Способ перфузии изолированного сердца в эксперименте Советский патент 1991 года по МПК A61M1/00 

1

(21)4712439/14 (22) 30.06.89 (46)15.11.91. Бюл. №42

(71)Каунасский медицинский институт

(72)А.П. Кашаускас, А.-А.Й. Тамулявичюс, В.А. Кунах, Л.Ю. Лукошявичюс и А.К, Праш- кявичюс

(53)615.476(088.8)

(56) Актуальные проблемы физиологии и патологии сердечно-сосудистой системы. Каунас, 1986, с.20-21.

(54) СПОСОБ ПЕРФУЗИИ ИЗОЛИРОВАННОГО СЕРДЦА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

(57) Изобретение предназначено для исследования нарушений активности белоксин- тезирующей системы миокарда при аноксии. Цель изобретения - предупреждение нарушения белоксинтезирующей системы при аноксии. Осуществляют перфузию изолированного сердца животного, при этом, предварительно в перфузат вводят настойку биомассы полисциаса папоротнико- листного в количестве 0,5 мл настойки на 1 л перфузата. Настойка полисциаса оказывает защитное действие на активность белоксинтезирующей системы.

Изобретение относится к- биохимии и может быть использовано при исследовании нарушений активности белоксинтезирующей системы миокарда при аноксии.

Цель изобретения - предупреждение нарушения белоксинтезирующей системы при аноксии.

Способ осуществляется следующим образом. Проводят бескислородную перфузию изолированного сердца животного, при этом предварительно в перфузат вводят настойку биомассы полисциаса папоротнико- листного в количестве 0,5 мл на 1 л перфузата.

Пример 1. За 5 мин до начала эксперимента животным через вену вводили гепарин (300 ед/кг) для снижения свертываемости крови. Свиней усыпляли путем введения тиопенталнатрия (16 мг/кг) внутривенно, сердце быстро извлекали, помещали в охлажденный (2°С) физиологический раствор. Перфузию проводили по модифицированной методике Лангендорфа, для чего сердце предварительно промывали в

течение 5 мин бикарбонатным буфером Кребса-Хензеляйта, насыщенным газовой смесью 95% Оа + 5% СОа. Сердца перфузи- ровали, используя аппарат искусственного кровообращения АИК-5, под давлением 60- 80 мм рт.ст.Обьем перфузируемого буфе- ра 5 л, температура 37,0 ± 0,5°С. Постоянное значение рН буфера (7,40 ±0,05) поддерживали добавлением определенного количества 5%-ного раствора МаНСОз. Аноксию миокарда воспроизводили путем 20-минутной, перфузии сердец бескислородным буфером. Настойку биомассы Polyscias flllcifolia Bailey вводили в перфузат сердец за 5 мин до воспроизведения аноксии из расчета 0,5 мл настойки на 1 л перфузируемого буфера. После 20-минутной перфузии в условиях аноксии определяли активность компонентов белоксинтезирующей системы -транспортных РНК и аминоацил-тРНК- синтетаз миокарда свиньи. Установлено, что акцепторная активность тРНК (в нмолях аминокислоты на 1 мг тРНК, п 6), специфичных к аланину, глутаминовой кислоте,

(Л

с

о

S

VJ

vj Ю

лейцину и серину, в контроле составляет соответственно 3,03 ±0,17, 3,7 ± 0,34, 2,75 ±0,19, 2,57 ±0,18, а при аноксии снижается на 33-58%, что показывает снижение активности молекул тРНК при аноксии.

При перфузии аноксических сердец в присутствии настойки Polysclas fillclfolla Bailey данные активности выражены следующими значениями: 2,82 ±0,20; 4,55 ±0,60; 3,02 ± 0,23; 2,46 ± 0,09, которые не отлича- ются от контрольных значений.

В контроле аланил-, глутамил-, лейцил- и серил-тРНК-синтетазная активность миокарда свиньи составляет (в пмолях аминоа- циЛ-тРНК на 100 мкг белка за 1 мин, п 6); 40,6 ± 3,6; 42,6 ± 4.6; 71,8 ± 6,5; 44,1 ± 3,5. При аноксии миокарда свиньи активности данных ферментов увеличиваются на 66- 76%. При перфузии аноксических сердец с введенной в перфузат настойкой полисциа- са активности ферментов не изменяются по сравнению с контролем и составляют соответственно 37,0 ± 2,4; 43,0 ± 6,1; 74,0 ± 7,5; 39,0 ± 2,3.

При перфузии аноксического сердца в присутствии настойки полисциаса в количе- стве 0,175 мл или 0,25 мл на 1 л перфузата

данные активности белоксинтезирующей системы не отличаются от значений активности при аноксии.

Положительный эффект - подтвержден результатами экспериментального исследования. Животные были разделены на 3 группы: первая группа контрольная, во второй воспроизводили аноксию миокарда, в третьей перед воспроизведением аноксии вводили в перфузат сердец настойку полисциаса в количестве 0,5 мл на 1 л перфузата. Во всех группах эксперименты проведены на 6 животных, определяли активность компонентов белоксинтезирующей системы.

Результаты свидетельствуют о том, что настойка биомассы полисциаса папоротни- колистного оказывает защитное действие на активность белоксинтезирующей системы.

Формула изобретения

Способ перфузии изолированного сердца в эксперименте, отличающийся тем, что, с целью предупреждения нарушения белоксинтезирующей системы при аноксии, в перфузат вводят настойку биомассы полисциаса папоротниколистного в количестве 0,5 мл настойки на 1 л перфузата.