Способ прогнозирования желудочнокишечных болезней новорожденных телят Советский патент 1991 года по МПК A61B10/00 

Изобретение относится к ветеринарии.

Цель изобретения - повышение достоверности и точности способа.

Пример. Для осуществления способа берут пробы молозива по 0,5 мл, в пробы молозива добавляют по 3,0 мл 0,5 N NaOH, встряхивают до получения однородной суспензии, добавляют 2,0 мл 1н. НаЗОз и проводят гидролиз на кипящей водяной бане в течение 20 мин. Гидролизат охлаждают. После охлаждения отбирают пробы по 0,5 мл и определяют содержание сиаловых кислот (в основе метод Warren) с использованием ме- тапериодата и арсенита натрия и 0,6%-ного раствора тиобарбитуровой кислоты в 0,5 М N aaSO-fi.0 наличии сиаловых кислот судят по цвету пробы исследуемого молозива, получившегося в ходе реакции.

На основании данных хроматографиче- ского анализа установлено, что цвет пробы зависит от содержания сиалоаых кислот. По

результатам исследований составлена аналитическая шкала для определения содержания сиаловых кислот, которая не требует проведения хроматографии и спектрофото- метрии проб.

Шкала определения содержания сиаловых кислот в пробах молозива коров-матерей по цвету хромогена после цветной реакции представлена в табл.1,

В качестве стандарта при разработке шкалы использовали М-ацетилнейра- миновые кислоты производства Англии, Латв.ССР, а также сиаловые кислоты, отщепленные от у-глобулина крови человека.

Определение содержания иммуноглобулинов в сыворотке крови новорожденных телят проводят экспресс-методом с использованием сульфитно-натриевого теста (Пфейффер и Мак Гири). Для этого готовят три раствора сульфита натрия с конО

о о о ч

I4D

центрациями 14,0; 16,0 и 18,0%, Берут три пробирки и в каждую наливают по 1,9 мл соответствующего раствора сульфата натрия, затем в каждую пробирку вносят по 0,1 мл испытуемой сыворотки, тщательно перемешивают и выдерживают при комнатной температуре в течение 1 ч. Появление осадка в пробирке с 18%-ным раствором свидетельствует с низком содержании иммуноглобулинов - менее 5,0 г/л (резко выраженная гипогаммаглобулинемия).

При появлении помутнения в пробирках с 18 и 16%-ными растворами содержание иммуноглобулинов, больше 5,0 г/л, но менее 15,0 г/л. Появление мутности или осадка в трех пробирках(18; 16 и 14%-ными растворами) указывает на содержание в сыворотке 15,0 г/л иммуноглобулинов. Этот показатель принят за норму.

Пример 2. У 38 новотельных коров брали пробы молозива и исследовали на Повышенный риск желудочно-кишеч- ных болезней прогнозировали, начиная с 111 группы (содержание сизловых кислот в молозиве 12,0-2,5 мг/мл на фоне пониженноналичие и содержание сиаловых кислот. У новорожденных телят (38 голов) брали пробы крови для определения уровня иммуноглобулинов.

Определение содержания сиаловых

кислот. В пробы молозива (по 0,5 мл) добавляли по 3,0 мл 0,5н, NaOH, встряхивали до получения однородной суспензии, в которую добавляли по 2,0 мл 1н. Н2ЭО4 и проводили гидролиз на кипящей водяной бане в течение 20 мин. Полученный гидролизат использовали для проведения цветной реакции (в основе метод Warren, 1959 г.)

Определение уровня иммуноглобулинов. Готовили 3 раствора сульфита натрия с концентрациями 14,0; 16,0 и 18%. В каждую пробирку наливали по 1,9 мл соответствующего раствора сульфита натрия и вносили по 0,1 мл исследуемой сыворотки, тщательно перемешивали и выдерживали при комнатной температуре в течение 1 ч.

На основе результатов исследований молозива коров-матерей и сыворотки ново- рожденных телят было выделено 5 групп:

Изобретение относится к ветеринарии. Целью изобретения является повышение достоверности и точности прогнозирования болезней новорожденных телят. У новорожденных телят берут пробы крови для определения уровня иммуноглобулинов, а у коров-матерей пробы молозива на наличие и содержание аналовых кислот. При содержании сиаловых кислот на фоне пониженного уровня иммуноглобулинов в пределах 2,5 - 12,0 мг/мл прогнозируют повышенный, а при 0,0 - 0,3 мг/мл - высокий риск желудочно-кишечных болезней у телят. Достоверность способа 70 - 100%. 2 табл.

Iгруппа (4 головы)

IIгруппа (4 головы)

IIIгруппа (13 голов)

IVгруппа (13 голов)

Vгруппа (4 головы)

го уровня иммуноглобулинов), а высокий риск в 4 и 5 группах соответственно (содержание сиаловых кислот 0,3-0,2 мг/мл и 0,0 на фоне пониженного уровня иммуноглобулинов). Прогноз подтвердился (табл.2)

Заболеваемость телят в зависимости от содержания сиаловых кислот в молозиве коров-матерей и уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови телят представлена в табл.2.

Прогнозирование риска желудочно-кишечных болезней у новорожденных телят предлагаемым способом можно проводить в условиях любого хозяйства. Прогностическая достоверность и точность прогнозирования высокие. В результате проведения цветной реакции установлена закономерная зависимость между цветом пробы молоСодержание сиаловых кислот в молозиве - 30,0-17,0 мг/мл, уровень иммуноглобулинов в сыворотке крови телят - 15,0-5,0 г/л Содержание сиаловых кислот в молозиве 25,0-15,0 мг/мл. Уровень иммуноглобулинов в сыворотке крови телят 15,0-5,0 г/л Содержание сиаловых кислот в молозиве - 12,0-2,5 мг/мл, уровень иммуноглобулинов в сыворотке крови телят 15,0-5,0 г/л Содержание сиаловых кислот в молозиве - 0,3-0,2 мг/мл, уровень иммуноглобулинов в сыворотке крови телят 15,0-5,0 г/л Содержание сиаловых кислот - 0,0, уровень иммуноглобулинов в сыворотке крови телят - 15.0-5.0 г/л

зива после проведения цветной реакции и содержанием сиаловых кислот в ней.

Образующийся окрашенный хромоген- ный комплекс не требует экстракции органическими растворителями (бутанол, бутилацетат, циклогексанон и др), что исключает необходимость использования для аналитической реакции токсичных растворителей, дорогостоящую спектрофотометрическую аппаратуру. Стабильный цвет аналитической реакции является достаточно информативным. Это дает возможность проводить реакцию в удобное для исследователя время и своевременно прогнозировать риск желудочно-кишечных болезней у телят.

Предлагаемый способ позволяет прогнозировать возникновение желудочно-кишечных болезней у телят в 70-100% случаев по сравнению с 40,0-50% при анализе только белковых показателей.

Формула изобретения Способ прогнозирования желудочно-кишечных болезней новорожденных телят, включающий определение уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови новорожденных телят, отличающийся тем. что, с целью повышения

По данным хроматографического анализа. Относительно общего количества сиало- вых кислот и других сахарокислот, вступающих в реакцию с реактивами.

достоверности и точности за счет установления степени риска, дополнительно исследуют молозиво коров-матерей на содержание ог-кето-дельта-амино-пента- оксикарбоновых (сиаловых) кислот и при их содержании на фоне пониженного уровня иммуноглобулинов в пределах 2,5-12,0 мг/мл прогнозируют повышенный, а при 0,0-0,3 мг/мл - высокий риск желудочно-кишечных болезней телят.

Таблица 1

Таблица 2