Способ определения пораженности хлебных злаков корневой гнилью Советский патент 1991 года по МПК A01H1/04 

1

(21)4764182/13 (22)05.12.89 (46)15.10.91. Бюл. Мз38

(71)Харьковский государственный университет им. A.M. Горького

(72)А.И. Попов и С.Н. Шамрай (53)631.521(088.8)

(56)Пересыпкин В.Ф. Болезни зерновых культур. М.: Колос, 1979, с. 257-259.

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОРАЖЕН- НОСТИ ХЛЕБНЫХ ЗЛАКОВ КОРНЕВОЙ ГНИЛЬЮ

(57)Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции растений. Цель изобретения - увеличение точности и упрощение способа. Для определения пораженности хлебных

злаков корневой гнилью отбирают 10 проб по 10 растений, отделяют нижнюю часть растений, которая обычно поражается корневой гнилью, высушивают ее до воздушно- сухого состояния и измельчают до порошкообразного вида. Полученный порошок насыпают на предметное стекло слоем толщиной 2-3 мм, помещают под ультрафиолетовое излучение, проходящее через светофильтр с длиной волны 254-360 нм, и измеряют интенсивность люминесценции в области 476±10 мм. В качестве эталона используют интенсивность люминесценции здоровых тканей растений, а о степени поражения судят по снижению ее величины в пробе, приготовленной из пораженных растений. 1 табл., 1 ил.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, и может быть использовано в селекции растений.

Цель изобретения - увеличение точности и упрощение способа.

Способ осуществляют следующим образом.

В отобранной пробе у растений отделяют нижнюю часть (при анализе растений до фазы стеблевания - от первичных корней до 7 см выше семени, после выхода в трубку - от первичных корней до первого узла, т.е. используются части растений, на которых проявляется и по которым диагностируется корневая гниль), высушивают до воздушно- сухого состояния (для ускорения процесса высушивания можно применить нагревание образца до 100-105°С), и измельчают до порошкообразного состояния (в ступке, шаровой мельнице и т.д.). Небольшую порцию

(Л

С

порошка, насыпанную на предметное стекло и выравненную, помещают под источник ультрафиолетового излучения. Устройство для облучения состоит из источника ультрафиолетового излучения - ртутно-кварцевой лампы, светофильтра с характеристикой 254-360 нм, кварцевого конденсора, направляющего поток ультрафиолетового иЗ- лучения на исследуемый образец, фотометрической щели, ограничивающей световой поток люминесценции, интерференционного светофильтра на 476 нм ± 10 нм, фотоприемника, операционного усилителя, микровольтметра.

Выбранный диапазон светофильтров был выявлен путем лабораторных исследований чистой культуры гриба-возбудителя корневой гнили и здоровых растений (см. таблицу). При этом выяснилось, что в диапазоне 410-440 нм отсутствует фотолюминесО 00 СО СЛ 00

ценция гриба, а здоровые ткани растений в этом диапазоне люминесцируют при возбуждении фотолюминесцении ультрафиолетовым излучением с длиной волны 254 нм. При возбуждении фотолюминесценции излучением с длиной волны 360 нм в диапазоне 476 нм также нет люминесценции гриба, люминесцируют ткани растения. Для оцен- ки степени поражения был выбран диапа- зон 476 нм, так как в. этом случае наиболее линейна связь между степенью поражения и люминесценцией растений. На фиг. 1 показана зависимость интенсивности люминесценции от степ-ени пораженностм растений кривая 1 - длина волны 476 нм, кривая 2 - длина волны 420 нм.

Ультрафиолетовое излучение от ртутно- кварцевой лампы через светофильтр с длиной волны пропускания 254-360 нм направляется на исследуемый образец и возбуждает его фотолюминесценцию. Люминесцентное излучение проходит через светофильтр на 476 нм, фотометрическую щель и попадает на катод фотоприемника, Электрический сигнал фотоприемника проходит через операционный усилитель на микровольтметр, который и фиксирует интенсивность излучения. В качестве эталона используют интенсивность люминесценции непораженных тканей растений, а о степени поражения судят по снижению ее величины в пробе, приготовленной из пораженных растений.

Интенсивность люминесценции при различных диапазонах светофильтров при- ведена в таблице.

П р и м е р. По диагонали посева отбирают 10 проб по 10 растений (растения выкапывают подряд без-выбора), отделяют от растений нижнюю часть (от первичных корней до 7 см выше семени в фазе всходов), высушивают до воздушно-сухого состояния при 105°С, измельчают в шаровой мельнице. Отдельно отбирают пробу из тканей не- пораженных растений. Полученный порошок насыпают на предметное стекло, выравнивают поверхность маленькой лопаткой, получая слой порошка толщиной 2- 3 мм, и помещают под ультрафиолетовое излучение;проходящее через светофильтр

с длиной волны пропускания 254-360 нм. Возбужденное люминесцентное излучение образцов пропускают через фотометрическую щель и интерференционный светофильтр с длиной волны пропускания 476 нм ± 10 нм на фотоприемник, сигнал которого усиливается операционным усилителем, и подают на микровольтметр. Фотометрическую щель устанавливают так, чтобы сигнал

эталонного образца (непораженных тканей растений) равнялся 1000 мВ. Сигналы опытных образцов равнялись 800 и 600 мВ. Степень пораженности (степень развития заболевания) для данных образцов составляла 20 и 40% соответственно.

Зависимость выхода люминесценции от степени поражения практически линейна и не требует пересчета. Устройство может быть переградуировано в процентные величины развития заболевания.

Использование предлагаемого изобретения по сравнению с известными, например, способам определения степени развития заболевания с применением визуальной шкалы оценки пораженности растений, позволяет получить точные однозначные величины за счет использования объективного показателя, позволяет за счет этого использовать данные величины в математических вычислениях, дает возможность отказаться от дополнительных вычислений степени развития заболевания, позволяет сохранять собранные образцы в высушенном состоянии при невозможности

проведения немедленного определения.

Формула изобретения Способ определения пораженности хлебных злаков корневой гнилью, включающий отбор проб растений и их анализ, отличающийся тем, что, с целью увеличения точности и упрощения способа, анализу подвергают нижнюю часть растений, высушивают ее до воздушно-сухого состояния, измельчают в порошок, облучают ультрафиолетовым излучением в диапазоне 254-360 нм, измеряют интенсивность люминесценции в области 466-486 нм и по ее снижению в сравнении со здоровыми тканями судят о степени пораженности растений.

У, «в 7000

I

--.

%ч.

Чг800 ..

600

WO .. 200 ..

Продолжение таблицы

Ч

J х,бамы