Способ получения культуры клеток животных Советский патент 1990 года по МПК C12N5/00 

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в производстве лечебно-профилактических и диагностических препаратов.

Целью изобретения является увеличение прироста клеточной массы.

Пример 1. Клетки, не обработанные ультразвуком (контрольный образец) , в посадочной концентрации 8-10 кл/мл засевают на матрасные колбы. Объем клеточной суспензии 10 мл. Монослой формируется на третьи сутки. Концентрация клеток 31 х X 10 кл/мл, индекс пролиферации 3,8.

Пример 2. Объем и концентрация клеточной суспензии аналогичны примеру 1. Образец обрабатывают ультразвуком частотой 880 кГц с интенсивностью 0,005 Вт-см в течение 5 с. Максимальный прирост клеточной массы

соста вляет 620 тыс. кл/мл .(62 10 кл/ьт), индекс пролиферации 7,7.

Пример 3. Объем, концентрация клеточной суспензии и время образования монослоя аналогичны примеру 2 . Суспензию клеток обрабатывают ультразвуком частотой 880 кГц с интенсивностью 0,02 Вт-см в течение ,10 с. Индекс пролиферации 6,7, что соответствует максимальному приросту клеточной массы 53 10 кл/мп.

Пример 4. Объем, концентрация клеточной суспензии, время образования монослоя, частота и интенсивность действующего ультразвука анало- гичны примеру 2. Время озвучивания суспензии клеток 30 с. Индекс пролиферации 5,0, что соответствует максимальному приросту клеточной массы 40-10 кл/мл.

сл

vl

со

00

Общая зависимость выхода клеточной массы от интенсивности и длительности ультразвуковой обработки приведена в таблице.

Из данных таблицы видно, что оптимальный режим составляет 0,02 - 0,08 Вт. экспозиции 5-30 с. В этом случае наблюдают максимальньй i ,прирост клеточной массы - от 35 10 до 72-10 кл/мл, что соответствует - индексу пролиферации 4,4-9,0. .

Способ прост в исполнении, не тре- бует для осуществления дорогостояще- |5 го оборудования, позволяет увеличить

прирост клеток и сократить время на получение единицы объема клеточной массы (МДВК, ВНК и др.).,

Форму-л а изобретения

Способ получения культуры клеток животных путем пассирования клеток в синтетической питательной среде, отличающийся тем, что, с целью увеличения прироста клеточной массы, на клетки перед пассированием воздействуют ультразвуком с частотой 880 кГц и интенсивностью 0,02 - 0,08 BTiCM в течение 5-30 с.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в производстве лечебно-профилактических и диагностических препаратов. Цель изобретения - увеличение прироста клеточной массы. Стимуляция пролиферации клеток в культуре достигается кратковременной обработкой высокочастотным ультразвуком низкой интенсивности клеток перед пассированием. Облучение суспензии перевиваемых клеток почти теленка МДВК, ВНК проводят в непрерывном режиме. Для воздействия ультразвуком суспензию клеток помещают в стеклянную кювету, куда погружают ультразвуковой излучатель. Частота действующего ультразвука 880 кГц, интенсивность 0,02-0,08 Вт^.см^-2, время экспозиции 5-30 с. При всех режимах обработки наблюдается повышение индекса пролиферации клеток. 1 табл.

ез обработки 5

10

30

0,02 0,03 0,05 0,06 0,08 0,02 0,03 0,05 0,06 0,08 0,02 0,03 0,05 0,06 0,08

Редактор И.Дербак

Составитель А.Маныкин

Техред М.Дидык Корректор Л.Бескид

Заказ 3032

Тираж 486

ВШШПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

3,8 5,6 7,4 7,7 7,0 5,5 6,7 8,7 9,0 8,5 7,4 5,0 6,2 7,2 6,2 4,4

Подписное