Способ количественного определения димилина в растительных объектах Советский патент 1981 года по МПК G01N31/08 

I

ИзоЬретение относится к области физико-химических способов определения органических соединений и может быть использовано для обнаружения остаточных количеств инсектицидов, в частности димилина, в растительных объектах (листьях, клубнях, плодах и т.д.) и контроля за качеством сельскохозяйственной продукции.

Известен способ определения димилина в организме насекомых и воде водоемов (прудовой воде), заключающийся в экстракции соединения из насеKOMbjx - ацетоном, из воды - этилацег татом, концентрировании и очистке экстракта, идентификации соединения методом тех и количественной оценке методом ГЖХ .

Но применение этого способа для анализа растительных проб невозможно .по следующим причинам:

ацетон не является подходящим экстрагентом для растительных проб, содержащих высокий процент воды, его смешиваемости с водой и затруднительности дальнейшего перерас- . пределения димилмна из водного ацетона в другие органические растворители. При этом практически весь димилин остается в водном ацетоне в силу высокой полярности димилина;

без тщательной очистки экстрактов этот метод невозможно осуществить, поскольку тех не обеспечивает разде-

10 ления сложной многокомпонентной смеси коэкстрактивных веществ и димилина при высоком содержании пигментов, жиров и восков, имеющихся в растительных объектах.

15.

Целью изобретения является сокращение сроков анализа и повышение его точности.

