Способ диагностики ревматоидного васкулита Советский патент 1991 года по МПК G01N33/53 

Изобртение относится к медицине, в частности к внутренним болезням, а именно к способу диагностики ревматоидного васку- лита.

Цель изобретения - повышение точности диагностики ревматоидного васкулита путем определения функциональной активности нейтрофилов через исследование реакций адгезии нейтрофилов к сефарозе, конъюгированной с иммуноглобулином G, и к сефадексу, конъюгированному с СЗв-фак- тором комплемента.

Поставленная цель достигается тем, что из гепаринизированной венозной крови исследуемого больного выделяются нейтрофилы на двуступенчатом градиенте плотности фиколл- верографина 1,077/1,116 и определяются уровни их адгезии на сорбенты, содержащие IgG и СЗв-компонент комплемента. В качестве субстрата lgG-зависимой адгезии нейтрофилов используется сефароза 4В (Pharmacia, Швеция), конъюгированная с агрегированным IgG сучетом рекомендаций фирмы-изготовителя. Для определения СЗ а -зависимой адгезии применяется сефадекс G-25 (Pharmacia,

Швеция), опсонизированный комплементом пула сывороток здоровых доноров и освобожденный от прочих, помимо СЗв, лигандов посредством термической обработки. Реагенты используют в виде взвесей в растворе Зенкса в концентрациях: нейтрофилы - 5x106 , lgG-сефароза - 2x104 мл-1, СЗв-сефадекс - 1,5х105 . Взвесь нейтрофилов смешивается в равных объемах с ука- занными сорбентами и инкубируется параллельно с контролем в дважды силико- нированной посуде 30 мин при 37°С. Конт- ролями служат системы, состоящие из нейтрофилов и неопсонизированных гранул сефарозы и сефадекса в тех же концентрациях и объемах, что и в основном опыте. Разница концентраций нейтрофилов в сус- пернатантах контрольной и опытной систем, выраженная в %, является искомым параметром и называется уровнем адгезии нейтрофилов к соответствующему субстрату (сокращено УАН IgG) и УАН (СЗв).

Проведено комплексное обследование больных РА, включавшее, помимо предлагаемого способа ряд клинических, лабораторСО

с

о с GJ ел ел ю

ных методов, а также патогистологическую экспертизу кожного биоптата с целью объективизации воспалительных изменений в сосудистой стенке. Результаты подвергнуты статистическому анализу на основе точного метода Фишера. Исследование позволяет обосновать следующие клинические проекции интервалов количественных изменений параметров IgG и СЗв-зависимой адгезии нейтрофилов: значения УАН (IgG) в пределах 61-80% и УАН (СЗв) в пределах 56-70% являются характерными для больных РА, имеющих ревматоидный васкулит. Они встречаются в 96,4% случаев клинически выраженного ревматоидного васкулита (для сравнения: способ-прототип- в 77,8%).

Значения УАН (IgG) в пределах 40-60% и УАН (СЗв) в пределах 36-55% являются характерными для больных РА, не имеющих ни клинических, ни морфологических признаков ревматоидного васкулита. Уровень достоверности различий параметров адгезии нейтрофилов между больными РА с ва- скулитом и без него составляет р-Ј 0,01.

П р и м е р 1. Больная М., 47 лет. Диагноз: ревматоидный артрит, полиартрит с преимущественным поражением мелких суставов кистей и стоп, коленных суставов, серопозитивный, медленно прогрессирующее течение, активность III, рентгенологическая стадия III, функциональная недостаточность I. Больна 3 года. Находится на лечении нестероидными противовоспалительными средствами, начато лечение кризанолом. Клинико-лабораторный статус: внесуставных знаков не отмечается. ТТела 37°С, Суставной индекс Ричи 11 баллов. Концентрация лейкоцитов в крови 5,5х103 мкл- , СОЭ 37 мм/ч, СРВ ++++, РФ 1:320, ЦИК 0,122 ед.опт.пл.

Дермограммы кожного через 6 ч: нейтрофилов 67%, моноцитов 33%; через 12 ч:нейтрофилов 32%,моноцитов 68%; че- рез24ч: нейтрофилов30%, моноцитов70%.

Показатели адгезии нейтрофилов: УАН (IgG) 53%, УАН (СЗв) 52%, т.е. находятся в интервалах значений, не характерных для ревматоидного васкулита. Справедливость вывода об отсутствии у больной ревматоидного васкулита подтвердило патогистологическое исследование кожного биоптата. Его заключение: эндопериваскулярный склероз и утолщение мелких сосудов, преимущественно артериол. Воспалительных реакций в зоне сосудов не отмечено.

