Способ прижизненного изучения микролимфоциркуляции Советский патент 1991 года по МПК G01N33/487 

Изобретение относится к медицине, а именно к физиологии.

Цель изобретения - комплексная оценка параметров микролимфоциркуляции.

Способ осуществляется следующим образом.

У крысы в условиях наркоза (нембутал 50 мг/кг в/м) выделяют петлю кишечника через срединный разрез брюшной стенки. Петлю помещают на световод столика с термостабилизацией и орошением изотоническим раствором хлорида натрия с температурой 38° С. В брыжейке кишки находят петлю, содержащую лимфатический и кровеносный сосуды, доступные для биомикроскопии. На микроскоп устанавливается фотометрическая насадка. В поле зрения микроскопа помещается фотометрируемый объект (кровеносный, лимфатический микрососуд кишки). Диафрагму фотометрической насадки проецируют на изображение Объекта и располагают на небольшом расстоянии (20 - 30, мкм) от объекта. При

сокращении стенки кишки, стенки или клапана микролимфососуда, пульсации артери- олы, движении брыжейки в ритме дыхания возникает перемещение, при котором перекрывается диафрагма оптически плотной структуры кишки, стенки или клапана микролимфососуда, артериолы, что приводит к изменению оптического сигнала, регистрируемого на самописце. Регистрация ритмично изменяющейся оптической плотности соответствует частоте сокращения стенки кишечника, стенки или клапана микролимфососуда, пульсации артериолы, частоте дыхани. Продолжительность изменения оптической плотности (время перекрытия диафрагмы) соответствует длительности сокращения объекта. При отсутствии сокращения объекта на бумаге - прямая линия.

Пример 1. Крысе-самцу массой 250 г внутримышечно вводится нембутал 12,5 мг в 1 мл физиологического раствора (50 мг/кг). Через 30 мин после наступления наркотического сна с брюшной стенки жиС

ы xi

ел

вота удаляются стрижкой волосы, поверхность обрабатывается 96е спиртом. Производится разрез брюшной стенки по белой линии живота длиной 1 см. Выводится через разрез наружу петля кишки и помещается на световод специального столика для биомикроскопии с термостабилизацией. Петля кишки орошается подогретым до 38° С физиологическим раствором. В брыжейке кишки находят петлю, содержащую лимфатический микрососуд и кровеносные микрососуды, доступные для биомикроскопии. На микроскоп устанавливается фотометрическая насадка. В позе- зрения микроскопа помещается фотометрируемый объект: вначале кровеносный, потом лимфатический сосуд, поток стенка кишки. Диафрагму фотометрической насадки проецируют на изображение объекта и располагают на расстоянии 20 мкм от объекта.

Диафрагма фотометрической насадки около стенки пульсирующего кровеносного микрососуда. Ритмичное перекрытие диафрагмы сосудом в ритме пульсации регистрируется на самописце. Скорость протяжки бумаги на самописце 20 мм/с. Частота пульса 420 в мин подсчитывается по количеству волн, записанных в течение минуты. Диафрагма фотометрической насадки около стенки артериолы, перемещающейся вместе с тканью брыжейки в ритме дыхания животного. Ритмичное перекрытие диафрагмы в ритме дыхания записывается на самописце в виде волн: подьем - вдох, спад волны - выдох. Скорость записи 20 мм/с. Частота волн равна 70 в мин, что соответствует частоте дыхания.

Фотометрическая диафрагма располагается в центре кровеносного микрососуда. Изменение кровенаполнения артериолы брыжейки связано с изменением притока эритроцитов, поглощающих свет и вызывающих изменение оптической плотности сосуда. Проведена запись кровенаполнения артериолы диаметром 25 мкм до воздействия и снижение кровенаполнения артериолы и оптической плотности после аппликации 500 мкг/0,1 мл гистамина на поверхность артеориолы. Амплитуда записи кривой увеличилась в 2 раза, что свидетельствует о резком снижении кровенаполнения артериолы.

Фотометрическая диафрагма располагается в 20 мкм от стенки внутри лимфатического микрососуда. Движение стенки перекрывает диафрагму, вызывает изменение оптического сигнала. На самописце регистрируется подъем волны при сужении просвета и спад волны при восстановлении просвета лимфатического микрососуда. Частота сокращения за 1 мин соответствует 17,

Скорость записи 2 мм/с.

Фотометрическая диафрагма располагается около внутренней поверхности клапана. Движение клапана перекрывает диафрагму, вызывая изменение оптического сигнала. Каждое сокращение клапана регистрируется в виде двух пиков: закрытие - первый пик и открытие клапана - второй пик. Частота сокращения клапана 12 в мин. Фотометрическая диафрагма располагается около сосуда кишечной стенки. Двигательная активность кишечника сопровождается смещением кишки вместе с сосудом, который перекрывает фотометрируемый участок в ритме сокращения кишки.

Изменение оптической плотности фотомет- рируемого участка регистрируются на самописце. Частота сокращения равна количеству волн. Частота сокращения кишечника 23 в мин.

Анализ данных по приведенным параметрам (высокая частота сокращения стенки и клапана лимфатического микрососуда, стен ; ишечника, нормальная частота дыхания и пульса) свидетельствуют об активном состоянии лимфооттока из брыжейкм кишечника крысы.

Применение способа позволяет одновременно оценить частоту дыхания, пульса, сокращения мускулатуры кишечника, стенки и клапана лимфатического микрососуда, кровеносных сосудов.

Формула изобретения

Способ прижизненного изучения мик- ролимфоциркуляции, включающий биомикроскопию, отличающийся тем, что, с целью комплексной оценки параметров микролимфоциркуляции, выделяют участок

брыжейки кишечника и осуществляют биомикроскопию его с помощью фотометрической насадки.

Изобретение относится к медицине, а именно к физиологии. Цель - комплексная оценка параметров микролимфоциркуля- ции. С этой целью выделяют участок брыжейки кишечника и осуществляют биомикроскопию его с помощью фотометрической насадки. Применение способа позволяет одновременно оценить частоту дыхания, пульса, сокращения мускулатуры кишечника, стенки и клапана лимфатического микрососуда, кровенаполнение сосудов.