Способ дифференциальной диагностики нефролитиаза Советский патент 1991 года по МПК G01N33/68 

Изобретение отосится к медицине, в частности к уронефрологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики нефролитиаза.

Цель изобретения - повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим способом.

У больного берут 1-1,5 мл крови из вены с цитратом, затем цитратную кровь центри- фугируютпри 1500об/мин втечение Юмин, плазму удаляю. 0,5 мл эритроцитов помещают в пробирку и 2-3 раза промывают охлажденным 0,145 М хлоридом натрия в 20 мМ трис-HCI буфере, к-чждый раэосаж- дая клетки при 1500 об/мин в течение 10 мин и удаляя верхний слой эритроцитов фильтровальной Бумагой. При последней

поомывке эритроциты центрифугируют при 3000 об/мин 15 мин для болер плотной упаковки.

0,2 мл упакованных эритроцитов сме шивают с равным обьемом 1%-ного теина- 20 в 0,25 М сахарозе. Через 60 мин преинкубации с твином-20 эритроциты разводят 0,25 М сахарозой еще в 2 раза Зю разоедение эритроцитов используют для определения ферментативной активности.

В три пробирки разливают по 0,3 мл инкубационной смеси Во 2-ю и 3 ю про бирки помещают по 0,2 мл разпед иных эритроцитов. 8 3-ю пробит с / доблвля.эт алзме тицин до конечной концентрации 300 мкг/мл Пробирки ставят в термостат для инкубгции при44°Св течение 30 мин Поспе инкубации в 1 ю пробирку вводят 0 2 мл разведанных

О

VI со ю XI

о

,.А

эритроцитов и реакцию во всех пробирках останавливают добавлением 0,2 мл 20% ТХУ. Пробирки центрифугируют при 3000 об/мин 10 мин, отбирают 0,2 мл супернатанта, вводят 1,8 мл дистиллированной воды и определяют неорганический фосфор.

К 2 мл (0,2 мл супернатанта + 1,8 мл дистиллированной воды) добавляют 1,6 мл реактива А (10 н. серная кислота - вода - 5%-ный молибдат аммония в соотношении 1:2:1) и через 1-2 мин при непрерывном помешивании приливают 0,4 мл реактива В (120 мг хлорида олова растворяют в 0,5 мл концентрированной соляной кислоты, затем 0,1 мл этого раствора разводят в 12 мл дистиллированной воды и добавляют 25 мг аскорбиновой кислоты). Реактивы А и В готовят непосредственно перед употреблением. Через 15 мин после добавления реактива в пробы замеряют на спектрофотометре при длине волны 710 нм. По калибровочной кривой находят содержание неорганического фосфора в пробе и рассчитывают затем активность фермента в мкмоль -л -с .

При значении исходной активности ниже 1,2 мкмоль-л 1- и стимулированной аламетицином (ЗСОмкг/мл) активности ниже 2,5 мкмоль-л диагностируют первичный характер нефролитиаза, а при исходной активности 1,2 мкмоль фл -с и выше и стимулированной активности 2,5 мкмоль -л -с и выше диагностируют вторичный характер нефролитиаза.

Пример 1. Тимофей Р.,7 лет, находился в стационаре с диагнозом: посттравматическая стриктура уретры, хронический пие- лонефрит, камни мочевого пузыря. Получил автотравму с переломом костей таза, разрывом сигмовидной кишки и прямой кишки, отрывом уретры. При поступлении острая задержка мочи конкрементом мочевого пузыря. По поводу травмы уретры неоднократно ранее оперирован. Произведена цистолитотомия, удалены камни 3,0x2,0 см и 1,5x1,0 см. При контрольном R-обследовании функция почек удовлетворительная, конкрементов в области почек и мочевыводящих путей нет. Анализ мочи и крови без особенностей. Азотвыдели- тельная функция почек не нарушена. Активность АТФ-аз 2,0 мкмоль , после стимуляции 4,6 мкмоль -л 1 . У ребенка имеет место вторичная (приобретенная) форма мочекаменной болезни.

