Способ определения аминокислот, модифицированных высшими жирными кислотами Советский патент 1991 года по МПК G01N30/94 

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к определению ацилированных жирными кислотами аминокислот во флотореагенте ААК, и может быть использовано в горнодобывающей промышленности, химической промышленности и других областях производства при определении ацилиро- ванных аминокислот методом тонкослойной хроматографии.

Цель изобретения - повышение избирательности и точности определения ацилированных аминокислот во флотореагенте ААК.

Способ осуществляется следующим образом.

Пробу вещества наносят на пластину с силикагелем при соотношении вещество:сорбиент 1:(100-150). Рядом с анализируемой пробой наносят в виде пятна стандарт - ацилированную жирными кислотами аминокислоту. Хроматографическое разделение проводят последовательно сначала в системе гексан - диэтиловый эфир при соотношении компонентов (1,5-2):1, а затем в системе гексан - диэтиловый эфир - ацетон при соотношении компооэ

4 N3

00

со

нентов 1:1:(0,6-0,8)„ Обнаружение осуществляют в Уф-свете.

Пример 1. Навеску флотореа- гента (0,3020 г) взвешивают на ана- литических весах. Смесь огранических компонентов, входящих в состав реагента ААК, выделяют экстракцией хлороформом из подкисленного водного раствора пробы реагента и далее ана.- лиэируют методом препаративной тонкослойной хроматографии (ТСХ) на сшшкагеле.

Пробу вещества наносят на пластину с силикат ел ем ЛЛг5). при соотноше- нии вещество:сорбент 1:150. Рядом с анализируемой пробой наносят в виде пятна стандарт - ацилированную жирными кислотами аминокислоту.

Хроматографическое разделение проводят последовательно сначала в системе гексан - диэтиловый эфир (1,5:1), а затем в системе гексан - диэтиловый эфир - ацетон (,6). Положение ацилированных аминокислот на пластинке обнаруживают в Уф-свете сравнивая с положением стандарта. Силикагель с отмеченной полосы количественно снимают, ацилированные аминокислоты элюируют с сорбента хлороформом со спиртом (1;1), растворитель удаляют, остаток сушат и взвешивают (0,0215 г) . Содержание целевого продукта в пробе реагента 14%

Пример 2. 0,4015 г реагента ААК обрабатывают, как в примере 1. Смесь органических компонентов, выделенных из реагента, разделяют с помощью ТСХ на силикагеле JlCJI g ПРИ соотношении вещество:сорбит 1;130 сначала в системе гексан - диэтиловый эфир (1,7:1), затем в системе гексан - диэтиловый эфир - ацетон (1:1:0,7). Выделяют 0,0558 г ацилированных аминокислот. Содержание целевого продукта в пробе реагента 13,9%.

Ј

целевого продукта в пробе реагента 14,1%.

Ацилированная высшими жирными кислотами 6-аминогексановая кислота.

Найдено, %: С 72,44; Н 11,24; N 3,01. Вычислено (-для N-олеоил-6- аминогексановой кислоты), %: С 72,86} Н 11,46; 3,54.

ИК-спектр, см :1470 (ср.,-СН2-); 1530 (ср. ,Ш,амидная полоса II); 1665 (с., СО, амидная полоса I); 1710 (с., СООЮ; 2500-2700 (СООН); 2860-2940 (с.,СН3, СН2); 3030 (СН); 3455 (ср., Н).

ПМР-спектр (200 МГц, 5% в СДС1. , , м.д. от ТМС): 0,89 (СН,); 1,30 (-(.); 1,62 (СН2СН2с(0)-,м.); 2,02 (СН-СНг-,м.); (-СН-СООН, тр.); 2,3b (-CHj,-C(0)NH-,TP.); 2,78 (СН-СНг-СН,м)| 3,28 (СО Н-СН,-,м.)} 5,34 (,м.).

RfO,58 (силикагель КСК, гексан - эфир - ацетон 1:1:0,8).

R. стандарта в тех же условиях 0,58.

Точность и воспроизводимость предложенного хроматографического способа определения ацилированных жирными кислотами аминокислот проверены на стандартных смесях, для составления которых была специально синтезирована и очищена натриевая соль ацилирован- ной жирными кислотами 6-аминогексано- вой кислоты. Результаты приведены в табл.1.

Результаты разделения с помощью ТСХ при различных условиях хромато- графирования приведены в .

Разработанный способ определения ацилированных жирными кислотами аминокислот во флотореагенте АКК отличается точностью, хорошей воспроизводимостью, простотой исполнения. Продолжительность анализа 3,5-4 ч.

Формула изобретения

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в горнодобывающей, химической промышленности и других областях производства при определении ацили- рованных аминокислот методом тонкослойной хроматографии. Цель изобретения - повышение избирательности и точности определения ацилированных аминокислот во флотореагенте ААК. Пробу вещества наносят па пластину с силикагелем при соотношении вещества и сорбента 1:(1 00-1 50) . Хромато- графическре разделение проводят последовательно сначала в смстеме гек- сан - диэтиловый эфир (1,5- ): 1, i затем в системе гексан - диэтиловый эфир - ацетон 1:1:(0,6-0,8). Обнаружение осуществляют в У -свете, 2 табл. S (Л

ПримерЗ. 0,5010 г реагента ААК обрабатывают, как в примере 1. Смесь органических компонетов, выделенных из АКК, разделяют с помощью ТСХ па силикагеле ЛПг54 при со отношении вещество:србент 1:100 сначала в системе гексан - диэтиловый эфир (2:1), затем в системе гексан - Диэтиловый эфир - ацетон (1:1:0,8). Выделяют 0,0706 г ацилированных аминокислот. Содержание

Способ определения аминокислот, модифицированных высшими жирными

кислотами, включающий нанесение пробы вещества на пластинку с сорбентом, двукратное хроматографирование в различных системах с последующим обнаружением в УФ-свете, элюирование разделенных компонейтов с сорбента, отличающийся тем, что, с цепью повышения избирательности и точности определения ацилированных

( аминокислот во флотореагенте ААК, разделение проводят на силикагеле при соотношении вещество:сорбент 1:(100-150) последовательно сначала

Система гексан:эфир

(1,5:1)

Вещество:сорбент

1:100

Система гексан:эфир:

ацетон (1:1:0,6)

Разделение азотсодержащих Разделение азотсодер- компонентов не происходит жащих компонентов не

происходит

Четкое разделение отсутствует

Четкое разделение отсутствует, наблюдае ся наложение полос от дельных компонентов Наблюдается частичное наложение полос

е:

Наблюдается частичное наложение полос

Четкое отделение ацилиро- ванных аминоксилот от других компонентов

1642373

в системе гексан - диэтиловый эфир

((1,5-2):1), а затем в системе гексан диэтиловый эфир - ацетон (1:1: ( 0,6- 5 0,8)).

Таблица 1

Четкое разделение отсутствует, наблюдается наложение полос отдельных компонентов Наблюдается частичное наложение полос

Четкое отделение ацили- рованных аминокислот от других компонентов