Способ моделирования аутоиммунного тиреоидита Советский патент 1991 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии.

Цель изобретения - повышение точности способа за счет приближения модели к течению естественной патологии.

Способ осуществляют следующим образом.

Крыс-самцов линии Вистар получают из питомника и отсаживают на 2 недели в карантинное помещение вивария. Взвешивают. По истечении двух недель животных подвергают осмотру в присутствии ветврача, взвешивают и отбирают только здоровых животных. Крыс рассаживают в клетки по шесть штук в каждую и помещают в специально отведенные комнаты вивария. В этих комнатах животные находятся еще четыре дня до начала опыта (время адаптации). На пятый день животному внутримышечно в заднюю лапку ежедневно начинают вводить пролактин в дозах 50-70 Ед/кг. Для этого сухой Лактин во флаконах разводят изотоническим раствором хлористого натрия. Концентрацию раствора рассчитывают таким образом, чтобы в 0,2 мл растворителя была необходимая доза пролактина. Препарат вводят ежедневно между 10 и 11 часами в течение 17-20 дней.

Пример 1. Крыса-самец линии Вис- тар. Получена из питомника, находилась 2 недели в карантинном помещении вивария. Вес при поступлении в виварий 175 г. Через 2 недели осмотрена ветврачом, здорова, вес 190 г. Отсажена в клетку и перенесена в помещение, где производится опыт. На пятый день животное осмотрено, признано здоровым. В этот же день в заднюю лапку крысе ввели в 0,2 мл изотонического раствора хлористого натрия 50 Ед пролактина/кг массы тела. Инъекции делали ежедневно в одно и то же время (10-11 часов) в течение 17 дней. На 18-й день животное забили под тиопенталовым наркозом Щитовидную, поджелудочную железы и семенники немедленно извлекли и фиксировали в 10%-чом растворе нейтрального формалина. Из указанных выше органов готовили серии гистологических срезов, которые окрашивали

(Л

С

«ХЮ&

Ь, Ю

гематоксилином Майера и эозином. Для дифференциации бета- и альфа-клеток использовали хромгематоксилинфлоксино- вый метод, по Гомори. Излучали гистологические срезы под световым микроскопом при увеличении ХООО (масляна я иммерсия). Производили морфометрию бета-клеток поджелудочной железы и тиреоцитов щитовидной железы. При гистологическом изучении щитовидной железы наблюдалось уменьшение высоты тиреоидного эпителия: 4,3 ±0,1 мкм у подопытного животного и 9,7 ± Q.4 мкм у контрольного, которое получало изотонический раствор хлористого натрия. В некоторых тиреоидных фолликулах, особенно располагающихся в очагах лимфоцеллюлярной инфильтрации, выявлялось разволокнение их стенки. В паренхиме щитовидной железы обнаруживалась диффузная лимфоцеллюлярная инфильтрация с формированием лимфоидных фолликулов с центрами размножения. В этих участках наблюдалось также разрастание грубой волокнистой соединительной ткани. В очагах лимфоцеллюлярной инфильтрации выявлялись клетки Ашканази. Площадь лимфоцел- люллрной инфильтрации составляет 72% железы. Гистологическая картина соответствует аутоиммунному тиреоидиту(тиреои- диту Хасимото у человека).

В островковом аппарате поджелудочной железы этого животного наблюдалось угнетение бета-клетох, диаметр бета-клеток 8,3 ±0,1 мкм по сравнению с 14,3 ±0,4 мкм у контрольного. В некоторых бета-клетках (около 60%) отмечены явления дистрофии, у контрольных животных подобных дистрофических изменений в инсулинпродуцирую- щих клетках островков не выявлено. Кроме того, в островках наблюдаются лимфоциты и плазматические клетки, а также единичные макрофаги. Лимфоцеллюлярная инфильтрация, являющаяся ведущим признаком аутоиммунного инсулита выявляется в 70% островков.

В семенниках обнаружено разрушение стенки семенных канальцев, дистрофия клеток Сертоли (сустентоцитов), а также половых клеток всех популяций, находящихся в семенном канальце, разрастание соединительной ткани, диффузная лимфоцеллдоляр- ная инфильтрация паренхимы семенника, особенно в участках разрушения стенки семенных канальцев, т.е. гистологическая картина соответствовала аутоиммунному ор- хиту. Очаги лимфоцеллюлярной инфильтрации занимают 80% площади семенника.

Пример 2. Крыса-самец линии Вистар № 27. Получена из питомника, находилась

на карантинном режиме 2 недели. Вес при поступлении в виварий 185 г. Через 2 недели животное осмотрено ветврачом, здорово. Вес 200 г. Пролактин в дозе 70 Ед/кг массы тела вводили на протяжении 20 дней. На 21

день животное забито. Проведены исследования щитовидной, поджелудочной желез и семенников. В щитовидной железе подопытного животного выявлен аутоиммунный тиреоидит. Площадь лимфоцеллюлярной инфильтрации железы 78%. В поджелудочной железе - аутоиммунный инсулит в 87% островков, а в семенниках - аутоиммунный орхит. Очаги лимфоцеллюлярной инфильтрации в семенниках занимают 84%

площади, Гистоструктура щитовидной, поджелудочной желез и семенников при указанных патологических процессах аналогично описанной в примере № 1. Данные мор- фометрии: высота тиреоцитов у подопытного животного 4,1 ± 0,2 мкм, у контрольного 9,7 ± 0,4 мкм; диаметр бета-клеток у подопытного животного 7,9 ± 0,3 мкм, у контрольного 14,3 ±0,4 мкм. Подтверждена модель аутоиммунного тиреоидита в сочетании с инсулитом и орхитом.

Применение способа позволяет повысить точность моделирования аутоиммунного тиреоидита по сравнению с прототипом за счет создания модели с сочетанием тиреоидита, инсулита и орхита.

Формула изобретения Способ моделирования аутоиммунного тиреоидита путем введения экспериментальному животному химического агента.

отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет приближения модели к течению естественной патологии, животному ежедневно в течение 17-20 дней вводят пролактин в дозе 5070 Ед/кг.

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии. Цель - повышение точности способа за счет приближения модели к течению естественной патологии. Экспериментальному животному ежедневно в течение 17-20 дней вводят пролактин в дозе 50-70 Ед/кг. Применение способа позволяет повысить точность моделирования аутоиммунного тиреоидита по сравнению с прототипом за счет создания модели с сочетанием тиреоидита, инсулита и орхита.