Пример 2. Слава Д., 8 лет, диагноз: состояние после нефроуретероэктомии левой почки, коралловидный камень единственной правой почки, ХПН 1 ст. В анамнезе у старшего брата - мочекаменная болезнь, у матери отмечалась почечная колика. Болезнь обнаружена в возрасте 6 лет, когда в моче были выявлены лейко- цитурия, протеинурия. При рентгенологическом обследовании выявлен коралловидный камень левой почки, не

функционировала левая почка. В 1984 г. левая почка была удалена. В последующий год коралловидный камень образовался в правой почке, однако функция почки сохраняется. В общем анализе мочи - патологии не выявлено, анализ крови без особенностей. Азотвыделительная и концентационная функция почек не нарушена, но периодически отмечается повышение мочевины до 15 мм/л при

норме 8 мм/л. В анализе мочи выявлены обменные нарушения характерные для активного процесса камнеобразования: кристаллурия, этаноламинурия, снижение антикристаллообразующей способности мочи, активность мочи, активность АТФ-аз составляет 1,1 мкмоль-л -с , а после стимуляции 2,3 мкмоль-л с . У ребенка имеет место первичная (наследственная) форма мочекаменной болезни.

Примерз. Ира С., 4 года, находилась в стационаре с диагнозом: удвоение левой почки, коралловидный камень нижней половины удвоенной левой почки, хронический пиелонефрит. В анамнезе у

матери - мочекаменная болезнь. Впервые изменения в моче выявлены в возрасте 1,5 лет - лейкоцитурия, протеинурия, эритроцитурия. В возрасте 3 лет выявлен коралловидный камень нижней половины

левой почки, периодически отмечались боли в поясничной области. 22,03.84 произведена пиелолитотомия слева, удален коралловидный камень 2,0x0,8 см. При повторном исследовании патологии не

выявлено. Общий анализ мочи: единичные лейкоциты в поле зрения, уд. вес мочи 1021, реакция кислая, общий и биохимический анализы крови без особенностей. Кислотно-щелочное равновесие в пределах нормы. Биохимический анализ мочи - выявлены значительные метаболические нарушения, характерные для активного процесса камнеобразования. Активность АТФ-аз составляла 0,35 мкмоль и

после стимуляции 2 мкмоль -л с , У ребенка имеет место первичная (наследственная) форма мочекаменной болезни.

Пример 4. Павел Ч., 6 лет, находился в стационаре с диагнозом: мочекаменная

болезнь, камень левой почки, хроническийФормула изобретения

пиелонефрит. При последнем обследова-Способ Дифференциальной диагностинии в области левой почки конкрементки нефролитиаза путем биохимического ис0,2x1,1 см. Функция почек удовлетвори-следования крови, о т л и ч а ю щ и и с я тем,

тельная. В анализе крови и моче пато-5 что, с целью повышения точности способа,

логии нет. Активность АТФ-аз ву больного определяют уровень активности

стационаре: исходная 1,1 мкмоль ,АТФ-аз в эритроцитах до и после стимулипосле стимуляции 2,6 мкмоль -л -с , а врования аламетицином в дозе 300 мкг/мл,

динамике: 1,15-2,1 мкмоль 0,95-при значении этого показателя менее 1,2

2,7 мкмоль -л мкмоль -л -с , а стимулированной-менее

2,5 мкмоль диагностируют первичВсего обследовано 84 больных, у кото-ный характер нефролитиаза, а при исходной

внести 1,2 мкмоль и выше и стирых была проведена дифференциальная активности диагностика первичного и вторично нефро- мулироваж литиаза с точностью 95%.15 и выше-вторичный характер нефролитиаза.

диагностика первичного и вторично нефро- мулированнойактивности 2,5 мкмоль

Изобретение относится к области медицины, в частности к уронефрологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики нефролитиаза. Целью изобретения является повышение точности способа. Сущность способа заключается в том, что у больного определяют активность АТФ-аз в эритроцитах как исходную, так и стимулированную аламетицином в концентрации 300 мкг/мл. При исходной активности АТФ-аз ниже 1,2 мкмоль ^.л^-1.с^-1 и стимулированной ниже 2,5 мкмоль^.л^-1.с^-1 диагностируют первичный нефролитиаз. При исходной активности АТФ-аз 1,2 мкмоль^.л^-1.с^-1 и выше и стимулированной 2,5 мкмоль^.л^-1.с^-1 и выше - вторичный нефролитиаз. Таким образом можно осуществлять дифференциальную диагностику с точностью до 95%.