлении: вульгарная пузырчатка. Поступила в клинику с множественными высыпаниями в полости рта, на слизистой обо- лочке нижнего века правого глаза, единичные высыпания на коже спины и живота. Стадия обострения патологического процесса. Изучены лимфоциты в мазке крови, окрашенные по описанной методике. Получены данные состояния интерфазных ядер лимфоцитов: полиморфизм хроматина мелкий, средний, крупноглыбчатый. В мазке до 15% лимфоцитов с измененным хроматином в виде гомогенного окрашивания и колец.

Полученные данные дали возможность определить легкую степень тяжести заболевания.

Предлагаемый способ позволяет оценить степень тяжести заболевания, что позволяет вовремя скорректировать лечение и прогноз болезни.

Формула изобретения

Способ определения степени тяжести вульгарной пузырчатки путем приготовления мазков крови, их окрашивания и исследования лимфоцитов, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, в лимфоцитах определяют хроматин, при этом мазки перед окрашиванием обрабатывают20-25%-ным раствором уксусной кислоты в течение 1 - 2 мин, а в качестве красителя применяют 0,3 - 0,5%-ный раствор ацетоорсеина и при наличии в мазках до 30 - 40% клеток с измененным хроматином определяют тяжелую степень заболевания, а при наличии в мазках до 10 - 20% клеток с измененным хроматином определяют легкую степень заболевания.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунодиагностике. Целью изобретения является повышение точности определения степени тяжести заболевания. Цель достигается тем, что в мазках периферической крови определяют состояния хроматина в ядрах лимфоцитов. И при наличии клеток с измененным хроматином до 30-40% от общего содержания их на стекле определяют тяжелую степень заболевания, а при наличии в мазках до 10-20% лимфоцитов с измененным хроматином определяют легкую степень заболевания. Причем клетки предварительно фиксируют в 20 - 25%-ном растворе уксусной кислоты, а окрашивают 0,3 - 0,5%-раствором ацетоорсеина.