Поставленная цель достигается тем,

20 что в качестве органического растворителя при экстракции димилина из растительных объектов используют хлористый метилен, а очистку экстракта осуществляют методом препаративной хроматографии. Пример. Навеску 10 г измельченных листьев или 50-100 г клубней картофеля или плодов баклажан помещают в коническую колбу емкостью 500 мл со 100 или 200 мл хлористого метилена и извлекают димилин в течение 16-18 ч (через ночь) методом настаивания. Отфильтровывают, экстракт через воронку Бюхнера и бумажный фильтр в коническую колбу, используя водоструйный насос. Растительный остаток в колбе и на фильтре дважды промывают по 50 мл хлористым метиленом, присоединяя его к основному экстракту. Объединенный фильтр сушат над безводным сернокислым натрием или магнием, вновь фильтруют и . концентрируют до мл, используя ротационный пленочный испаритель пр температуре . Экстракт наносят полосой на препаративную пластину из кремниевой кислоты (размер или см, толщина слоя 2 мм, размер частиц 0,10 мм) на высоте 2 см от нижнего края пластины. Рядом наносят стандартный раствор димилина для установ ления расположения соединения после проявления хроматографической пластины в системе хлороформ. Дают подняться фронту растворителя до верхнего края пластины. Затем ее проветривают в течение 20-30 мин в вытяжно .шкафу при комнатной температуре. Делят полосу пластины со стандарт ным раствором димилина на 2 см поперечные зоны, начиная от линии старта, до верхнего края пластины. Соскребают слой сорбента из каждой зо ны в отдельную чистую колбу емкостью 50 мл со шлифом 29 или 1A,5 мм. Вливают в каждую по 10 мл ацетона свеж перегнанного, подсоединяют колбу к обратному холодильничку и нагревают на водяной бане при С в течение 5 мин. Фильтруют экстракт через пористый фильтр в круглодонную колб используя водоструйный насос. Допол нительными порциями ацетона (Sx2 мл ополаскивают сорбент и колбу и присоединяют его к основному экстракту Упаривают ацетон на водяной бане до 0,5 мл и наносят остаток на ТСХ сил фол УФ 25 (ЧССР). Рядом с анализируемым раствором наносят свидеталь 5-10 мкг стандарта димилина. .Проявляют ТСХ в системе хлороформ-ацетон . 4 ), проветривают на воздухе и просматривают под УФ-лампой. Отмечают R димилина. Определив таким образок зону расположения димиЛина на препаративной пластине, соскребают на этом же уровне слой сорбента с растительной про-, .бой, захватывая полосу на 0,5 см шире для обеспечения количественного извлечения димилина из анализируемой пробы. Экстрагируют димилин из сорбента, как описано выше. Ацетоновый экстракт упаривают до 0,5 мл и используют для ТСХ идентификации, перенося количественно на ТСХ силуол УФ 25 в виде полосы шириной 2 см. Рядом с анализируемой пробой наносят стандартный раствор димилина 510 мкг. После проявления ТСХ в системе хлороформ-ацетон (:1) проветривают пластину-на воздухе, просматривают в УФ-свете и отмечают зону расположения соединения. Выскребают слой сорбента с димилином в колбу емкостью 10-15 мл. Экстрагируют димилин 3 - 5 мл ацетона при 3-5 минутном нагревании на водяной бане в колбе, снабженной обратным холодильником. Фильтруют экстракт через пористый фильтр, используя водоструйный насос. Ополаскивают трижды колбу и фильтр с сорбентом 1 мл ацетона, присоединяя его к основному экстракту. Отгоняют ацетон на водяной бане, отдувая пары ацетона током воздуха. Очищенный остаток в колбе используют для количественного определения димилина. Количественное определение димилина п-роводят по способу, заключающемуся в том, что к очищенному анализируемому остатку добавляют 0,5 мл свежеперегнанного диметилсульфоксида, 0,3 мл йодистого метила и 20 мг гидрида натрия. Колбу с содержимым сильно встряхивают и оставляют на 1520 мин. Затем вливают 3 мл гексана, после чего осторожно по каплям добавляют 10 мл в.оды. Закрывают колбу пробкой и встряхивают 20-30 с. Оставляют для разделения слоев. Отделяют гексановый слой метилированного димилина. Водную фракцию встряхивают вновь с 1 мл гексана. Присоединяют этот гексановый экстракт к первому. Сушат экстракт безводным сернокислым натрием. Фильтруют гексановый экстракт в сухую чистую пробирку с Делениями и упаривают гексан до нужного объема (1-2-3 мл). Доводят объем до метки гексаном и используют для ГЖХ определения. Условия ГЖХ определения метилированного димилина: хроматограф Цвет-106 с пламенно-ионизационным детектором, стеклянная колонка 2 м х If 3,5 мм, заполненная хроматоном N-AW-HMDS (0,16-0,20 мм) с 5% SE-30 температура испарителя 230, колонки 220°, азот tO мл/мин, водород 30 мл/мин, воздух 400 мл/мин, шкала электрометра , а время удерживания метилированного димилина 9,5 мин. Для количественного определения хроматографировали анализируемые и стандартные растворы с известной кон центрацией вещества (10-100 мкг/мл), в колонку хроматографа вводили по 2 мкл из серии стандартных растворов для получения высоты пика, близкой к анализируемым растворам.Для по .лучения средней высоты пика проводили 2-3 параллельных определения. Содержание димилина в пробе (в мг/кг) вычисляли по формуле: h - высота пика стандартного раствора, мм; hj - высота пика анализируемого раствора, мм; V. - объем стандартного раствора вводимого в колонку газового хроматографа, мкл; V - объем анализируемого раство ра, вводимого в колонку газового хроматографа, мкл; С концентрация стандартного раствора, мкл/мл; и - объем экстракта анализируемой пробы, мл; m - масса пробы, кг. В таблице 1 приведены данные, характеризующие предел обнаружения и точность количественного определения димилина. Возможности метода проверены при исследовании в лабораторно-полевых опытах продолжительности сохранения и биологической эффективности димилина на картофеле и баклажанах в борьбе с колорадским жуком. В лабораторно-полевом опыте с участков картофельного поля площадью 2 га и баклажанного поля в 0,2 га, обработанных 0,08-0,2 по действующему веществу (25 смачивающийся порошок), через определенные интервалы времени отбирали пробы листьев картофеля и баклажан и съемный урожай картофеля и баклажан. Определяли в них содержание димилина предлагаемым способом. В таблицах 2 и 3 представлены результаты определения. Преимущества предлагаемого способа заключаются в том, что значительно сокращается рабочее время, затрачиваемое на анализ, для экстракции и очистки используются эффективные дешевые, легкодоступные реагенты, а их сочетание позволяет отделить мешающие определению вещества, четко выделить на ТСХ димилин и использовать его для дальнейшего количественного определения. Другие дополнительные преимущества предлагаемого способа заключаются в том, что он позволяет, распространить применение его к широкому кругу растительных объектов и с высоким содержанием коэкстрактивных веществ, что в конечном итоге будет способствовать организации охраны окружающей среды от неблагоприятного воздействия этого пестицида. Результаты количественного определения растительных объектах Таблицадимилина в различных

Результаты определения димилина на листьях картофеля после обработки их димилином

888034

10 Таблица 2

Примечани Результаты определения димилина на листьях их обработки димилином Примечание:

Формула изобретения

Способ количественного определения димилина в растительных объектах, включающий его экстракцию органическим растворителем, концентрирование экстракта, очистку экстракта, идентификацию димилина синтезом тонкослойной хроматографии и количественное определение его методом газожидкостной хроматографии, от л и мающийся тем, что,С целью сокращения сроков анализа и повьшения его точности, в качестве органического е: в. клубнях съемного урожая картофеля остатков. димилина не обнаружено спустя kk дня после обработки в съемных плодах баклажан остатков димилина не обнаружено. Таблица 3 баклажан после

08803 ,2

растворителя при экстракции димилинаИсточники информации, из растительных объектов используютпринятые во внимание при экспертизе хлористый метилен, а очистку экстракта осуществляют методом препаратив-1. J. Assoc. Offie. Anal. Chem., ной хроматографии.s 1978, 61, № 3.- 629.