П р и м е р 2. Больная Б., 50 лет. Диагноз: ревматоидный артрит, полиартрит с преимущественным поражением мелких суставов кистей и стоп, коленных суставов, серопозитивный, медленно прогрессирующее течение, активность II степени, рентгенологическая стадия II, функциональная недостаточность I степени, Больна 6 лет. Находится на лечении ортофеном, кризанолом. Клинико-лабораторный статус: внесуставных проявлений не отмечено. Ттела 36,8°С. Суставной индекс Ричи 12 баллов. Концентрация лейкоцитов в крови 4,0х103 , СОЭ 30 мм/ч, СРБ+++, РФ 1:160, ЦИК

0 0,120 ед.опт.пл.

Дермограммы кожного через 6 ч: нейтрофилов 60%, моноцитов 40%; через 12 ч: нейтрофилов 54%, моноцитов 46%; через 24 ч: нейтрофилов 64%, моноцитов

5 36%.

Показатели адгезии нейтрофилов: УАН (IgG) 61 %, УАН (СЗв) 60%, т.е. типичны для ревматоидного васкулита.

Таким образом, в данном случае харак0 терные изменения параметров адгезии нейтрофилов указывают на наличие у больной ревматоидного васкулита, хотя в клинической картине манифестных признаков ревматоидного васкулита не выявляется. Речь

5 идет о диагностике с помощью критериев адгезивности нейтрофилов латентно текущего ревматоидного васкулита. Диагноз верифицирован при патогистологической экспертизе кожного биоптата. Заключение:

0 выраженные продуктивные процессы в стенках мелких сосудов, капилляриты. Пери- васкулярные инфильтраты содержат лимфоциты, макрофаги. Признаки дезорганизации соединительной ткани.

5П р и м е р 3. Больная А,, 36 лет. Диагноз:

ревматоидный артрит с системными проявлениями в виде ревматоидных узелков, лим- фаденопатии, полинейропатии, полиартрит с преимущественным поражением мелких

0 суставов кистей и стоп, коленных суставов, серопозитивный, медленно прогрессирующее течение, активность III рентгенологическая стадия III, функциональная недостаточность II степени. Больна 4 года.

5 Находится на лечении нестероидными противовоспалительными средствами, начато лечение кризанолом. Клинико-лабораторный статус: Ттела 37,2°С. Суставной индекс Ричи 14 баллов. Концентрация лейкоцитов в

0 крови 5,6х103 , СОЭ 38 мм/ч. СРБ+++, РФ 1:320, ЦИК 0,130 ед опт.пл.

Дермограммы кожного через 6 ч: нейтрофилов 65%, моноцитов 35%; через 12 ч: нейтрофилов 38%. моноцитов 62%;

5 через 24 ч: нейтрофилов 29%. моноцитов 71%.

Показатели адгезии нейтрофилов: УАН (IgG) 74%, УАН (СЗв) -58%, те. указывает на наличие ревматоидного васкулита. Заключение патогистологического исследования кожного биоптата: отек сосочкового и ретикулярного слоев дермы, капилляриты, резко выраженные периваскулярные инфильтраты с формированием гранулом из. лимфоцитов, макрофагов, единичных плазматических клеток.

Указанные примеры характеризуют спектр диагностических возможностей предлагаемого способа: он позволяет дифференцировать РА с васкулитом (примеры 2 и 3) от РА без васкулита (пример 1). Применение способа дает положительный результат при диагностике латентно протекающего ревматоидного васкулита (пример 2). При этом способ-прототип ни в одном изданных примеров не показал типичного для ревматоидного васкулита моноцитарного профиля и не принес нужной диагностической информации. Налицо преимущество предлагаемого способа по отношению к способу-прототипу, состоящее в повышении точности диагностики ревматоидного васкулита, кроме того, предлагаемый способ нетравматичен.

Формула изобретения

Способ диагностики ревматоидного васкулита путем определения функциональной

активности нейтрофилов,отличающийся тем, что, с целью повышения точности диагностики, функциональную активность нейтрофилов определяют путем выявления уровней адгезии нейтрофилов к сефарозе, конъюгированной с IgG, и к сефадексу, конъюгированно- му с СЗв-фактором комплемента, и при значениях уровня адгезии соответственно 61- 80% и 56-70% диагностируют ревматоидный васкулит.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при диагностике ревматоидного васкулита. Целью изобретения является повышение точности диагностики. Функциональную активность нейтрофилов определяют путем выявления уровней адгезии нейтрофилов к сефарозе, конъюгированной с JGG, и к сефадексу, конъюгированному с СЗ_В-фактором комплемента, и при значениях уровней адгезии соответственно 61 - 80 и 56 - 70% диагностируют ревматоидный васкулит. Положительный эффект заключается в повышении точности диагностики с 77,8 /прототип/ до 96,4%.